肺炎支原体与衣原体 美国美德声科学技术公司 中国市场产品支持专线：800 810 6607 med2@med-2.com.

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1 肺炎支原体与衣原体 美国美德声科学技术公司 中国市场产品支持专线：

2 Ani Labsystems Ltd. Oy ---芬兰的诊断产品公司 呼吸道疾病产品
主要致力于感染疾病等酶标产品的研发和销售，产品在全球销售。 肺炎支原体 IgM / IgG / IgA 呼吸道疾病产品 肺炎衣原体 IgM / IgG / IgA 百日咳杆菌 IgM / IgG / IgA

3 肺炎（pneumonia）是指终末气道、肺泡和肺间质的炎症，可由病原微生物、理化因素、免疫损伤、过敏及药物所致。
肺 炎 概 述 肺炎（pneumonia）是指终末气道、肺泡和肺间质的炎症，可由病原微生物、理化因素、免疫损伤、过敏及药物所致。 病原微生物： 细菌、病毒、真菌，等 支原体肺炎 衣原体肺炎

4 Mycoplasma Pneumoniae
肺炎支原体 Mycoplasma Pneumoniae

5 从人体分离出16种支原体， 5种对人有致病性，即肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、生殖支原体及发酵支原体。 肺炎支原体是呼吸道感染、肺炎的主要原因

6 概 述 1938年，Reimann报道了7名罹患肺炎的患者，临床表现不同于一 般的细菌性肺炎，当时称为原发性非典型肺炎。
概 述 1938年，Reimann报道了7名罹患肺炎的患者，临床表现不同于一 般的细菌性肺炎，当时称为原发性非典型肺炎。 1944年，Eaton等从一名患原发性非典型肺炎患者的痰液中，分离出一种病原体，可引起棉鼠和地鼠肺炎，因其能通过虑菌器而疑为病毒，称为Eaton因子。 1962年，Chanock和Hayflick应用无细胞人工培养基成功分离培养Eaton因子，并提议将其命名为肺炎支原体。

7 生物学特性 是一类目前所知能独立生活，自行繁殖的最小微生物。 基因组是环状双股 DNA 。
1996 年，首次对肺炎支原体进行了全基因组测序 ，测序株全长 816,394bp ，编码 687 个基因。 二分裂的生长方式。

8 流行病学1 ------传染源及传播途径 MP仅寄生于人类，传染源是患者及携带者。
潜伏期和治疗期间均有传染性，病初4~6天传染性最强，3~5周后消失。

9 流行病学2 ------易感人群 人类对MP普遍易感，总的发病率取决于人群易感性。
5~9岁儿童为发病高峰，其次是10~14岁年龄段儿童，近年来发病年龄有提前的趋势，另有新生儿支原体肺炎的报道。 集中在大、中、小学生，军人和囚犯为高危人群。 成人症状较轻，免疫功能低下者常引起严重感染，且带菌状态可持续很长时间。 军人等高危人群肺炎支原体肺炎占所有肺炎发病率的20%~50%

10 流行病学3 ------流行特征 全球性分布，无地区性差异。 局部流行、爆发流行。
平时散发，寒冷季节发病率较高，占住院肺炎的10~20%，流行期间可占30%。 每4~5年有1次流行，被戏称为“奥林匹克病”；近年来平均每2~6年在全球出现流行。 MP和CP占CAP混合感染的1/3~2/3，尤与肺炎链球菌混合感染常见。 军人等高危人群肺炎支原体肺炎占所有肺炎发病率的20%~50%

11 支原体学/吴移谋等主编.-2版.-北京：人民卫生出版社，2008.1
1994~1999日本 552例CAP调查 仅次于链球菌引起的肺炎 1998~1999泰国 平均28.3岁肺炎调查 MP：21.3% 2000印度新德里 62例平均42.7岁肺炎调查 MP：35.5% 2002土耳其 55例平均7.8岁肺炎调查 MP：34.5% 美国通过系统的血清学和分子生物学调查MP的发病率：1.9~30% 欧洲10个国家26个前瞻性研究组调查了5961例CAP CP：第2位； MP：第4位 北美临床研究显示,在社区获得性肺炎(CAP)的调查中 门诊患者中 CP/MP：30~55% 住院患者中 CP/MP：30~75% 支原体学/吴移谋等主编.-2版.-北京：人民卫生出版社，2008.1

12 临床表现 MP 经飞沫传播侵入机体，粘附于呼吸道细胞表面，并由上呼吸道逐渐向下呼吸道蔓延，引起气管及支气管、喉炎，重症者导致肺炎。此外，也可同时或相继引起脑炎、心肌炎、肝炎等肺外症状。 呼吸道症状: 潜伏期1-11天，发热可持续1-2周，X线表现近半数两侧可被侵害，75-90%有下叶受累，X线体征可长达 3周以上。

13 支原体学/吴移谋等主编.-2版.-北京：人民卫生出版社，2008.1
肺外并发症: MP可进入血液，在呼吸系统以外的部位增值，引起肺外并发症，出现于呼吸道症状后3~30天。 皮肤损害：皮疹的发生率约25%。 神经系统：MP感染患儿约7%发生中枢神经系统损害。 心血管系统：发生率约4~5%。 血液系统：以溶血性贫血多见，也有血小板、WBC减少。 泌尿系统：可出现蛋白尿、血尿、肾衰竭。 运动系统：可导致关节炎等。 其他损害：可出现肝功能轻、中度损害。 神经系统中支原体脑炎最为常见约占70% 心血管系统表现为心肌炎、心包炎、充血性心力衰竭等 支原体学/吴移谋等主编.-2版.-北京：人民卫生出版社，2008.1

14 [病理生理] 肺炎病理生理发生发展示意图 病原体 毒素 上呼吸道炎 支气管炎 肺 炎 肺组织充血水肿渗出 支气管粘膜充血水肿渗出
病原体 毒素 上呼吸道炎 支气管炎 肺　炎 肺组织充血水肿渗出 支气管粘膜充血水肿渗出 换气障碍 通气障碍 低氧血症 高碳酸血症 毒血症  肺动脉 肺动脉反 呼吸 呼吸衰竭 高压 射性收缩 循环系统 DIC 神经 脑水肿，脑病 心力 心肌 消化 出血，肠麻痹 衰竭 受损 酸碱失衡 中毒性心肌炎

15 --支原体及血清学检查阳性，是诊断本病的主要依据。
实验室诊断 --支原体及血清学检查阳性，是诊断本病的主要依据。 病原学检查 CA: 冷凝集试验的原理是人感染支原体后，血清中除出现特异性抗体外，还存在由I抗原刺激机体产生的非特异性IgM 冷凝集素，即在4℃条件下可凝集人的0型红细胞或自身洗涤红细胞，在37℃温浴后凝集现象消失。其滴度≥64倍时对诊断支原体感染有参考意义。其优点是操作简便。缺点是该试验灵敏度及特异性较低，不是确诊指标，仅能作为筛选的手段。 CF: （主要为IgM）该实验用的脂质抗原存在于人体组织及某些细菌，有时出现交叉分那英，给鉴别带来困难，且操作繁琐，临床上不常用。 MI： 原理为待测血清中如果存在MP抗体，则能抑制其相应支原体的生化反应，需时较长。 GI： 高效价的特异性抗血清直接和MP细胞膜上的受体作用使之生长得到一致，较敏感，但需要5~7天才能观察结果。 IF：需荧光显微镜特异性高，敏感性稍差。 外膜蛋白：用P1蛋白单克隆抗体检测P1蛋白。易出现交叉反应。

16 病原学检查 没有细胞壁，基本形态有球型、双球型及丝状。
在固体培养基上一般 3 ～ 7 天后方能形成集落，肉眼很难观察，必须借助低倍镜观察，典型菌落呈“油煎蛋”样。 肺炎支原体在固体培养基上一般 3 ～ 7 天后方能形成集落，直径大约 100 ～ 150 μ m ，典型的菌落一般为圆形，边缘整齐、表面光滑，周遍有一圈薄的透明颗粒区，为菌落在琼脂表面散开生长部分。中央部分较厚，颗粒状，为陷入琼脂内生长部分。肉眼很难观察，必须借助低倍镜观察，典型菌落呈“油煎蛋”样。对于初次分离的菌株培养时一般不出现典型菌落，一般为圆形、隆起、有颗粒状菌落，传代后可出现典型菌落 典型“油煎蛋”菌落 原代菌落 电镜下形态

17 培养基：需要丰富的胆固醇、血清蛋白和酵母浸液。
培养条件：pH 为 7.0~8.0 ， 温度36 ℃～ 37 ℃ ，环境5~10% CO 2 。 肉汤培养基 左 阴性对照（红色） 右 MP 生长（黄色） 生化反应：利用其分解葡萄糖、甘露糖，还原亚甲蓝等生化特性与其他支原体进行鉴别 。 肺炎支原体一般大气环境可以生长，但在初次分离的标本和固体培养基培养时含 5% CO 2 及 95% N 2 的气体环境中生长为宜。支原体在液体培养基中生长繁殖达高峰后，若继续培养，会由于培养基 pH 的变化很快死亡，故应该根据培养基颜色变化及时做出判断。 OXOID 变色培养基左 阴性对照（深色） 右 MP 生长（绿色）

18 免疫学检查 非特异性试验：33~76%的MP感染者冷凝集试验阳性，一般在第1周末或第2周出现，1~2个月消失。冷凝集效价在1：64或以上有诊断意义。不适用于MP感染的确认。 特异性试验：感染后7~9天，血清特异性抗体开始升高，3~4周达高峰。恢复期较急性期抗体滴度升高4倍或以上有诊断意义。特异性高，对于确认MP感染有一定的诊断价值。 肺炎支原体感染后最先在血清中出现的是MP—IgM 抗体[3]，人感染肺炎支原体的潜伏期一般为2～3 周，IgM 一般出现在MP 感染后7～14d，3～4 周达到高峰， 以后逐渐下降直到转阴，MP—IgG 是后于MP—IgM 抗体出现的抗体，随着MP—IgM 抗体的下降，MP—IgG 阳性率逐渐上升。 对于呼吸道感染、气管及支气管炎等儿童患者应及早检测肺炎支原体MP—IgM[4]，而对于急性期后期同时还伴有其他系统的并发症有，应同时检测MP—IgM、MP—IgG，以利于患者早诊断、早治疗、早康复。 儿童肺炎支原体抗体IgM、IgG 检测的临床意义-任力群，资捷，林立鹏，黄敏秀-中国热带医学2009 年第9 卷第4 期

19 分子生物学检查 PCR法：扩增的靶基因包括16SrRNA基因的可变区、P1蛋白、ATP酶操纵子，敏感性和特异性从53.8~100%不等。易出现假阳性和假阴性。 标本类型：咽拭子、痰及支气管肺泡灌洗液。 DNA探针杂交法：目前用于MP研究的探针有特异性DNA片段探针、人工合成的核苷酸探针和全DNA探针。 标本类型：痰液，对咽拭子标本检测价值不大。 因呼吸道分泌物中有PCR反应抑制物会导致假阴性。敏感性高，在条件不够成熟的实验室或一次操作标本过多会出现假阳性。

20 辅助性检查 血象检查：CRP、血沉、LH等指标均出现异常，白细胞升高不明显，而细菌性肺炎时白细胞升高明显，可鉴别。特异性不高。
影像学检查：X线检查，特异性不高，不能确诊。

21 Mycoplasma pneumoniae EIAs(2000) ：全球首个取得CE认证
产品介绍 ---Ani Labsystems 美德声推广的MP-IgM抗体检测试剂盒用于定性检测人血清和血浆中肺炎支原体特异的IgM抗体。有助于辅助诊断记性肺炎支原体感染。 Mycoplasma pneumoniae EIAs(2000) ：全球首个取得CE认证

22 肺炎支原体试剂盒组成 MP-IgM EIA Kit 微孔板 阴性对照品（人血清） 临界值对照（人血清） 阳性对照品（人血清）
MP-IgG去除剂 HRP标记的二抗 洗涤液 TMB 终止液 微孔板贴膜

23 肺炎支原体试剂盒检测原理 微孔板表面包被有一层P1片段 特异抗原 加入样本 37度孵育60分钟 需时150分钟 洗板后加入标记有HRP的二抗
准确、特异性强 37度孵育60分钟 加入底物显色液 室温孵育30分钟 加入终止液后测OD值

24 产品性能 1 批内重复性 样本 次数 S/Co CV% Sample 1 20 2.7 13.3 Sample 2 1.7 10.5
4.5 9.5 批间重复性 样本 次数 操作者 批数 总数 S/Co CV% Sample 1 2 4 34 59 3.2 11.8 Sample 2 2.8 13.8 Sample 3 57 3.3 14.3 Sample 4 4.3 15.6

25 产品性能 2 EIA1（%） 竞争厂商 EIA2（%） EIA（%） 敏感性 100 特异性 93 64 95 阳性预测值 74 27 80
Ani Labsystems EIA（%） 敏感性 100 特异性 93 64 95 阳性预测值 74 27 80 阴性预测值 有效性 94 68 96 标本：17对提示MP感染的标本；21对确认RSV感染标本；20对确认甲流感染标本；13个确认EBV感染标本；20个确认CP感染和1对确认的CP感染标本。

26 肺炎支原体产品特点 即用型试剂，可拆卸板条； IgG去除剂，有效消除类风湿因子的干扰； 阴性对照、临界值对照、阳性对照均为人血清基质；
独特的标记便于板条的识别。 底物、洗液、终止液可以通用。 与ANI Labsystems CP、BP等可同步操作。 2~8℃储存，有效期12个月。

27 竞争产品

28 培养法 传统培养法培养时间较长。 武汉菁华：快速培养法，6小时出结果。 原理：通过MP生长分解Glu产酸，使指示剂的颜色由红变黄。
采样：咽后部扁桃体部位 注册证号 鄂食药监械(准)字2009第 号 批准日期 有效日期 生产厂商 武汉菁华时间科技有限公司 原理：肺炎支原体利用试剂中的高营养和快速生长因子迅速增殖，同时分解葡萄糖产酸，使试剂pH值降低，试剂中指示剂的颜色随pH值下降而由原来红色变为黄色。

29 特点： 传承徽生物检测的“金标准”,创建了“快速培养法”。 创新世界微生物培养技术。 突破传统培养时间障碍(3-7天)，首创6小时快速培养。
稳定性好可在常温下保存7天不影响到效果。

30 凝集法 特异性检测MP总抗体，日本富士。 原理：致敏粒子与人血清中存在的MP抗体发生凝集反应。 注册证号
国食药监械(进)字2009第 号 注册代理 珠海丽珠试剂股份有限公司 批准日期 有效日期 生产厂商 FUJIREBIO INC. 性能组成 致敏粒子、未致敏粒子、阳性对照、血清稀释液。2~10℃保存，有效期12个月

31 特点： MP（Mac株）细胞膜成分致敏明胶粒子，采用凝集法定性/半定量检测MP抗体。
致敏/未致敏粒子为冻干粉，使用前复溶，当天使用，冷藏可5天内使用，每次使用前充分混匀。 阳性对照滴度为1：320，来源为兔血清。 反应时间3小时后观察结果。 试剂有效期，2~8 ℃保存12个月。 无法区分急性期感染还是急性期后期（伴有其他并发症）。 IgG抗体出现说明肺炎感染仍未解决，出现时间较晚，如果出现则长时间存在，且降低缓慢，IGA常迅速降低。IGM可持续两个月。检测IGM意义重大。 对于呼吸道感染、气管及支气管炎等儿童患者应及早检测肺炎支原体MP—IgM[4]，而对于急性期后期同时还伴有其他系统的并发症有，应同时检测MP—IgM、MP—IgG，以利于患者早诊断、早治疗、早康复。 儿童肺炎支原体抗体IgM、IgG 检测的临床意义-任力群，资捷，林立鹏，黄敏秀-中国热带医学2009 年第9 卷第4 期

32 ELISA法 在血清学检测方法中应用最为广泛，方便、快捷。 特异性检测血清中MP特异性抗体。 试剂品牌： 生 产 商 检测指标
生 产 商 检测指标 Ani Labsystems MP-IgM / IgG / IgA EUROIMMUN MP-IgM / IgG Virion / Serion GenBio / ImmunoWell

33 EUROIMMUN 定性/半定量（与Cut-off比值）检测MP-IgM 有效期1年 反应时间：30+30+15=75min（室温）
MP-IgG 注册证号 2010第 号 2010第 号 批准日期 有效日期 IGG微孔板：包被有抗原的微孔12条，每条有8个可拆分的微孔；标准品1：200RU/ml(IgG，人)；标准品2：20RU/ml(IgG，人)；标准品3：2RU/ml(IgG，人)；阳性对照：IgG，人；阴性对照：IgG，人；酶结合物：过氧化物酶标记抗人IgG(兔)；样本缓冲液；清洗缓冲液；色原/底物液：TMB/H2O2；终止液：0.5M硫酸；产品说明书；靶值参照表。产品有效期：2-8℃保存，不要冰冻。未开封前，除非特别说明，试剂盒中各成分自生产之日起可稳定1年。附件：注册产品标准，产品说明书。产品适用范围该产品用于体外定量或半定量检测人血清或血浆中的抗肺炎支原体抗体IgG。

34 Virion / Serion 定性/定量检测MP-IgM 1 样本准备复杂（1：5，1：101） 2 结果判断比较麻烦 3
类风湿因子去除（另行购买） 4 底物液 pNPP（405nm） 5 4PL 单点定标 Rf去除剂：稀释缓冲液=1：5 （V） ，样本：V=1：101

35 标本、对照血清（1：100），Sub（1drop+1ml），洗液（20 × ） 1滴浓缩ABTS加到1ml Sub缓冲液稀释后，1小时内使用
GenBio / ImmunoWell 定量检测MP-IgM， A(U/mL)=（OD样本×浓度cal）/ODcal 阴性：A＜770 U/mL 阳性：A＞950 U/mL 包被抗原 P1-Protein 需要稀释 标本、对照血清（1：100），Sub（1drop+1ml），洗液（20 × ） 显 色 液 ABTS（405nm）； 1滴浓缩ABTS加到1ml Sub缓冲液稀释后，1小时内使用 反应时间 = 150 min 四步，第一步30min加IGG去除剂，试管中室温反应半小时；标本、质控、标准均要。

36 胶体金法 厂家介绍： 兰州雅华、潍坊康华 快速检测MP-IgM，特异性不高，易出现假阳性，不适于批量标本检测。
特点：一步法检测，简便、快速。

37 PCR法 厂家介绍： 达安基因，试剂报价1200/20tests 检测MP-DNA，需要配PCR分析仪，实验室及技术人员要求高。
对感染早期诊断有意义。 厂家介绍： 达安基因，试剂报价1200/20tests 标本：痰液、肺及支气管灌洗液、咽拭子

38 肺炎衣原体 Chlamydia Pneumoniae

39 概 述 1986年Grayeton等在学生急性呼吸道感染中，发现一种衣原体，以后于成人呼吸道疾病中亦被发现，当时命名为鹦鹉热衣原体TWAR-TW株，后经研究证明该衣原体为一新种、并定名为肺炎衣原体。 衣原体是一种严格的细胞内寄生生物，已知有3种对人有致病性，即肺炎衣原体、沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体。 肺炎衣原体是呼吸道感染、肺炎的主要原因。 肺炎衣原体只有一个血清型TWAR株。

40 生物学特性 具有DNA和RNA两种类型的核酸，二分裂增值。 没有合成ATP等高能化合物的能力。 对多种抗生素敏感：四环素、红霉素等。
对热敏感：56℃-60℃，只能存活5-10 min。 有独特的发育周期。 有细胞壁，不含肽聚糖，微量的细胞壁结构。 原生小体（elementary body，EB）：是发育周期的感染阶段，具感染力 网状小体（initial body，RB）：是在感染细胞内的繁殖阶段，具曾致力。在电镜下课件细胞膜呈有丝分裂繁殖。 EB先附着于易感细胞的表面，然后通过细胞的吞噬作用进入细胞内，形成RB在细胞内繁殖，以后形成包涵体，同时对组织产生炎症变化而引起的一系列临床症状， 生长周期约48h。衣原体始终处于一个吞噬体中指导细胞严重损伤和细胞死亡。

41 流行病学1 ------传染源及传播途径 CP仅寄生于人类和哺乳动物，人类是CP唯一储存宿主，传染源是患者及无症状携带者。
传播途径：主要经飞沫或呼吸分泌物道传播，可广泛寄居于呼吸道。 潜伏期3~4周

42 流行病学2 ------易感人群 CP感染表现差异较大，常可无任何症状，事实上每一个人在一生中某一个时段都会受到CP的感染①
①：衣原体肺炎流行病学特征，张建华.实用儿科临床杂志.第24卷16期：2009年8月.

43 流行病学3 ------流行特征 具有散发和流行交替出现的特点。 四季均可发生，随年龄增长，抗体阳性率呈线性上升。
国外对成人肺炎研究表明2~43%的CAP与CP感染有关；对连续住院的CAP患者，CP抗体阳性率高达63.8%。 国内报道经DNA和血清学检测亚洲地区成人CAP的流行病学研究表明CP占成人病原的5.8%。 ①：衣原体肺炎流行病学特征，张建华.实用儿科临床杂志.第24卷16期：2009年8月.

44 临床表现 CP经飞沫传播侵入机体，引起咽炎及支气管、喉炎，轻症无明显症状，成年人肺炎多较严重。此外，并可能伴随肺外表现如神经系统损害、心脑血管疾病等。 呼吸道症状: 白细胞计数正常，X线无特异性，表现多为单侧下叶浸润，咳嗽症状可持续3周以上。 青少年常有声音嘶哑、干咳、有时发热、咽痛等咽炎、喉炎、鼻窦炎、中耳炎和支气管炎等症状，且可持续数周之久，发生肺炎通常为轻型，与肺炎衣原体感染的临床表现极为相似，并可能伴随肺外表现如红斑结节、甲状腺炎、脑炎和格林-巴利综合征。成年人肺炎多较严重，特别是老年人往往必须住院和呼吸支持治疗。有作者经血清学调查发现肺炎衣原体感染与冠心病之间有关联，但尚须进一步确定。另外，肺炎衣原体感染发生哮喘的机制亦在研讨之中。　本症临床表现无特异性，与支原体肺炎楥相似。起病缓，病程长，一般症状轻，常伴咽、喉炎及鼻窦炎为其特点。上呼吸道感染症状消退后，出现干湿啰音等支气管炎、肺炎表现。咳嗽症状可持续3周以上。白细胞计数正常，胸片无特异性，多为单侧下叶浸润，表现为节段性肺炎，严重者呈广泛双侧肺炎。

45 肺外并发症: CP感染可以有肺外多个系统损害，儿童较成人少见。
心血管系统：损伤冠状动脉，引起冠心病和ACS等。 神经系统：导致成人脑梗死，引起脑炎、脑膜炎等。 反应性关节炎：偶尔出现，肺炎症状后3周发生。 结节病：与结节病，慢性肉芽肿等相关。 自身免疫性疾病：（ANCA相关）肾炎。 其他损害：腹主动脉瘤、甲状腺炎、结节性红斑等。 ACS：急性冠脉综合症

46 预 防 1) 避免长时间在人群拥挤的地方逗留，减少空气传播机会。
1)  避免长时间在人群拥挤的地方逗留，减少空气传播机会。 2)  避免接触高热、咳嗽、胸闷等呼吸道感染症状的患者，如发现家人有明显呼吸道症状请及早就医，并做好隔离措施。 3)  保持家庭居住及工作环境的清洁和通气。

47 --分离、培养或血清学检测阳性是诊断CP感染的标准。
实验室诊断 --分离、培养或血清学检测阳性是诊断CP感染的标准。 病原学检查 具体方法学的差异如前支原体检测所述，主要介绍血清学实验。 衣原体肺炎，岸本寿男，日本医学介绍2004年25卷7期。 病原学：分离培养困难 MIF实验无标准化 双份血清只能做回顾性分析，对治疗意义不大。 辅助性检查 血液检查 & 影像学检查

48 病原学检查 CP培养只能在细胞内生长繁殖，分离培养方法复杂，所需时间长，分离率低，不适宜临床快速诊断。
CP能在呼吸道来源的细胞系：HEp-2和HL细胞系中稳定生长，在细胞内形成包涵体。 标本置于室温会降低活性，需尽快培养。 标本类型：鼻咽或喉拭子、痰和胸腔积液标本分离CP。 鼻咽部拭子分离较理想。 细胞培养经单抗染色发现衣原体包涵体呈阳性反应（图中），衣原体Hep-2 细胞培养包涵体阳性对照见图右 24小时不能检测，需放置零下70度保存。 CP包涵体不包含糖原，不能被碘染色。 鉴定是用衣原体特异性的单克隆抗体染色，荧光显微镜观察，HEP-2细胞内包涵体（CP）被荧光染色

49 包括ELISA、MIF、IHA等检测方法，针对CP特异性抗体的检测。
血清学检查 包括ELISA、MIF、IHA等检测方法，针对CP特异性抗体的检测。 ELISA: 常用于对CP感染者的筛查。 MIF ：国际上标准且常用的方法，常用于实验研究。 IHA ：通过凝集试验，检测CP总抗体。 急性感染：双份血清IgG滴度4倍以上增高，单份血清IgM滴度 ≥1:16或IgG ≥1:512。 既往感染：单份血清 1:16 ≤IgG ＜1:512。 MIF：由于有一部分交叉反应（巴尔通体，百日咳杆菌，大肠埃希菌等），在阳性背景率在一些人群中比较高。 IGM3周出现，

50 分子生物学检查 最常用的引物是omp1、16SrRNA、16S和16S~23SrRNA、CP特异性克隆PstI片段等
测定扩增产物用琼脂糖凝胶电泳、PAGE电泳等。 对CP感染早期诊断有一定价值。 存在假阳性或假阴性问题。 对技术人员及设备要求较高。 标本类型：咽拭子、支气管肺泡灌洗液。

51 辅助检查 血象检查：CRP、血沉、IgG 、IgM 、血浆铜蓝蛋白等指标均出现异常，白细胞不升高。特异性不高。
影像学检查：X线检查，特异性不高，不能确诊。 CRP等升高，白细胞仅有少数升高且不明显。

52 产品介绍 美德声推广的CP-IgM抗体检测试剂盒用于定性检测人血清和血浆中肺炎衣原体特异的IgM抗体。有助于辅助诊断记性肺炎支原体感染。
---Ani Labsystems 美德声推广的CP-IgM抗体检测试剂盒用于定性检测人血清和血浆中肺炎衣原体特异的IgM抗体。有助于辅助诊断记性肺炎支原体感染。 Chlamydia pneumoniae EIAs (1999) ：全球首个CP EIA产品

53 肺炎衣原体试剂盒组成 CP-IgM EIA Kit 微孔板 阴性对照品（人血清） 临界值对照（人血清） 阳性对照品（人血清）
CP-IgG去除剂 HRP标记的二抗 洗涤液 TMB 终止液 微孔板贴膜

54 肺炎衣原体试剂盒检测原理 微孔板表面包被有一层CP 特异抗原 加入样本 37度孵育60分钟 需时150分钟 洗板后加入标记有HRP的二抗
准确、特异性强 37度孵育60分钟 加入底物显色液 室温孵育30分钟 加入终止液后测OD值

55 产品性能 1 批内重复性 样本 次数 S/Co CV% Sample 1 10 4.2 14.8 Sample 2 1.9 12.5
1.1 11.0 批间重复性 样本 次数 操作者 总数 S/Co CV% Sample 1 4 5 10 3.8 9.6 Sample 2 2.2 5.1 Sample 3 1.2 9.0 Sample 4 1.0 8.7

56 产品性能 2 MIF(%) 封闭型 EIA1（%） 竞争厂商 EIA2（%） EIA（%） 敏感性 （93/106）88
Ani Labsystems EIA（%） 敏感性 （93/106）88 （92/106） 87 （97/106） 92 （102/106） 特异性 99 95 阳性预测值 98 93 阴性预测值 91 90 97 要求试剂有很好的敏感性，EIA1误诊了14例，EIA2误诊了9例，我们产品只误诊了4例。 标本：1995年瑞典爆发肺炎衣原体流行期间采集的血清标本。

57 肺炎衣原体产品特点 即用型试剂，可拆卸板条； IgG去除剂，有效消除类风湿因子的干扰； 阴性对照、临界值对照、阳性对照均为人血清基质；
独特的标记便于板条的识别。 底物、洗液、终止液可以通用。 与ANI Labsystems MP、BP等可同步操作。 2~8℃储存，有效期12个月。

58 竞争产品

59 ELISA法 未注册 在血清学检测方法中应用最为广泛，方便、快捷。 特异性检测血清中CP特异性抗体。 试剂品牌： 生 产 商 检测指标
生 产 商 检测指标 Ani Labsystems CP-IgM / IgG / IgA EUROIMMUN CP-IgM /IgG/ IgA Savyon / Sero DRG CP-IgM

60 EUROIMMUN 定性检测CP-IgM抗体。 包被抗原 HL cell培养溶解产物 血清稀释液 包含抗人 IgG 抗体 对照品
NC、PC、标准品（RU/mL） 样本稀释 1：101 结果判断 阴性：S/标准品＜ 阳性：S/标准品＞1.1 反应时间 = 75 min（室温） 比值报半定量结果，单位为欧蒙自己的单位 CP-IgG有注册证，三点定标。

61 阴性：S/(NC ×2) ＜1.4 阳性：S/(NC ×2) ＞1.5
Savyon / Sero ---北京荣志海达生物科技有限公司代理 定性检测CP-IgM抗体。 包被抗原 纯化的CP基础结构体 （TMAR-183）抗原 血清稀释液 包含抗人 IgG 抗体 酶结合物 300× 对照品 NC、PC 样本稀释 1：105 结果判断 阴性：S/(NC ×2) ＜ 阳性：S/(NC ×2) ＞1.5 反应时间 = 135 min 1：105稀释不方便，还需要两次稀释。（1：21，1：5）

62 阴性：S/Cut-off＜0.9 阳性：S/Cut-off＞1.1
DRG 定性检测CP-IgM抗体。 血清稀释液 包含抗人 IgG 抗体 对照品 NC、PC、Cut-off 样本稀释 1：101 结果判断 阴性：S/Cut-off＜ 阳性：S/Cut-off＞1.1 反应时间 = 105 min 美国DRG国际公司

63 小结 MP/CP引起的肺炎，通过X体征很难与其他区分， 普通抗生素治疗无效，久治不愈可扩展至肺外并 发症。
及早检测特异性MP-IgM、CP-IgM对临床衣原体、支原体肺炎早期感染的治疗有重要的指导意义。 肺炎IgM类抗体在感染后持续时间长，是感染的有效检测指标；IgG类抗体产生时间很晚，主要作为未治愈感染的指标。 大环内酯类治疗有效。

64 美德声产品总结 IgG去除剂，有效消除类风湿因子的干扰。 阴性对照、临界值对照、阳性对照均为人血清基质。 独特的标记便于板条的识别。
底物、洗液、终止液可以通用。 ANI Labsystems MP、CP、BP等可同步操作。 采用微孔板反应，可手工和自动化操作。 有效期长，2~8℃储存，有效期12个月。

65 目标客户群 检验科 儿科医院 传染病医院 独立实验室 体检中心等

66 各地收费标准 地区 MP CP 上海 江苏 浙江 北京 福建 山东 天津 重庆 广东 35 20（CT） 30 40 100 50（凝集法）
80 天津 60 重庆 45（支原体检查） 45（衣原体检查） 广东

67 Thanks a lot