Chemical diagnosis of liver and bile diseases

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1 Chemical diagnosis of liver and bile diseases
P 第九章　 肝胆疾病的生物化学诊断 Chemical diagnosis of liver and bile diseases 蚌埠医学院 生化与分子生物学教研室

2 教学目标 [教学时数] 6学时 [掌握] 生物转化的概念、类型及其临床意义；胆红素的种类及相互的区别、黄疸的分类及其实验室鉴别试验；胆汁酸的组成及其检测的临床意义；肝硬化、肝昏迷及肝癌的临床生物化学检测。 [熟悉] 胆红素代谢过程，胆汁酸的代谢与功能，肝细胞损伤时的代谢改变；乙醇性肝损伤、胆石症的生物化学机制；肝功能的生物化学检测项目选择及应用。 [了解] 肝硬化、肝昏迷及肝癌的生物化学机制。

3 第一节 肝脏的解剖结构特点及其生物化学功能
第二节 肝脏的生物转化作用 第三节 胆色素与胆汁酸代谢及其异常 第四节 肝病的生物化学代谢紊乱 第五节 肝胆疾病的肝功能实验室检查 第六节 肝功能检验项目选择原则与评价

4 某病人的肝功能检测化验单

5 Liver（肝脏，肝）： 人体的最大的实质性器官、最大的腺体； 成人肝重约1. 0~1
Liver（肝脏，肝）： 人体的最大的实质性器官、最大的腺体； 成人肝重约1.0~1.5kg； 几乎参与体内的一切物质代谢，其功能>1500种。 Gall bladder（胆囊）： 是肝的附属器官，起着贮存和浓缩胆汁的作用。胆汁是肝的分泌物又是排泄物。

6 教学目标 教学时数：2.5学时 [掌握内容] 结合胆红素与未结合胆红素的概念及区别，胆红素在肝内转变及胆素原的肠肝循环，黄疸的类型与实验室检查。初级胆汁酸及次级胆汁酸的概念，胆汁酸的临床应用。 [熟悉内容] 胆红素的代谢过程，胆汁酸的代谢过程。 [了解内容] Y蛋白与z蛋白的作用。

7 第一节 肝脏的解剖结构特点及其生物化学功能
肝脏生物化学代谢 肝细胞损伤时的代谢改变

8 一、肝脏的解剖结构特点 1. 双重的入肝、出肝系统：肝动脉、门静脉，肝静脉、胆道系统。 2. 较特殊的微细的结构：
1) 物质的转运基础---大量微绒毛。 2) 物质交换的基础---较高通透性，MW<4万(1万)。 3) 能量保证的基础---线粒体丰富。 4) 物质代谢的基础---亚细胞数量相对较多、发达。 3. 含众多酶系，且有些是肝独有或其他组织含量较少：如OCT(鸟氨酸氨甲酰基转移酶)。 肝脏的组织结构和化学组成决定了其所具有的各项功能。

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10 二、肝脏生物化学代谢 1. 代谢功能：接受和处理消化道吸收的各种物质；对营养物质进行代谢。 2. 生物转化作用：
3. 合成和分泌胆汁酸和胆红素： 4. 造血功能：肝脏在胚胎第8～12周。 5. 参与激素的灭活：激素降解的主要部位。 6. 其他：免疫、解毒、凝血等功能。

11 肝掌：是指有些肝炎病人手掌边缘常常会出现许多红色的斑点，或红白相间毫无规律的斑块，有时候不仅手掌有，而且脚底也有。如果对这种斑点或斑块加压，可以使压迫区的这些点和块消失，变得苍白。

12 三、肝细胞损伤时的代谢改变 （一）肝细胞损伤时蛋白质代谢的变化 1. 肝在蛋白质代谢中的作用
1）正常人每天合成10g左右蛋白质：肝本身的蛋白质，合成除Ig以外的血浆蛋白质。 2）合成多种酶：肝内酶，血浆功能酶等。 3）进行转氨基、脱氨基、转甲基、脱硫和脱羧等反应； 合成尿素（解除氨的毒性）， 合成重要的含氮化合物（嘌呤类、嘧啶类、胆碱、GSH等）。 4）调整血液中氨基酸的比例：为其它脏器运送搭配比例合适的氨基酸混合物，多余的则被降解（代谢芳香族氨基酸）。

13 2. 肝损伤时的蛋白质代谢变化 1）急性肝损害时：血浆蛋白质浓度变化不大（肝脏储备大，多数血浆蛋白的半寿期较长）。 2）慢性肝病时： ALB及A/G ↓、-G↑。 3）晚期肝病时：血浆尿素水平呈低值，血氨增高，支链氨基酸/芳香族氨基酸比值下降。 4）肝细胞损伤：胞质、线粒体内酶血血液中多种酶活性↑。 5）血浆游离氨基酸↑ ，甚至从尿中丢失。

14 （二）糖代谢变化 1. 肝在糖代谢中的作用 2. 肝损伤时的糖代谢变化
通过糖异生、肝糖原的合成与分解、糖酵解途径，维持血糖浓度恒定，保障全身各组织，尤其是大脑和红细胞的量供应。 2. 肝损伤时的糖代谢变化 1）相关酶活性改变特点：有部分↑，部分↓。 2）磷酸戊糖途径和糖酵解途径相对增强，血中丙酮酸 含量可显著上升。 3）严重肝病时糖有氧氧化及三羧酸循环运转失常。 4）血糖浓度难以维持正常水平。 5）糖耐糖曲线异常，可呈：低平型、高峰型、高坡型等异常曲线。

15 （三）脂代谢变化 1. 肝在脂代谢中的作用 2. 肝损伤时的脂代谢变化
在脂类的消化、吸收、合成、分解与运输均具有重要作用。生成酮体的重要器官。 2. 肝损伤时的脂代谢变化 1）脂类消化吸收不良； 2）肝内脂肪氧化分解降低或脂肪合成增多或磷脂合成障碍，不能有效合成脂蛋白输出，脂肪在肝细胞内沉积而形成脂肪肝； 3）慢性肝损伤：糖利用↓，脂肪分解↑ → 酮血症。 4）血浆胆固醇酯/胆固醇的比值下降； 5）血浆脂蛋白电泳谱异常，出现（LDL）积累。

16 脂肪肝：正常人的肝内脂类约占细胞重量的3% ~ 5%，其中TG占一半，如TG在肝内过量存积超过2.5%，或脂类总量超过10%，即称为~。
肝功能障碍导致脂肪肝形成的机制： 1）氧化脂肪酸的能力减弱，以及合成、释放脂蛋白的功能降低； 2）合成磷脂的原料不足（ATP，CDP-胆碱），肝中磷脂减少，脂蛋白合成不足； 3）糖代谢障碍：脂肪动员增加，肝吸收的TG增加。 4）高脂低糖或高糖高热量饮食，致肝内TG来源过多。

17 肝在维生素的吸收、储存和转化方面都起重要作用。
（四）肝在维生素代谢中的作用 肝在维生素的吸收、储存和转化方面都起重要作用。 脂溶性Vit（A、D、E、K）：胆汁酸的参与； 肝能储存多种Vit：A(95%), D, E, K, B12； 肝直接参与Vit的代谢转化： 无活性形式→活性形式 （B族的辅酶、D、胡萝卜素→ Vit A）

18 第二节 肝的生物转化功能 生物转化的概述 （一）概念 （二）生物转化的类型 致癌物质的生物转化 药物的生物转化

19 一、生物转化的概述 （一）概念 1、非营养物质 【定义】 既不能构成组织细胞的成分，又不能氧化供能的物质。
【定义】 既不能构成组织细胞的成分，又不能氧化供能的物质。 环境中摄入：药物、毒物、致癌物、食品添加 剂、环境污染物等； 体内代谢生成：激素、神经递质、氨、胆红素、 胺类化合物等。 【性质】 多是有机物，水溶性低，难于排出。 非营养物质≠代谢废物

20 2、生物转化/作用（biotransformation)
机体将一些内源性或外源性非营养物质进行化学转变：一方面增加其极性，使其易于随胆汁或尿液排出；另一方面改变其活性；这种物质在体内的转化过程，称为生物转化作用。 部位：肝、肾、肺、胃肠道、皮肤、神经及胎盘等组织。 亚细胞定位：微粒体、线粒体、胞液。

21 （二）生物转化的类型 氧化还原水解 第一相反应 生物转化反 第二相反应— 结合反应 应 的 类 型 某些物质经过第一相反应即可顺利排出体外。
某些物质即使经过第一相反应后，极性改变仍 不大，还必须与某些极性更强的物质结合, 即 进行第二相反应，才能最终排出。

22 生物转化作用涉及的几种氧化酶系

23 （mixed function oxidase）
1. 第一相反应 (1)氧化反应(oxidation reaction):最常见、最重要 1）加单氧酶系：依赖P450 又称混合功能氧化酶/羟化酶，能直接激活氧分子，其中一个氧原子加入底物分子中，另一氧原子被还原为水。 产物：羟化物或环氧化物 (水溶性↑)。 RH+O2+NADPH+H ROH+NADP++H2O 加单氧酶系 细胞色素P450：属Cytb族，因其与CO结合在450nm处有特异的吸收峰而得名。其为终末电子传递体，传递来自NADPH的电子，能使多种脂溶性物质（如药物、毒物、类固醇激素等）羟化或形成环氧化物或其它氧化物。 加单氧酶系组成：Cyt P450、NADPH+H+、 NADPH -细胞色素 P450还原酶。 （mixed function oxidase）

24 (P157)

25 alcohol dehydrogenase, ADH aldehyde dehydrogenase, ALDH
举例： 苯胺 对氨基苯酚 N H 2 O 2）醇脱氢酶与醛脱氢酶系（胞液） 醇脱氢酶 -2H 醛脱氢酶 +H2O, –2H CH3CH2OH CH3CHO CH3 COOH 乙醇 乙醛 乙酸 alcohol dehydrogenase, ADH aldehyde dehydrogenase, ALDH

26 (2) 还原反应(reduction reaction)：此类酶的活性一般不高。
硝基还原酶类 (nitroreductase) 偶氮还原酶类 (azoreductase) 二者均为黄素蛋白酶类，由NADPH供氢，还原产物为相应胺类。

27 (3) 水解反应(hydrolysis reaction)：体内分布广泛，种类繁多。 酯酶
催化水解反应的酶 酰胺酶 （胞液、微粒体） 糖苷酶 如普鲁卡因、阿司匹林在体内水解失活。 OCOCH3 COOH 乙酰水杨酸 (阿司匹林) OH CH3COOH 乙酸 + 水杨酸(失活) H2O

28 （conjugation reaction)
2. 第二相反应---结合反应 （conjugation reaction) 结合对象：凡含有羟基、羧基或氨基的药物、毒物 或激素均可发生结合反应。 结合剂：葡萄糖醛酸、硫酸、谷胱甘肽、甘氨酸、 乙酰基、甲基、水等物质或基团 。 场所：微粒体、胞液和线粒体内。 酶：转移酶（如：葡糖醛酸基转移酶，UDP- glucuronyl transferases，UGT）。 重要的结合基团的直接供体： UDPGA（尿苷二磷酸葡萄糖醛酸） PAPS（3’-磷酸腺苷-5’-磷酸硫酸）

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30 (1) 葡糖醛酸结合反应：（此类反应最普遍） 1）反应部位：肝微粒体 2）葡糖醛酸供体：UDPGA(尿苷二磷酸-葡糖醛酸)
(1) 葡糖醛酸结合反应：（此类反应最普遍） 1）反应部位：肝微粒体 2）葡糖醛酸供体：UDPGA(尿苷二磷酸-葡糖醛酸) 糖醛酸途径 UDPG脱氢酶 UDPG +H2O+2NAD UDPGA+2NADH+2H+ O OH OH H H OH UDP H CH2OH 尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG) O OH OH H H OH H COOH 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA) UDP

31 （4）结合方式：成苷反应，由葡糖醛酸基转移（ UDP-glucuronyl transferases， UGT）催化。
（3）结合物质：醇、酚、胺、羧基化合物。 (肝微粒体) UDPGA转移酶 苯-葡萄糖醛酸苷 OH + UDPGA 苯酚 O OH OH H H OH H COOH + UDP （4）结合方式：成苷反应，由葡糖醛酸基转移（ UDP-glucuronyl transferases， UGT）催化。

32 (肝微粒体) UDPGA转移酶 苯-葡萄糖醛酸苷 OH + UDPGA 苯酚 O OH OH H H OH H COOH + UDP

33 2、硫酸结合反应： 例：雌激素的灭活 （1）反应部位：肝（胞液） （2）硫酸供体：PAPS （3磷酸腺苷-5磷酸硫酸)
（3）结合物质：醇、酚、芳香族胺类 （4）结合方式：生成硫酸酯化合物 例：雌激素的灭活 雌酮 + PAPS 雌酮硫酸酯 + PAP 硫酸转移酶

34 雌酮 + PAPS 雌酮硫酸酯 + PAP 雌酮硫酸酯 雌酮 硫酸转移酶 HO3SO 3磷酸腺苷-5磷酸硫酸（PAPS） O O HO
H 2PO3 NH2 N HN 3 HO3S—O—P—CH2 3磷酸腺苷-5磷酸硫酸（PAPS）

35 二、致癌物质的生物转化 代谢转变： 许多致癌物在体内需经过转化而转变为活化型的致癌物（含亲电子基团），再以DNA、RNA和蛋白质（含亲核基团）为靶分子，使基因产生突变、基因表达紊乱，表型异常，细胞形态及生物活性改变，导致细胞癌变。 注意：致癌物的代谢活化与灭活是转化的两个方面，主要在肝细胞微粒体内。

36 多环芳香烃的生物转化反应

37 三、药物的生物转化 1. 部位：主要在肝脏；微粒体、细胞浆、线粒体。 肝脏易受其损伤，另外肝损伤也导致药物代谢改变。
2. 转化结果：药理活性消失、药理活性不变、代谢活化或毒性化。 生物转化具有活化与失活的双重性。 生物转化≠解毒作用

38 生物转化的特点 代谢过程的连续性 代谢通路和产物的多样性 活化与失活的双重性

39 生物转化反应的连续性和类型多样性 OCOCH3 OH COOH HO 乙酰水杨酸 水杨酸 羟基水杨酸 水杨酰甘氨酸 葡糖醛酸苷等结合产物
酯酶 羟化 COOH OH OCOCH3 乙酰水杨酸 水杨酸 羟基水杨酸 水解 葡糖醛酸 甘氨酸 水杨酰甘氨酸 葡糖醛酸 葡糖醛酸苷等结合产物 葡糖醛酸苷结合产物 HO 生物转化反应的连续性和类型多样性

40 生物转化反应过程解毒和致毒的两重性

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42 教学目标 第三节 胆红素与胆汁酸代谢及异常 教学时数：2.5学时
[掌握内容] 结合胆红素与未结合胆红素的概念及区别，胆红素在肝内转变及胆素原的肠肝循环，黄疸的类型与实验室检查。初级胆汁酸及次级胆汁酸的概念，胆汁酸的临床应用。 [熟悉内容] 胆红素的代谢过程，胆汁酸的代谢过程及功能。 [了解内容] Y蛋白与z蛋白的作用。

43 一、胆红素代谢及异常 （一）胆红素的正常代谢 （二）胆红素代谢紊乱与黄疸 （三）黄疸的成因与发生机制 （四）黄疸的实验室检查

44 （一）胆红素的正常代谢 胆汁（Bile）： 由肝细胞分泌，金黄透明，稍偏碱性，通过胆道系统流入胆囊，循总胆管而至十二指肠。
分类： 肝胆汁（ ml/d），胆囊胆汁（浓缩5~10倍）。 主要成分：胆汁酸式盐（干重的50%以上）、胆色素、CHO，PL、粘蛋白、血浆蛋白、脂肪、尿素、无机盐等。 功能：1）作为消化液，促进脂类的消化吸收。2）作为排泄液，排泄各种代谢产物至肠道。（均和它的主要成分胆汁酸的代谢密切相关。）

45 胆色素：（bile pigment） 胆色素是体内铁卟啉化合物的主要分解代谢产物，包括胆红素、胆绿素、胆素原和胆素；胆色素主要随胆汁排出体外。 胆色素代谢主要是胆红素代谢，胆红素对大脑有毒性作用。（？？） 肝脏是胆红素代谢的主要器官。

46 1. 胆红素的来源及生成 胆红素的来源 主流胆红素(80%) 1）衰老的RBC破坏、降解 2）无效红细胞生成 分流胆红素(20%)
1. 胆红素的来源及生成 主流胆红素(80%) 1）衰老的RBC破坏、降解 胆红素的来源 2）无效红细胞生成 分流胆红素(20%) 3）非血红蛋白的血红素蛋白质（细胞色素、过氧化物酶、肌红蛋白等）分解 含血红素的蛋白质(主要为Hb)

47 珠蛋白 氨基酸 网状内皮系统 衰老的RBC Hb 血红素 O2、NADPH 血红素加氧酶 CO和Fe3+ 胆绿素 胆绿素还原酶 胆红素
微粒体 胞液 肝、脾及骨髓 活性很高 胆红素的生成过程

48 胆红素的生成

49 M V 胆红素(酮式) M V 胆红素(醇式) (P379) O CH N H M：-CH2 图17-4 胆红素的生成 V：-CH=CH2
HOOC N H CH O M V COOH 胆红素(酮式) (P379) M：-CH2 V：-CH=CH2 图17-4 胆红素的生成 CH2 HOOC N CH HO H OH M V COOH 胆红素(醇式)

50 胆色素代谢示意图 肝 胆红素-Y蛋白 胆红素-Z蛋白 Y蛋白 Z蛋白 清蛋白等 胆红素 胆道 门V 受体蛋白 血红蛋白 血红素 胆绿素
10%~20% 受体蛋白 血红蛋白 血红素 胆绿素 胆红素 珠蛋白 COFe O2 NADPH+H+ 单核-巨噬细胞 微粒体 胞液 血液 胆红素-清蛋白 复合物等 UDPGA 内质网 UDP 葡糖醛酸胆红素 胆素原 胆素原 (尿)胆素 肾 肠道 葡糖醛酸胆红素 葡萄糖醛酸 胆红素 胆素原 (粪便)胆素 O2 胆色素代谢示意图

51 据估计，1g Hb可产生35mg胆红素，成人每天生成约250-350mg胆红素。
胆红素的性质：胆红素为橙红色，脂溶性强，极性弱，极易自由透过生物膜，毒性较高（如：大脑毒性作用）。 脂溶性强的物质如何在机体内运输？？

52 2. 胆红素在血液中的运输：亲脂疏水的性质 （1）运输形式： 与ALB可逆的结合：主要形式； 与α1-球蛋白可逆的结合：少部分。 1分子ALB最多可结合2分子胆红素；正常情况下，ALB结合胆红素的潜力很大，20~25mg/dl 血浆ALB。 注意：有机阴离子（如磺胺药，水杨酸，胆汁酸等）可与胆红素竞争结合ALB。

53 (2) 与血浆蛋白结合的意义： 有利于运输：改变了胆红素的脂溶性，使其 水溶性增加，溶解度增加。 减少其毒性作用：限制其自由通过生物膜。 其不能出现于尿中。（？？） (3)δ-胆红素：在异常情况下（如在肝细胞损伤及胆汁郁滞等高胆红素性黄疸），血浆中有一部分胆红素与ALB共价（不可逆）结合，经HPLC分型，称为δ-胆红素。 HPLC： Bα、 B β、Bγ、 Bδ

54 【δ-胆红素】 可能是ALB分子中赖氨酸残基的ε-氨基与胆红素一个丙酸基的羧基形成酰胺键（不可逆结合），其在血中停滞时间长。
【检测方法】 与重氮试剂呈直接反应，可用离子交换柱层析法或高效液相色谱法检测。 【检测意义】 判断严重肝病预后的指征：恢复好的：δ-胆红素/总胆比例占40％～90％（比例越高，预后越好） （严重肝病时：δ-胆红素常小于总胆的35％）。 ① 急性黄疸型肝炎恢复期观察的可靠指征：恢复期总胆红素↓，主要是结合胆红素↓↓，但δ-胆红素占总胆80％～90％以上。 ② 判断严重肝病预后的指征：（δ-胆红素常小于总胆的35％），恢复期占：40％～90％（比例越高，预后越好）。

55 3. 胆红素在肝细胞内的转变 （1）摄取与运输 肝脏在胆红素代谢过程中起着重要的作用，包括肝细胞对胆红素的摄取、结合、转化和排泄等过程。
肝细胞膜上特异的载体蛋白 摄取的有效性取决于 肝细胞内的两种受体蛋白 ---Y蛋白和Z蛋白 以“胆红素－Y蛋白”(或胆红素－Z蛋白)形式送至内质网。 耗能、可逆的过程。 肝内运输

56 Y蛋白 是一种碱性蛋白，约占肝细胞浆蛋白总量的5%，在肾脏及小肠也有少量Y蛋白存在。 与胆红素的亲合力高，是其主要结合蛋白。 此外，Y蛋白也能与固醇类物质、BSP、ICG、甲状腺素及某些有机阴离子结合，因此Y蛋白又称为配体结合蛋白（Ligadin）。 新生儿在出生7周后，Y蛋白水平才与成人相当，故易产生生理性的新生儿非溶血性黄疸。 用苯巴比妥可诱导其生成。

57 Z蛋白 是一种酸性蛋白质，与胆红素的亲合力小于Y蛋白。 当胆红素浓度较低时，胆红素优先与Y蛋白结合。 Z蛋白与长链脂肪酸的亲合力极大，在肝脏、小肠粘膜、心肌及其它摄取和利用脂肪酸较多的组织细胞中含量较高，其可能为脂肪酸载体蛋白。

58 (２) 转化： 水溶性↑，毒性↓。 部位：滑面内网质 反应：结合反应（UDPGA、PAPS） 酶：葡萄糖醛酸基转移酶、硫酸转移酶． 产物：双葡萄糖醛酸胆红素，单葡萄糖醛酸胆红素、硫酸胆红素等结合胆红素。 目的：既有利于胆红素随胆汁排泄，又限制其通过生物膜而起到解毒作用。

59 （占胆汁10～20%） （80 ～ 90%） M：-CH3 V：-CH=CH2 两个丙羧基均可与GA的C1的羟基结合

60 结合胆红素与未结合胆红素的定义 Unconjugated bilirubin：未经肝细胞转化处理的胆红素，包括：游离胆红素、血中与蛋白质结合的胆红素、δ-胆红素；具亲脂疏水的性质。 Conjugated bilirubin：在肝细胞内经过生物转化与葡萄糖醛酸、硫酸结合而形成的胆红素；具亲水疏脂的性质。

61 CH2 C10 与重氮试剂反应的C10位 C10 胆红素卷曲状空间结构示意图 胆红素葡糖醛酸二酯的结构

62 结合胆红素与未结合胆红素的区别 未结合胆红素 结合胆红素 别名 间接胆红素 直接胆红素 结合 与葡萄糖醛酸结合 未结合 与重氮试剂反应
慢或间接反应 迅速、直接反应 小 大 溶解度 不能 能 经肾随尿排出 无 细胞毒作用 大

63 结合胆红素几乎全部排入毛细胆管（需载体参与），成为胆汁的一种特征组分。
(3) 排泄 结合胆红素几乎全部排入毛细胆管（需载体参与），成为胆汁的一种特征组分。 此过程为一耗能的逆浓度梯度过程，成为胆红素代谢的限速步骤。 胆汁中的胆红素绝大多数为结合胆红素，而血液中的胆红素绝大多数为未结合胆红素。 ？？？

64 4、胆红素在肠管中的变化 及其肠肝循环 (1) 胆红素在肠道中的变化 β-葡萄糖醛酸苷酶 结合胆红素 游离胆红素 葡萄糖醛酸 还原 氧化
胆素 胆素原 胆素原：中胆素原，粪胆素原，d -尿胆素原 胆 素： i -尿胆素，粪胆素， d -尿胆素

65 胆素原：为无色化合物，指中胆素原、粪胆原及少量d-尿胆原，三者与重氮试剂的呈色反应相同。

66 胆素原的肠肝循环： （bilinogen enterohepatic circulation）
肠道中有少量的（10%~20%）胆素原可被肠粘膜细胞重吸收，经门静脉入肝，其中大部分再随胆汁排入肠道，形成胆素原的肠肝循环。

67 胆色素代谢示意图 血红蛋白 血红素 胆绿素 胆红素 珠蛋白 COFe 单核-吞噬细胞 血液 胆红素-清蛋白 复合物 胆红素-Y蛋白
NADPH+H+ 单核-吞噬细胞 微粒体 胞液 血液 胆红素-清蛋白 复合物 胆红素-Y蛋白 胆红素-Z蛋白 Y蛋白 Z蛋白 清蛋白 胆红素 肝 胆道 门V 10%~20% 受体蛋白 UDPGA 内质网 UDP 葡糖醛酸胆红素 胆素原 胆素原 (尿)胆素 肾 肠道 葡糖醛酸胆红素 葡糖醛酸 胆红素 胆素原 (粪便)胆素 O2 主要色素 胆色素代谢示意图

68 （二）胆红素代谢紊乱与黄疸（jaundice)
1. 黄疸定义与分类 血清胆红素的正常参考值： 总胆红素1.7～17.1  mol/L（0.1~1.0mg/dl） 直胆 0～6  mol/L 黄疸：指高胆红素血症引起的皮肤、巩膜和粘膜等组织黄染的现象。 隐性黄疸：<34.2  mol/L，外观看不出。 显性黄疸：≥34.2  mol/L，有黄染的现象。

69 2. 黄疸的类型 肉眼可否见到黄染现象分为： ------显性黄疸和隐性黄疸。 发病原因可分为： ------溶血性、肝细胞性和梗阻性黄疸。 病变部位可分为： ------肝前性、肝性和肝后性黄疸。 血中升高的胆红素的类型分为： ------高未结合胆红素性黄疸及高结合胆 红素性黄疸。

70 （三）黄疸的成因与发生机制 胆红素形成过多：溶血性~，非溶血性~；血中以未结合胆红素的升高为主。
肝细胞处理胆红素的能力下降：肝细胞受损，某一项或多项环节能力下降，两种胆红素均可升高。 胆红素在肝外的排泄障碍，逆流入血：血中以结合胆红素的升高为主。

71 黄疸 溶血性黄疸 ：由于RBC大量破坏→ 胆红素生成 →未结合胆红素> 肝脏转化能力，血清未结合胆红素。
肝细胞性黄疸：由于肝细胞受损，一方面未结合胆红素转变成结合胆红素↓→血清未结合胆红素；另一方面由于病区压迫毛细胆管，已生成的结合胆红素可经坏死区返流入血→引起结合胆红素。 阻塞性黄疸：由于胆道阻塞，肝内已形成的结合胆红素不能从胆管排出而返流入血→引起血清结合胆红素。 黄疸

72 新生儿生理性黄疸的成因 （icterus neonatorum）
生下后，血液内原来过多的红细胞被破坏，未结合胆红素生成过多。 肝细胞内载体蛋白—Y蛋白少，肝细胞摄取未结合胆红素的能力不足。 肝细胞内胆红素葡萄糖醛酸基转移酶生成不足，结合胆红素生成少。 肝细胞胆汁分泌器发育不完善，对肝胆汁分泌的潜力不大。 母乳中含有孕二醇，对葡萄糖醛酸基转移酶有抑制作用。 临床上用蓝光照射可治疗此病，波长 nm的蓝光可使未结合胆红素产生异构体--光照胆红素，后者极性增强，可排出体外。

73 （四）黄疸的实验室鉴别诊断 胆红素代谢实验 （见表） 血清酶学检查 血脂分析 血液学检查 （见表）

74 梗阻性指标：ALP、LAP、 GGT、CHO、TBA↑↑
三种类型黄疸的实验室鉴别诊断 　类 型 血 液 尿 液 未结合胆红素 结合胆红素 胆红素 胆素原 　正 常 有 无或极微 阴性 阳性 棕黄色 溶血性黄疸 高度增加 正常或微增 阴性 显著增加 加深 肝细胞性黄疸 增加 增加 阳性 不定 不定 梗阻性黄疸 不变或微增 高度增加 强阳性 减少或消失 变浅或 陶土色 粪便颜色 梗阻性与肝细胞性高结合胆红素黄疸的鉴别 梗阻性指标：ALP、LAP、 GGT、CHO、TBA↑↑ 肝细胞损伤指标：ALT,AST,LDH↑；TP,ALB↓， ALP、LAP、 GGT、TBA↑， CHO ↓ 、 CA/CDCA ﹤1

75 肝细胞性黄疸和梗阻性黄疸实验室鉴别诊断 项 目 肝细胞性黄疸 梗阻性黄疸 血清蛋白电泳图谱 Alb减少，γ—球蛋白↑ 球蛋白明显↑
项 目 肝细胞性黄疸 梗阻性黄疸 血清蛋白电泳图谱 Alb减少，γ—球蛋白↑ 球蛋白明显↑ 脂蛋白—X 多为阴性 明显↑ 血清酶学 ALT 肝炎急性期↑ 正常或增高 ALP 正常或轻度增高 明显升高 LAP 可增高 明显升高 γ-GT 可增高 明显升高 其他方面 凝血酶原时间 延长,VitK不能纠正 延长,VitK可以纠正 胆固醇 降低，尤其CHE明显降低 增高 CA/CDCA ﹤ ﹥1

76 小 结 掌握：结合胆红素、未结合胆红素、δ-胆红素、黄疸的概念；肝对胆红素的处理过程，从胆红素代谢方面论述三型黄疸的鉴别诊断。
小 结 掌握：结合胆红素、未结合胆红素、δ-胆红素、黄疸的概念；肝对胆红素的处理过程，从胆红素代谢方面论述三型黄疸的鉴别诊断。 熟悉：胆红素的代谢过程。

77 二、胆汁酸代谢及其异常 （一）胆汁酸的类型 （二）胆汁酸的代谢 （三）胆汁酸代谢异常与疾病的关系 （四） 血清胆汁酸测定的临床意义

78 教学目标 [教学时数] 1学时 [掌握] 初、次级胆汁酸的概念；胆汁酸检测的临床意义。 [熟悉] 胆汁酸的代谢过程及功能。

79 胆固醇的结构式

80 （一）胆汁酸的类型 1. 胆汁酸的定义 胆汁酸是胆汁中存在的一大类24碳胆烷酸（cholanic acid）的总称； 是由胆固醇转化而成的，是胆固醇在体内代谢的主要去路。 正常人每天约合成1~1.5g胆固醇，其中约2/5在肝转变为胆汁酸，随胆汁排入肠道。

81 2. 胆汁酸的分类：按来源、结构及结合与否 初级游离型(胆酸、鹅脱氧胆酸) 初级胆汁酸（肝脏） 初级结合型 胆汁酸
2. 胆汁酸的分类：按来源、结构及结合与否 牛磺(甘氨)胆酸 甘氨(牛磺)鹅脱氧胆酸 次级游离型(脱氧胆酸、石胆酸) 次级胆汁酸 （肠道） 次级结合型 甘氨(牛磺)脱氧胆酸甘氨(牛磺)石胆酸 初级游离型(胆酸、鹅脱氧胆酸) 初级胆汁酸（肝脏） 初级结合型 胆汁酸 初级胆汁酸脱去7--OH即为次级胆汁酸。人胆汁中的胆汁酸以结合型为主。

82 （二）胆汁酸的代谢 1、初级胆汁酸的生成 （1）primary bile acid：在肝细胞内，以胆固醇为原料直接合成的胆汁酸称为初级胆汁酸，包括胆酸和鹅脱氧胆酸以及相应的结合型胆汁酸。 胆汁酸是肝清除胆固醇的主要方式，正常人合成胆固醇约1~1.5g/日，其中2/5（0.4~0.6g）在肝内转化为胆汁酸。

83 - + （2）合成原料：胆固醇 （3）合成部位：肝（微粒体和胞液） （4）限速酶：胆固醇7-羟化酶
（5）合成过程：相当复杂，以羟化作用最为重要。 胆酸（最多） 12- -羟化酶 (24C) 7- -羟化酶 胆固醇 -羟胆固醇 丙酰CoA (27C) NADPH+H++O2 鹅脱氧胆酸 7- -羟化酶 胆汁酸 胆固醇 糖皮质激素 生长素 甲状腺素 + - (24C)

84 （Chenodeoxycholic Acid，CDCA）
胆酸 （Cholic Acid，CA） （3α，7α，12α-三羟胆固烷酸） 鹅脱氧胆酸 （Chenodeoxycholic Acid，CDCA） （3α，12α-二羟胆固烷酸） 初级胆汁酸

85 2、次级胆汁酸的生成 （1）secondary bile acid：在肠道细菌作用下，以初级胆汁酸为原料，进行7α-脱羟基后生成的胆汁酸，包括脱氧胆酸和石胆酸以及相应的结合产物。 （2）生成部位：肠道（小肠下段和大肠）。 （3）生成过程: 结合型初级胆汁酸 游离胆汁酸 次级胆汁酸 水解 7-脱羟酶 牛磺胆酸 甘氨鹅脱氧胆酸 脱氧胆酸 石胆酸 牛磺酸 甘氨酸 胆酸 鹅脱氧胆酸 肠道

86 （Deoxycholic Acid，DCA）
胆酸 初级胆汁酸 （Cholic Acid，CA） （3α，7α，12α-三羟胆固烷酸） 脱氧胆酸 （Deoxycholic Acid，DCA） （3α，12α-二羟胆固烷酸） 7α-脱羟基酶 次级胆汁酸

87 （Chenodeoxycholic Acid，CDCA） （Lithocholic Acid，LCA）
鹅脱氧胆酸 初级胆汁酸 （Chenodeoxycholic Acid，CDCA） （3α，12α-二羟胆固烷酸） 石胆酸 7α-脱羟基酶 次级胆汁酸 （Lithocholic Acid，LCA） （3α-羟胆烷酸）

88 牛磺胆酸 甘氨胆酸 结合胆汁酸 CONHCH2CH2SO3H CONHCH2COOH 胆汁中甘氨酰胆汁酸:牛磺酰胆汁酸=3:1
胆汁酸主要以结合型形式从肝分泌入胆汁。

89 （Enterohepatic circulation of bile acid ）
3. 胆汁酸的肠肝循环 （Enterohepatic circulation of bile acid ） （1）定义：胆汁酸随胆汁排入肠腔后，通过重吸收经门静脉又回到肝，在肝内转变为结合型胆汁酸，经胆道再次排入肠腔的过程。 仅小部分随粪便排出，主要是溶解度低的石胆酸。每次餐后，胆汁酸要经2~4次肠肝循环。 （2）意义：使有限的胆汁酸能最大限度的反复利用，促进脂类物质消化吸收。 3~5g（16~32g），需6~12次循环。 降胆固醇药物或食物：如消胆胺，纤维素多的食物。

90 90% 游离型 结合型 胆汁酸的代谢与肠肝循环

91 4. 胆汁酸的功能 1、促进脂类的消化吸收： 胆汁酸分子含亲水及疏水基团，是很强的乳化剂，能使脂类形成混合微团，保证脂类的消化吸收。
2、抑制胆汁中胆固醇的析出： 胆固醇过多或胆汁酸、卵磷脂含量减少，胆固醇都可析出结晶，形成结石。 ( 胆汁酸+卵磷脂）/胆固醇比例≥10:1 若此比例＜10:1（CHO↑，BA↓，PL↓）则可使胆汁中的胆固醇达到过饱和，析出而形成结石。

92 疏水侧 亲水侧 甘氨胆酸的立体构型

93 (三) 胆汁酸代谢异常 1 . BA合成缺陷：酶异常。 2. 肝胆疾病： 肝在胆汁酸的代谢中占重要地位。
2. 肝胆疾病： 肝在胆汁酸的代谢中占重要地位。 当肝细胞损伤或胆道阻塞时都会引起BA的代谢障碍。 肝胆疾病时，首先表现的是病人的血清BA浓度的增高。 2. 肠道疾病： 回肠切除术后，肠肝循环破坏，BA丢失过多，脂肪消化吸收不良（脂肪泻），胆固醇结石。

94 4. 高脂蛋白血症 BA代谢与高脂蛋白血症有密切关系，后者的代谢紊乱必然涉及BA的代谢异常。 BA是体内清除胆固醇的主要去路，BA的生物合成可通过自身反馈调节。 胆汁酸合成、分泌的质及量都对胆固醇的排泄有影响。 BA通过调节胆固醇的吸收间接调控肠壁细胞和肝细胞内的胆固醇的合成。

95 （四）血清胆汁酸测定的临床意义 1. 测定方法 血清TBA（总胆汁酸）浓度很低（<10  mol/L），需用高灵敏度的方法进行测定。
1. 测定方法 血清TBA（总胆汁酸）浓度很低（<10  mol/L），需用高灵敏度的方法进行测定。 气相色谱法、RIA、HPLC：可测TBA，也可测CA、CDCA、DCA。 酶学分析法：使用工具酶3 α -羟类固醇脱氢酶（3α -HSD），测定NADH的生成量。 还可进行BA负荷试验（ UDCA，肝对BA的处理能力）及尿中硫酸结合型胆汁酸（机体的防御机制之一，以每g Cr含量报告）的测定。 ①气-液色谱(GLU):火焰离子化、电子捕获、碎片质谱法、质量色谱法。 ②放射免疫(RIA) ③高效液相层析法(HPLC):折射计、电化学、紫外 ④酶联免疫(EIA):分光光度、荧光法 ⑤酶法：分光光度、荧光法、生物发光 （测血清总胆汁酸 TBA）

96 几种胆汁酸的结构式

97 参考范围：血清TBA <10  mol/L （2ug/mL），
2. 测定意义 参考范围：血清TBA <10  mol/L （2ug/mL）， CA 值：< 4.6  mol/L， CDCA 0.46~5.9  mol/L， CA/CDCA：0.34~1.22 肝细胞受损时，肝不能充分摄取BA，导致外周血中TBA；餐后2小时比空腹更能反映肝细胞轻微损伤。 TBA是最灵敏的肝功能指标，但特异性差。 胆道阻塞时： CA/CDCA>1。 肝实质细胞损伤：CA/CDCA<1。 鉴别指标，注意：CA及CDCA ↑

98 小 结 掌握：初、次级胆汁酸的概念；胆汁酸检测的临床意义。 熟悉：胆汁酸的代谢过程及功能。

99 第五节 肝脏疾病的临床生物化学 肝硬化的临床生物化学 乙醇性肝脏损害的生物化学 肝昏迷的临床生物化学 胆石症的临床生物化学
肝癌的临床生物化学

100 教学目标 [教学时数] 1学时 [掌握] 肝硬化、肝昏迷及肝癌的临床生物化学检测。 [熟悉] 乙醇性肝损伤、胆石症的生物化学机制。
[教学时数] 1学时 [掌握] 肝硬化、肝昏迷及肝癌的临床生物化学检测。 [熟悉] 乙醇性肝损伤、胆石症的生物化学机制。 [了解] 肝硬化、乙醇性肝损伤、肝昏迷及肝癌的生物化学机制。

101 一、肝硬化的临床生物化学 （一）概念 肝硬化：其不是一种独立的疾病，而是多种损伤因素长期或反复作用于肝的综合表现。病理改变为：肝细胞弥漫性变性、坏死和再生，肝结缔组织弥漫性增生，造成肝小叶结构破坏或形成假小叶，变形、变硬；后期多个器官受损，以肝功能损害及门脉高压为特征；进一步可发展为肝癌。 病因：病毒性肝炎、慢性酒精性肝炎、中毒性肝损伤及自身免疫性疾病。

102 （二）肝纤维化形成机制 肝纤维化是肝硬化前期的必经阶段。 缺氧和炎症刺激：胶原纤维（I、III型）的合成增加；
机体免疫机能不足，肝细胞反复遭受HBV破坏，以及肝细胞结节状再生，纤维组织不断增生，导致肝硬化； 跟Kuffer细胞及储脂细胞分泌多种细胞因子及胶原酶等生物活性物质以及储脂细胞产生胶原等有关。 还涉及许多遗传因素（独立的病因）。肝细胞和胆管上皮细胞内角蛋白的表达异常等都与肝纤维化有关。

103 （三）肝硬化的生物化学诊断 目前，肝硬化的确诊及疗效观察仍依靠肝穿刺作活体组织检查。
1. 肝功能实验：ALT、AST、TP、A/G等↓ ，CE ↑； 2. 其它生物化学检查：单胺氧化酶（ MAO ）、 β-脯氨酸羟化酶（β-PH）、 血清透明质酸酶（HA）、 血清III型及IV型前胶原肽（PIIIP）、 板层素（LN）、 纤维连结素（FN） ↑ ； 凝血因子测定↓。 肝纤维化是肝硬化前期的必经阶段，肝硬化的早期诊断非常困难：目前常规的肝功能实验无法诊断肝纤维化或早期肝硬化，有时即使进行肝穿刺作活体组织检查亦难于找到纤维间隔。近年发展起来的几项生化检查项目能为肝硬化的早期诊断提供重要信息。 单胺氧化酶（ MAO ）、提示肝胶原纤维增生活跃。 β-脯氨酸羟化酶（β-PH）：其含量及活性明显升高。 血清透明质酸酶（HA）：进入肝清除的HA下降，使血中HA明显升高。 血清III型前胶原肽（PIIIP）：敏感性为95%，特异性为93%。 III型前胶原（PCIII）： 注意：肝纤维化指标的检测，可发现肝纤维组织增生的趋势，升高不一定是肝硬化，肝硬化静止期也不一定不升高。

104 二、乙醇在肝内的代谢及乙醇性肝损伤 （一）乙醇在体内的代谢 1. 概述：乙醇对人体来说是一种异物。 来源：主要为饮酒
1. 概述：乙醇对人体来说是一种异物。 来源：主要为饮酒 吸收部位：胃30％，小肠70％。 代谢器官：肝代谢90％～98%，尿液及呼吸排出2％～10％（酒味）。 成人代谢量：10g/h，240g/d， 7Kcal/g 。 乙醇与疾病：肝硬化、脂肪肝、肝炎、胎儿性乙醇综合征。

105 2. 代谢机制 75-80% 肝线粒体 乙醇脱氢酶：Alcohol dehydrogenase， ADH
微粒体乙醇氧化体系，Microsomal ethanol oxidizing system ，MESO

106 （二）乙醇代谢对机体的影响 1、乙醛对机体的影响：乙醛为乙醇在肝内代谢的中间产物，其化学性质活泼，具有强烈的药理作用。
肝损伤：乙醛的毒性可引起线粒体的功能障碍，在慢性饮酒者可形成一种恶性循环，最终导致肝损伤。 其它影响：乙醇性心肌病（内源性儿茶酚胺释放）、酒瘾（类吗啡喊类物质）、幻觉作用等种种精神障碍（ 5－羟色胺代谢发生障碍）、戒断综合症、Vit B6缺乏、 Na+ 、K+-ATP酶。

107 NADH生成↑→NADH/NAD＋比值↑→乳酸利用↓； NADH使丙酮酸还原为乳酸↑→酸中毒； 高尿酸血症：酸中毒→肾对尿酸的排泄↓；
能量供应受影响：糖、脂肪酸的有氧氧化、三羧酸循环等过程发生障碍。 2001年

108 3、乙醇对血糖、氨基酸、水盐、VitD代谢及药物代谢的影响：
饮酒后有血糖降低的倾向：进食不足、糖异生障碍、糖原储备、糖利用障碍。 有负氮平衡倾向：蛋白质代谢障碍，GGT、GLDH（谷氨酸脱氢酶）↑。 水电解质紊乱：利尿作用增强，伴脱水症状（ADH分泌受抑制），有酸中毒倾向。（应大量饮水） 维生素D↓：VitD摄取不足、肠道吸收↓。 药物：药物代谢增强如：Vit、睾酮分解↑ ；药物分解代谢抑制，引起药物中毒。如应用镇静剂、安眠药时必须注意患者有否饮酒嗜好。

109 （三）乙醇性肝损伤与胎儿乙醇综合征 1、乙醇性脂肪肝 原因：大量摄取乙醇 发生率：长期饮酒者的70％～80％
是良性的可逆性的病态，它可因戒酒而消退。 形成机制：脂肪动员增强，NADH/NAD＋比值↑，肝内的脂肪酸氧化↓，脂蛋白的合成与分泌减少等。

110 2、乙醇性肝炎 病理表现以肝细胞坏死为主，透明小体的形成。 形成机制如下： 肝内蛋白质分泌障碍及贮留、肝内脂肪增加； 线粒体及内质网的损伤：主要是由于乙醇及乙醛的作用； 乙醇在微粒体氧化时，使氧自由基增加，GSH ↓、过氧化脂质↑； 代谢亢进→使耗氧量↑； 出现IgA↑，WBC粘附力↓等免疫功能异常。

111 3、胎儿性乙醇综合征 （fetal alcohol syndrome，FAS）
定义：是指由于孕妇饮酒过量而导致胎儿发育异常，胎儿体重、大脑重量均较低。 典型表现：①包括智能障碍的中枢神经系统的功能障碍，②出生前开始的发育障碍，③特有容貌，④大小畸形频度增加。 发病机制：尚未完全阐明，可能与脑内总RNA及tRNA减少，脑内蛋白质合成受抑制有关。

112 三、肝昏迷的生化机制 1. 肝昏迷：即肝性脑病，是各种严重的肝病（如：严重的肝功能不全）的并发症或终末表现，是以代谢紊乱为基础、意识障碍和昏迷为主要表现的中枢神经系统功能紊乱的综症状。 2. 原因：严重的肝病。 3. 机制：尚未阐明，为多种发病因素综合作用的结果：氨中毒学说(ammonia intoxication)，假神经递质学说(false neurotransmitter hypothesis)，胰岛素、血浆氨基酸失衡学说(theory of insulin and plasma amino acid imbalance)，短链脂肪酸中毒学说(theory of short chain fatty acid intoxication) 等。

113 4. 肝昏迷的生物化学诊断： 是各种严重的肝病的并发症或终末表现。
4. 肝昏迷的生物化学诊断： 是各种严重的肝病的并发症或终末表现。 （1） 一般的肝功能实验：ALB、TP、A/G、 CHO、尿素、FBS等↓ ， AST、ALP ↑； （2） 特殊意义的生物化学检查：血氨增高、鲎试验（检测内毒素）、弥漫性血管内凝血方面的检查（血小板↓ 、凝血酶原时间延长、血浆纤维蛋白原呈低值）、芳香族氨基酸/支链氨基酸比值↑ 。

114 血氨分析：对鉴别氮源性肝昏迷有重要价值。 鲎试验：用于检测血中的内毒素。
对肝昏迷有特殊意义的实验室检查主要有： 血氨分析：对鉴别氮源性肝昏迷有重要价值。 鲎试验：用于检测血中的内毒素。 弥漫性血管内凝血方面的检查：血小板<50*109/L有临床意义，凝血酶原时间延长1倍以上对肝病患者有诊断价值，纤维蛋白原<1.25g/L对肝病患者有诊断意义，鱼精蛋白副凝血试验阳性更有诊断价值。 支链氨基酸/芳香氨基酸比值： 增加。 肝昏迷的实验室所见: ① BIL>40mg/L(680mmol/L):胆汁排泄障碍 ②ALB↓,肝合成能力 ↓ ③CHO ↓ ,肝合成能力 ↓ ④AST及ALP 高值→↓，肝C破坏 ⑤BUN ↓，肝合成能力 ↓ ⑥GLU↓，肝糖元贮备 ↓ ⑦PT↑,Ⅱ　Ⅶ　Ⅸ　 Ⅹ ↓ ⑧Fib合成↓ ⑨血NH3 ↑ →BUN ↓ ⑩血pH ↑脑水肿→过度换气

115 四、胆石症的生物化学 （bilestone/gall-stone）
（一）概述 1. 胆结石的主要成份为：CHO、BIL、钙及其他无机元素类、胆汁酸、结石基质（硫酸化糖蛋白及糖蛋白）等。 2. 胆石症的分类： CHO系结石 BIL系结石 混合性胆石

116 微胶粒具有双电层结构，两层之间有电势存在，即电位。
（二）胆固醇系结石形成机制 含有过饱和胆固醇的胆汁：是胆固醇沉淀的先决条件：胆汁中CHO↑，胆汁酸盐及卵磷脂的含量↓。 胆汁酸组成改变：胆汁中CDCA明显减低，正常CA:CDCA:DCA=1.3:1.0:0.6 磷脂↓：磷脂/CHO=6.6，结石为2.3。 胆汁微胶粒电位↓：电位差越大，则微团带电荷越多，稳定性越大（甘氨酰胆汁酸/牛磺酰胆汁酸的比例改变3:1→15:1）。 其他：胆囊干迷走神经切除；未饱和脂肪酸摄入过多；有遗传倾向。 微胶粒具有双电层结构，两层之间有电势存在，即电位。 微胶粒具有双电层结构，两层之间有电势存在，即电位。

117 （三）胆红素系胆石形成机制 1. 平衡机制： 正常胆汁中的葡萄糖醛酸胆红素不易被水解，而处于良好的溶解状态。
胆汁中β-葡萄糖苷酸酶活性低：此酶可水解葡萄糖醛酸胆红素。 葡萄糖二酸-1,4-内酯的抑制：为β-葡萄糖苷酸酶的抑制物。

118 胆红素在肠道中的变化 β-葡萄糖醛酸苷酶 结合胆红素 游离胆红素 葡萄糖醛酸 还原 氧化 胆素 胆素原
胆素原：中胆素原，粪胆素原，d -尿胆素原 胆 素： i -尿胆素，粪胆素， d -尿胆素

119 2. 形成机制： 胆红素负荷增加：胆色素结石形成的基础。
β-葡萄糖苷酸酶活性增加：蛔虫钻进胆道，带入大肠杆菌，造成胆道感染，细菌性的β-葡萄糖苷酸酶活性增加。 胆汁中的葡萄糖二酸-1,4-内酯含量↓； 胆汁微胶粒电位↓：这是胆红素融合集结的条件。降低的因素有--Ca2+，Na+，K+，Mg2+及高分子有机物的影响。 蛔虫残体、卵及其它异物--结石的核心，胆红素钙-结石基质的网架。

120 五、肝癌的临床生物化学 （一）肝细胞癌变原理 肝细胞原癌基因 物理,化学 生物性等 致癌因素 点突变, 基因易位 基因扩增
激活 激活 癌基因产物(癌蛋白)↑ 此过程还伴 有抑癌基因 的缺失或 失活 细胞内基因表达失控 细胞癌变

121 乙肝及丙肝病毒与肝癌 早期 肝癌 腺瘤性 增 生 正常 肝C 慢性 肝炎 肝a癌转移 进行性肝癌
饮酒 HBV感染 HCV感染 HBV X蛋白 早期 肝癌 腺瘤性 增 生 正常 肝C 慢性 肝炎 N-ras 表达异常 C-myc C-ets-2 P53基因失活 RB基因失活 16q基因缺失 肝a癌转移 进行性肝癌

122 （二）肝癌的生物化学诊断 AFP及AFP异质体： AFU（岩藻糖苷酶）：其与AFP联合检测可使阳性率达90％左右。
γ-GT及同工酶 、5ˊ-NT及其同工酶等。 联合检测，以最大限度地提高阳性率，减少假阳性及假阴性的产生 。

123 第五节 肝胆疾病的肝功能实验室检查 肝脏分泌与排泄功能实验 代谢性肝功能实验 临床酶学检测 肝脏疾病的特殊检查

124 一、肝脏分泌与排泄功能实验 内源性物质的分泌与排泄： 如胆红素、胆汁酸检测等。
外源性物质的清除能力检测： BSP （磺溴酞钠，Bromsulphalein）、 ICG（吲哚绿，Indole green）、氨基比林和利多卡因清除试验等。 体内处理过程： BSP或ICG经静脉注射后几乎全部与血浆ALB结合运送至肝脏被肝细胞摄取。其血中滞留率取决于肝血流量、肝细胞功能和胆道的通畅情况。 注意：BSP及ICG均是外源性色素，试验时应注意过敏反应及休克。

125 4. 临床意义 （1）ICG滞留百分率：正常注射后45min ﹤5%，而在肝细胞损伤、胆道阻塞和占位性病变时，则滞留率增高； （2）BSP滞留百分率：正常注射后1小时，血中查不到这种染料，或只是很微量，若注射后30分钟，滞留率在10%～40%，表示轻度肝功能损害；滞留50%～80%，表示中度肝功能受损；滞留率﹥90%表示严重肝功能不全。

126 二、代谢性肝功能实验 肝细胞损伤时蛋白质、糖、脂类代谢变化的指标及临床意义。 见书 P.248. 表9-8
参阅、回顾第一节第三部分内容“肝细胞损伤时的代谢改变”。

127 三、肝胆疾病的临床酶学 （一）临床酶学与肝胆疾病定位 肝实质细胞合成能力的酶类：LCAT，CHE。
肝实质细胞损伤为主的酶类：主要有ALT、AST及其同工酶等； 胆汁郁积黄疸为主的酶类：主要有γ-GT、ALP、5ˊ-NT及其同工酶等； 肝纤维化为主的酶类：主要有MAO、β-脯氨酸羟化酶（β-Proline hydroxylase，β-PH）等。

128 （二）肝病的血清酶学 ALP ALT γ-GT 5’-NT AST β-PH MAO 急性肝炎 ↑ ↑↑ ↑ ↑ ↑↑↑ - - 酒精性肝炎
↑ ↑↑ ↑ ↑ ↑↑↑ 酒精性肝炎 N,↑ ↑ ↑↑↑ ↑ ↑ 慢性肝细胞疾病 N,↑ ↑ N,↑ N,↑ ↑ N,↑ N,↑ 肝硬化 N,↑ N,↑ N,↑ N,↑ N,↑ ↑ 肝肿瘤 ↑ ↑ ↑ 胆汁郁积 ↑ ↑ ↑

129 梗阻性黄疸和肝炎时血清酶的变异特点 特 点 主 要 次 要 梗阻性黄疸较急性肝炎高 ALP LAP，5ˊ-NT，γ-GT
特 点 主 要 次 要 梗阻性黄疸较急性肝炎高 ALP LAP，5ˊ-NT，γ-GT 急性肝炎较梗阻性黄疸高 AST，ALT OCT，ICD，ALD、IdD 急性肝炎和梗阻性黄疸时正常或稍高 LD，CK 卵磷酯酶、AMY 急性肝炎时低而在梗阻性黄疸时正常 CHE LCAT

130 四、肝脏疾病的特殊检查 （一）肝活检 （二）放射性同位素检测：肝血流、有无占位性病变等。 （三）血清学检查：肝炎病毒的感染情况。
1. 适应征：(1)明确肝肿大、黄疸、腹水、胃肠道出血或异常肝功能或血清酶水平的原因；(2)确诊可能的肝病如慢性肝炎、肝硬化、脂肪肝或癌肿；(3)识别系统性疾病 如：血源性结核、淀粉沉积和淋巴瘤等；(4)评价急、慢性肝炎疗效。 2. 相对禁忌征：(1)凝血因子缺乏；(2)证实肝后黄疸的临床诊断；(3)重度贫血；(4)细菌感染； （二）放射性同位素检测：肝血流、有无占位性病变等。 （三）血清学检查：肝炎病毒的感染情况。

131 第六节 肝功能检验项目选择原则与评价 肝脏功能检查的目的 肝功能实验项目的选择原则与组合 肝脏功能检查的应用 肝脏功能实验的评价

132 肝脏功能检查的目的（自学内容） 寻找肝脏疾病的病因和病原，从而做出筛选。 检测损伤的类型和定位，了解肝脏损伤程度，评估预后和观察病情。
了解和监测肝脏功能状态。 判断疗效和对手术的耐受性。 健康咨询，帮助了解各种理化和环境因素对肝脏的损害。 其他系统疾病对肝脏功能的影响和损伤。

133 二、肝功能实验项目的选择原则与组合 （一）选择原则 根据实验项目的性质和特点； 按临床实际应用的需要； 根据具体病情需要选择；
根据所在医院的实验室条件选择。 （二）项目组合原则 一般选用3～5个项目。 实验结果应能指示肝脏的主要功能和损伤情况。 方法简便，易于标化，便于检查结果在不同医院流通 。 病人痛苦小，经济负担轻。

134 肝功能实验基础 以肝脏产生或合成的物质为基础 ： 清蛋白、胆碱酯酶、凝血因子。
以肝脏代谢物质为基础：药物、异源性物质、胆红素、胆固醇、甘油三酯等。 以受损组织释放或合成增多的物质为基础 ： AST、ALT、ALP、γ—GT、5ˊ-NT等。 以肝脏清除排泄物质为基础：内源性：如胆汁酸、胆红素、氨等；外源性：如吲哚绿、半乳糖、BSP等。

135 三、肝功能实验的评价 肝脏有其特殊的代谢特点 。 实验结果的局限性：肝脏生理、生化功能复杂，实验项目繁多 ，表现的结果存在差异。
实验结果的不灵敏性：肝脏具有强大的储备、代偿和再生能力。 实验结果的不准确性：肝功能试验的结果亦受实验技术、实验设备、试剂质量及操作人员的技术熟练程度等多种因素的影响。

136 本 章 小 结 [掌握] 生物转化的概念、类型及其临床意义；胆红素的种类及相互的区别、黄疸的分类及其实验室鉴别试验；胆汁酸的组成及其检测的临床意义；肝硬化、肝昏迷及肝癌的临床生物化学检测。 [熟悉] 胆红素代谢过程，胆汁酸的代谢与功能，肝细胞损伤时的代谢改变；乙醇性肝损伤、胆石症的生物化学机制；肝功能的生物化学检测项目选择及应用。 [了解] 肝硬化、肝昏迷及肝癌的生物化学机制。

137 参 考 书 籍及网址 周爱儒主编. 生物化学. 第六版.北京：人民卫生出版社， 2004.
王鸿利，叶裕春主编. 中华检验医学大辞典.上海：上海科技出版社，2000. 陈灏珠主编. 实用内科学.第十一版.北京：人民卫生出版社，2001. 康格非主编. 临床生物化学和生物化学检验.第二版.北京：人民卫生出版社，2001.

138 课 后 习 题 一、名词解释： 生物转化，结合胆红素，初级胆汁酸，黄疸。 二、简答题： 试述胆红素的种类及相互的区别。
一、名词解释： 生物转化，结合胆红素，初级胆汁酸，黄疸。 二、简答题： 试述胆红素的种类及相互的区别。 三型黄疸的胆红素代谢方面的鉴别试验有哪些？ 试述胆汁酸的组成及其检测的临床意义。 肝硬化、肝昏迷及肝癌的临床生物化学检测指标有哪些？ 试述乙醇性肝损伤的生物化学机制。 试述肝功能的生化检测项目选择及应用。