第三章 药物的杂质检查.

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1 第三章 药物的杂质检查

2 第一节 概述 一、药物的纯度 杂质是指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。
第一节 概述 一、药物的纯度 杂质是指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。 药物的纯度是指药物的纯净程度。 它反映了药物质量的优劣。 杂质检查（纯度检查） 药物纯度（药用规格）

3 评价：综合考虑药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含量测定。
对药物纯度要求不断提高 药物纯度主要由“检查”项下的杂质检查控制，也可通过药物的物理性状和含量反应 评价：综合考虑药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含量测定。

4 严禁使用化学药品或化学试剂直接代替药用规格
药物的纯度与化学试剂的纯度区别 a.药物纯度—又称为药用规格 主要从用药安全、有效和对药物稳定性等方面考虑. 只有合格品和不合格品 b.化学试剂的纯度——是从杂质可能引起的化学变 化对使用的影响以及试剂的使用范围和使用目的 加以规定, 不考虑杂质对生物体的生理作用及毒 副作用。 严禁使用化学药品或化学试剂直接代替药用规格 共同点：杂质<规定限量

5 试剂纯度分级： 基准试剂 优级纯或特种试剂 (光谱纯、色谱纯、农药残留检测级) 分析纯 化学纯

6 例：硫酸钡（BaSO4） 试剂规格：可溶性钡盐不检查 检查氯化物、铁、灼烧失重等 药用规格：可溶性钡盐剧毒 检查可溶性钡盐、砷盐等

7 其他检查 除纯度检查外 还包括有效性、安全性和均匀性检查 有效性：Al（OH）3的制酸力 安全性：异常毒性、热原、降压物质等 均匀性：含量均匀度

8 二 、杂质的来源 1. 生产过程中引入 (1) 所用原料不纯。 (2) 合成工艺中未反应完全的原料、 合成中间体、副产物等。
1. 生产过程中引入 (1) 所用原料不纯。 (2) 合成工艺中未反应完全的原料、 合成中间体、副产物等。 (3) 制剂中产生新杂质 (4) 合成工艺中使用的设备、器皿以及 使用溶剂，可能引入重金属、有机 溶剂等。

9 二 、杂质的来源 1. 生产过程中引入 (5) 无效或低效异构体或晶型 (6) 天然植物提取 常含结构、性质相近的物质 很难完全分离除去

10 注意： 异构体或多晶型，生物活性有很大差别。 通常在生产中对于低效、无效异构体或多晶型难予完全分离除尽
生产工艺条件（加热温度、结晶溶剂、粉碎等）不同 贮藏期中受光照、温度、湿度等影响可引起晶型的转变，从而对药物的有效性和安全性产生影响。

11 a 具有立体异构体的药物,其生物活性有很大差异;
b 异构体中,其顺式体与反式体的生物活性也不相同; c 药物的晶型不同, 其理化常数, 溶解性稳定性、体内的吸收和疗效也有差异。 必须重视异构体和多晶型对药物有效性和安全性 的影响。控制药物中低效、无效以及具有毒性的 异构体和多晶型, 在药物纯度研究中日益受到重视。

12 2. 贮藏过程中引入 (1)保管不善或贮存时间过长 (2)包装不当

13 三、杂质的种类 按来源分：一般杂质、特殊杂质 按杂质结构分：有机杂质、无机杂质 按性质分：信号杂质、有害杂质 无效或低效杂质

14 按来源可分为2类 一般杂质 ——指在自然界中分布广泛,在多种药物的生产或贮存过程中容易引入的杂质。 特殊杂质
——指在该药物的生产或贮存过程中,根据药物的性质、生产方法和工艺条件,有可能引入的杂质。

15 按结构可分为2类 无机杂质 ——Cl-、S2-、CN-、As、重金属。 有机杂质 ——中间体、副产物、分解物、异构体、残留溶剂。

16 按性质可分为3类 信号杂质——指本身一般无害,但其含量多少可反映药物纯度水平,指示生产工艺是否合理。
有害杂质——对人体有毒害的杂质，在质量标准中严加控制,以保证用药安全。 无效或低效杂质

17 四、杂质的限量 （一）杂质限量的定义 在不影响药物疗效、稳定性及不发生毒性的前提下,药物中所含杂质的最大允许量。
通常用百分之几或百万分之几（ppm）表示 （二）杂质检查的要求 一般不要求测定杂质的含量，而只检查杂质的量是否超过限量。 这种杂质检查的方法叫做杂质的限量检查。

18 （三）限量检查的方法 2 1 （对照管） （样品管） 1)标准对照法 操作: 平行试验 比较两比色管颜色或浊度 判断杂质限量
特点：遵循平行原则；需要对照物质；检测结果只能判定杂质是否符合规定，不能测定杂质的准确含量 2 （对照管） 1 （样品管）

19 2)灵敏度法 在供试液中加入试剂 试验条件下 不得出现正反应 特点：不需要对照物质 例1：蒸馏水中氯化物检查

20 例2：乳酸中枸橼酸、草酸、磷酸或酒石酸的检查

21 3) 比较法 样品 0.5mg/ml供试品液 A λ276nm 0.01mol/HCL 一定量供试品 规定条件测杂质A 判断杂质限量
3) 比较法 一定量供试品 规定条件测杂质A 判断杂质限量 例、胰岛素的吸收度检查 A λ276nm 0.5mg/ml供试品液 0.01mol/HCL 样品 规定：测得的A应该为0.48～0.55

22 （四）杂质限量的计算 　　注意：质量、体积的单位要统一

23 例1 取对乙酰氨基酚2.0g，加水100ml，加热溶解后，冷却，滤过，取滤液25ml, 依法检查氯化物，所发生的浑浊，与标准氯化钠溶液5.0ml(每1ml 相当于10mg的Cl)制成的对照溶液比较，不得更浓。问氯化物限量为多少？ 解：　　 　　　根据 　

24 例2 取葡萄糖4.0g, 加水23ml后,加醋酸盐缓冲液(pH3.5)
2ml, 依法检查重金属, 含重金属不得过百万分之五。问应取标准溶液多少ml(每1ml相当于10mg的Pb)? 解： 根据 　

25 例3 药典规定检查砷盐时，应取标准砷盐溶液2.0ml(每1ml相当于1mg的As）制备标准砷斑。今依法检查溴化钠中砷盐，规定含砷量不得过0.0004%，问应取供试品多少克？ 解： 　　　根据 　

26 例4 磷酸可待因中检查吗啡，方法为取品0.10g，加盐酸溶液（9 →1000)使溶解成5ml, 加亚硝酸钠试液2ml, 放置15分钟, 加氨试液3ml, 所显颜色与吗啡溶液[取无水吗啡2.0mg, 加盐酸溶液（9 →1000）使溶解成100ml]5.0ml用同一方法制成的对照溶液比较，不得更深。问其限量为多少？ 解： 根据 　

27 计算题 苯巴比妥钠中重金属的检查方法如下：
取本品2.0g，加水32mL，溶解后缓缓加1mol/L 盐酸8mL，振摇，静置数分钟，滤过，取滤液20mL，加酚酞指示液1滴与氨试液适量至溶液恰显粉红色，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL与水适量使成25mL，依法检查，含重金属不得超过百万分之十。 试计算应取标准铅溶液（每1mL相当于10μg Pb）的体积.

28 计算题 肾上腺素中肾上腺酮的检查方法如下：
称取本品0.250g，置25mL量瓶中，加0.05mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置另一个25mL量瓶中，加0.05mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在310nm波长处测定，吸收度不得超过0.05。已知肾上腺酮的吸收系数为453，试计算肾上腺素中肾上腺酮的限量（以%表示）。

29 计算题 某药物进行中间体杂质检查：取该药，加稀盐酸制成每毫升含2mg的溶液，置1cm比色池中，于310nm处测定（杂质有吸收，药物无吸收）吸收度，不得超过0.05。另取中间体对照品，用相同溶剂配成每毫升含10μg的溶液。在相同条件下测得吸收度为0.435，试问该药品中间体杂质的限量是多少？

30 计算题 维生素E中游离生育酚[M=430.7g/mol]的检查方法如下：
取本品0.1g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈滴定液(0.01mol/L)滴定，消耗硫酸铈滴定液不得超过1.0ml。反应式如下： 试计算每ml硫酸铈滴定液(0.01mol/L)相当于生育酚的质量。

31 问答题 1. 药用规格与化学试剂规格有何不同？ 2. 杂质包括哪些种类？来源途径有哪些？ 3 什么是杂质和杂质限量？杂质限量通常用什么表示？

32 第二节 一般杂质检查

33 一般杂质检查规则 《药品检验操作标准》规定： 1. 遵循平行操作原则
（1）仪器的配对性 如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致 （2）对照品与供试品的同步操作

34 一般杂质检查规则 2. 正确的取样及供试品的称量范围 1g不超过±2%，＞1g不超过±1% 3. 正确的比色、比浊方法
4. 检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份

35 （一）检查原理 一、氯化物检查法 标准对照法

36 氯化物检查法 （二）操作方法 0.60g 葡萄糖中氯化物检查 样品管 6.0mL (浓度：10gCl－/ml) 对照管 0.010%

37 （三）测定条件 氯化物检查法 1. 标准NaCl溶液 10g Cl/ml，50ml供试溶液中含50～80g的Cl所显浑浊梯度明显，相当于标准NaCl溶液5～8ml。 2. 反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀HNO3 10ml为宜。 加速AgCl浑浊的形成 产生较好的乳浊 避免弱酸银盐如Ag2CO3、Ag3PO4以及Ag2O沉淀的形成。

38 （三）测定条件 氯化物检查法 3. 稀释到40ml以后再AgNO3试液的目的 使产生的AgCl浑浊均匀
加入硝酸银过早，由于氯化物浓度过大而产生AgCI沉淀而影响比浊。

39 （三）测定条件 氯化物检查法 4. 试剂：硝酸银 5. 避光、暗处放置5分钟后比浊（AgCl见光易分解）
6. 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。 7. 务必遵循平行操作原则

40 观察

41 （四）干扰及排除 氯化物检查法 1. 不澄清： 用含硝酸的水洗净滤纸中的氯化物后过滤 2. 若供试品有色，需经处理后方可检查。
（1）内消色法（倍量法） （2）外消色法

42 （四）干扰及排除 氯化物检查法 内消色法 如:枸橼酸铁铵中氯化物的检查 无氯化物杂质，相同颜色澄清液

43 （四）干扰及排除 氯化物检查法 外消色法 向供试品溶液中加入某种试剂,使溶液颜色褪去后再依法检查 例：高锰酸钾中氯化物的检查
因溶液呈紫色，加入适量乙醇，使颜色消失后再检查

44 （四）干扰及排除 氯化物检查法 3. 供试品溶液显碱性的处理方法 先中和为中性后再检查 避免硝酸银在碱性条件下生成氢氧化银和氧化银。

45 （四）干扰及排除 氯化物检查法 4. 当有其它干扰物质存在时，必需在检查前除去

46 （四）干扰及排除 氯化物检查法

47 （四）干扰及排除 氯化物检查法

48 （四）干扰及排除 氯化物检查法 5. 不溶于水的有机药物 （1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。 （2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。
5. 不溶于水的有机药物 （1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。 （2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。 （3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。

49 （四）干扰及排除 氯化物检查法 6. 有机药物中有机氯杂质的检查，具体情况，具体分析。 如：杂质中卤素原子连接于苯环上
6. 有机药物中有机氯杂质的检查，具体情况，具体分析。 如：杂质中卤素原子连接于苯环上 ——先进行有机破坏,使分解后再检查。 氧瓶燃烧进行样品处理

50 选择题 氯化物检查法 1. 药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是
A. 硫酸 B. 硝酸 C. 盐酸 D. 醋酸 E. 磷酸 2. 检查氯化物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液（10µg Cl－/ml）5～8ml的原因是 A. 使检查反应完全 B. 药物中含氯化物的量均在此范围 C. 加速反应 D. 所产生的浊度梯度明显 E. 避免干扰 （B） （D）

51 选择题 氯化物检查法 3. 采用硝酸银试液检查氯化物时，加入硝酸使溶液酸化的目的是 A．加速生成氯化银浑浊反应 （ABCDE）
4. 采用比浊法检查氯化物杂质时，若药物本身有颜色而干扰检查的话，应该选用的处理方法为 A．内消色法 B．外消色法 C．比色法 D．差示比浊法 E．差示可见分光法 （ABCDE） （AB）

52 选择题 氯化物检查法 5. 若要进行高锰酸钾中氯化物的检查，最佳方法是 A. 加入一定量氯仿提取后测定 B. 氧瓶燃烧
C. 倍量法 D. 加入一定量乙醇 E. 以上都不对 6. 下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件 A.所用比色管需配套 B. 稀硝酸酸性下(10ml/50ml) C. 避光放置5分钟 D. 用硝酸银标准溶液做对照 E. 在白色背景下观察 （D） （ABC）

53 （一）检查原理 二、硫酸盐检查法 标准对照法

54 （二）操作方法 硫酸盐检查法 1. 供试液和对照液稀释后，再加BaCl2溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀
2ml 40ml d.HCl 25%BaCl2 5ml H2O 50ml 样品 标准溶液 1. 供试液和对照液稀释后，再加BaCl2溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀 2. 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。

55 （三）讨论 硫酸盐检查法 1. 标准K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.1～0.5mg的所显浑浊梯度明显，相当于标准K2SO4溶液1～5ml。 2. 加盐酸，可防止碳酸钡或磷酸钡等沉淀生成。溶液的酸度以50ml中含稀盐酸2ml为宜（溶液的pH约为1）。酸度增加，灵敏度下降。 3. 氯化钡溶液的最佳浓度为25%，加入氯化钡试液后，应立即充分摇匀，防止局部过浓而影响产生浑浊的程度

56 （四）供试品处理 硫酸盐检查法 不澄清： 先加盐酸使成酸性的水洗净滤纸中的硫酸盐，再过滤 有色供试品：
处理方法同氯化物（内消色法即倍量法处理）

57 选择题 硫酸盐检查法 药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液是 A. 标准氯化钡 B. 标准醋酸铅溶液
C. 标准硝酸银溶液 D. 标准硫酸钾溶液 E. 以上都不对 （D）

58 （一）硫氰酸盐法 三、铁盐检查法 Ch.P.（2010）、USP（25） 1. 检查原理 对照法

59 （一）硫氰酸盐法 铁盐检查法 2. 操作方法 25ml 稀HCl 4ml 过硫酸铵50mg 30%硫氰酸铵 H2O 50ml 样品 标准溶液

60 （一）硫氰酸盐法 铁盐检查法 3. 讨论 （1）标准铁溶液的配制
3. 讨论 （1）标准铁溶液的配制 用硫酸铁铵[FeNH4(SO4)2·12H2O]配制标准溶液，并加入硫酸防止铁盐水解，使易于保存。标准铁溶液每1ml相当于10mg的Fe3+。 （2） Fe3+ 适宜浓度 目视：50ml溶液中含10~50 mg的Fe3+ 仪器：50ml ~90 mg

61 （一）硫氰酸盐法 铁盐检查法 （3）加入盐酸的作用与加入量 （4）加入过量的NH4SCN的作用 防止铁离子水解
提供供试品中可能含有Fe2+和过硫酸铵反应的酸性环境；避免醋酸盐、磷酸盐、砷酸盐等干扰 加入量以50ml加稀盐酸4ml为宜 （4）加入过量的NH4SCN的作用 减少生成的配离子解离，提高反应灵敏度 消除氯化物和其他在酸性溶液中能与铁盐生成配位化合物的物质所引起的干扰

62 （一）硫氰酸盐法 铁盐检查法 （5）加入氧化剂过硫酸铵[(NH4)2S2O8]的作用 可将Fe2+氧化成Fe3+
可防止硫氰酸铁还原或分解褪色 某些药物（如葡萄糖、糊精、硫酸氢钠和硫酸镁等）在检查过程中加硝酸处理，则不再加过硫酸铵，但必须加热煮沸除去HNO2分解产生的氧化氮，否则HNO2 与SCN-生成红色亚硝酰硫氰化物(NO·SCN），影响比色。

63 （一）硫氰酸盐法 铁盐检查法 4. 供试品处理 （1）当供试液管与对照液管色调不一致，或所呈硫氰酸铁配离子的颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，各加正丁醇或异戊醇提取，分取有机溶剂层比色。 （2）具有环状结构的有机药物，需经炽灼破坏，使铁盐成三氧化二铁留于残渣中，处理后再依法检查。（盐酸普鲁卡因）

64 （一）硫氰酸盐法 铁盐检查法 （3）排除酸根阴离子干扰 适当增加酸度， 增加硫氰酸铵的加入量， 用正丁醇提取后比色

65 （二）巯基醋酸法 铁盐检查法 BP（2000） 对照法，本法灵敏度较高，但试剂较贵

66 选择题 铁盐检查法 中国药典（2010年版）规定铁盐的检查方法为 （A） A. 硫氰酸盐法 B. 巯基醋酸法 C. 普鲁士蓝法
D. 邻二氮菲法 E. 水杨酸显色法 中国药典（2010年版）规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸铵的目的是 A. 使药物中铁盐都转变为Fe3+ B. 防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 C. 使产生的红色产物颜色更深 D．防止干扰 E．便于观察、比较 （A） （AB）

67 选择题 铁盐检查法 某药物（黄色）欲进行铁盐检查，应采用下面哪种方法 A. 倍量法 B. 微孔滤膜过滤法 C. 调色法 （E）
D. 600～700℃炽灼残渣后测定 E. 以上都不对 中国药典收载的铁盐检查，主要是检查 A. Fe B. Fe2+ C. Fe3+ D. Fe2+和Fe3+ E. 以上都不对 （E） （D）

68 四、重金属检查法 重金属系指在实验条件下（pH）能与显色剂（硫代乙酰胺或硫化钠）作用显色的金属杂质。
如银、铅、铜、镉、铋、锑、锡、锌、钴、镍等。此项检查以铅为代表。 药典中三种方法

69 第一法:硫代乙酰胺法 重 金 第二法:炽灼后检查法 属 检 查 法 第三法:硫化钠法 第四法:微孔滤膜法
适用于溶于水、稀酸、乙醇的药物,最常用方法。 重 金 属 检 查 法 第二法:炽灼后检查法 适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及 乙醇的有机药物。 第三法:硫化钠法 适用于难溶于稀酸但能溶于碱性溶液药物, 巴比妥类、磺胺类 第四法:微孔滤膜法 适用于重金属限量低(2-5g) 药物。

70 第一法：硫代乙酰胺法 Ch.P. 1.原理 适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物 条件：酸性（ pH3.5醋酸盐缓冲液）
CH3CSNH2+H2O→CH3CONH2+H2S 药物： Pb2++H2S → PbS↓+2H+ 　　　 (黄色至棕黑色沉淀) 悬浊液

71 2. 操作方法 硫代乙酰胺法 样品管 对照管 用硝酸铅配制标准铅溶液，每1ml相当于10 μg的铅。以27ml溶液中含10~20μgPb

72 3. 讨论 硫代乙酰胺法 1）加入醋酸盐缓冲液的目的 调pH至3.0~3.5，此时PbS沉淀完全，若酸度增大，硫化物沉淀颜色变浅，甚至无色。
3. 讨论 硫代乙酰胺法 1）加入醋酸盐缓冲液的目的 调pH至3.0~3.5，此时PbS沉淀完全，若酸度增大，硫化物沉淀颜色变浅，甚至无色。 2）显色剂的选择 曾用过硫化氢饱和溶液，但不稳定，易被空气氧化析出S，浓度难以控制并有恶臭与毒性，现改用硫代乙酰胺作显色剂。

73 3. 讨论 3）干扰与排除 硫代乙酰胺法 供试品如有色，需处理后方可检查。
3. 讨论 硫代乙酰胺法 3）干扰与排除 供试品如有色，需处理后方可检查。 A. 外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液（指示剂调节） B. 内消色法 C. 改用第四法，微孔滤膜过滤法

74 3. 讨论 硫代乙酰胺法 内消色法 ——与氯化物检查时的处理方法类似

75 3. 讨论 硫代乙酰胺法

76 3. 讨论 硫代乙酰胺法

77 3. 讨论 硫代乙酰胺法

78 第二法：炽灼残渣法 Ch.P. 1. 原理 适用于含芳环、杂环及不溶于水、稀酸、乙醇的有机药物（安乃近）
将供试品炽灼破坏后，加硝酸加热处理，使有机物分解、破坏完全而重金属游离，再按第一法检查。

79 炽灼残渣法 H2SO4

80 3. 注意事项 炽灼残渣法 HNO3处理后,必须蒸干除尽氧化氮，否则亚硝酸可氧化硫化氢析出硫，影响比色。 炽灼温度严格控制：500-600℃
3. 注意事项 炽灼残渣法 HNO3处理后,必须蒸干除尽氧化氮，否则亚硝酸可氧化硫化氢析出硫，影响比色。 炽灼温度严格控制： ℃ 含钠及氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿（因可腐蚀瓷坩埚，带入大量重金属）

81 第三法：硫化钠法 Ch.P. 适用于溶于碱而不溶于稀酸的药物 （磺胺类、巴比妥类） 1. 原理

82 方法 取供试品适量，加NaOH试液5ml和水 20ml使溶解后，置纳氏比色管中，加 Na2S试液5滴，摇匀，与一定量标准铅
溶液经同法处理所呈颜色比较。

83 硫化钠法 2. 注意事项 （1）NaOH碱性条件下（5 mL) （2）显色剂：Na2S （5滴)
（3）硫化钠对玻璃有腐蚀性，久置后会产生絮状物，应临用新制。

84 第四法：微孔滤膜法 1. 原理 依一法检查，经微孔滤膜过滤后比较色斑 2. 试验装置 3. 讨论
1. 原理 依一法检查，经微孔滤膜过滤后比较色斑 2. 试验装置 3. 讨论 适用于含2～5g重金属杂质及有色供试液的检查 可提高了检查的灵敏度

85 选择题 1.重金属检查中，加入硫代乙酰胺时溶液控制最佳的pH值是 A. 1.5 B. 3.5 C．7.5 D. 9.5 E. 11.5
2.微孔滤膜法是用来检查 A. 氯化物 B. 砷盐 C. 重金属 D. 硫化物 E. 氰化物 3.中国药典(2010年版)重金属检查法中，所使用的显色剂是 A. 硫化氢试液 B.硫代乙酰胺试液 C.硫化钠试液 D. 氰化钾试液 E. 硫氰酸铵试液 （B） （C） （BC）

86 选择题 4. 葡萄糖中进行重金属检查时，适宜的条件是 （C） A. 用硫代乙酰胺为标准对照液 B. 用10ml稀硝酸/50ml酸化
C. 在pH3.5醋酸盐缓冲溶液中 D. 用硫化钠为试液 E. 结果需在黑色背景下观察 5. 现有一药物为苯巴比妥，欲进行重金属检查，应采用《中国药典》上收载的重金属检查的哪种方法 A. 一法 B. 二法 C. 三法 D. 四法 E. 以上都不对 （C） （C）

87 选择题 6. 《中国药典》收载的重金属检查方法为 （AC） A. 500～600℃炽灼残渣后,按一法操作
B. pH3～3.5条件下，加入硫化氢试液 C. 碱性下，加入硫化钠试液 D. 按一法操作，结果用微孔滤膜过滤后观察色斑 E. 以上都对 （AC）

88 五、砷盐检查法 As毒——须严格控制 四种方法： 古蔡（Gutzeit）氏法 Ch.P.（2010）、BP（2000）
二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法) Ch.P.(2010)、USP（25） 白田道夫（Betterdorff）法 次磷酸法 BP（2000）

89 （一）古蔡氏法 本法适用于不含Sb或含Sb量小于100g的供试品 1. 原理
金属锌与酸作用产生氢，与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，颜色不得更深。 对照 样品

90 古蔡氏法 原理： As3+ + 3Zn+3H+ → AsH3↑+3Zn2+
AsO33-+3Zn+9H+ → AsH3↑+3Zn2+ +3H2O AsH3+3HgBr2 → 3HBr+As(HgBr) (黄色) AsH3+2As(HgBr)3 →3AsH(HgBr)2 (棕色) AsH3+As(HgBr)3 → 3HBr+As2Hg (棕黑色)

91 古蔡氏法 2. 仪器装置 A 砷化氢发生瓶 B 中空磨口塞 C 导气管 D 具孔有机玻璃旋塞 E 具孔有机玻璃旋塞盖

92 古蔡氏法 3. 操作方法 标准砷斑的制备 精密量取标准砷溶液(1μg/ml)2ml，置砷化氢发生瓶中，加盐酸5ml与水21ml，再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，室温放置10分钟，加锌粒2g，立即将装妥的导气管密塞于砷化氢发生瓶上，并将砷化氢发生瓶置25~40℃水浴中，反应45分钟，取出溴化汞试纸，即得。

93 古蔡氏法 供试品检查 取供试品，加盐酸5ml与水23ml溶解后，照标准砷斑制备，自“再加碘化钾试液5ml”起，依法操作，将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。 对照 样品

94 古蔡氏法 4. 讨论 （1）反应液中加KI与酸性SnCl2的作用
4. 讨论 （1）反应液中加KI与酸性SnCl2的作用 ①五价砷在酸性溶液中也能被金属锌还原为AsH3 ，但生成AsH3的速度较三价砷慢，故在反应液中加入KI与酸性SnCl2将五价砷还原为三价砷，加快反应速度 AsO43-+2I-+2H+→AsO33-+I2+H2O AsO43-+Sn2++2H+→AsO33-+Sn4++H2O

95 古蔡氏法 ②碘化钾被氧化生成的碘又可被氯化亚锡还原为碘离子，与反应中产生的锌离子能形成稳定的配离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行。
I2+Sn2+→2I-+Sn4+ 4I-+Zn2+ →ZnI42-

96 古蔡氏法 ③KI与SnCl2可抑制SbH3的生成，因SbH3也能与溴化汞试纸作用生成锑斑。
（2）产生氢气速度的影响因素 反应液的酸度、 酸性氯化亚锡试液用量、 锌粒的大小与用量及 反应温度

97 古蔡氏法 （3）醋酸铅棉花的作用与填塞 消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰 PbAc2+H2S → PbS↓+2HAc
用醋酸铅棉花吸收硫化氢。药典规定用醋酸铅棉花60mg，装管高度约为60-80mm。 HgBr2 S2- + 2H+ → H2S↑ HgS↓

98 古蔡氏法 （4）反应灵敏度 溴化汞试纸与砷化氢作用较氯化汞试纸灵敏，但所呈砷斑不够稳定，在反应中应保持干燥及避光，并立即与标准砷斑比较。本法反应灵敏度为1mg。但不适合含锑的药物。

99 古蔡氏法 （5）干扰与排除 若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐，应先加硝酸使之氧化成硫酸盐（Na2S2SO3中砷盐的检查） H+
S2-,SO32-,S2O32- H2S↑,SO2↑ HgBr2 HgS↓,Hg↓

100 古蔡氏法 （5）干扰与排除 b. 供试品是铁盐 Fe3+能消耗还原剂（KI、SnCI2），并能氧化砷化氢干扰测定
Fe3+ →Fe2+

101 （5）干扰与排除 古蔡氏法 c. 共价键结合的砷化物 多数环状结构的有机药物，因砷在分 子中以共价键结合，要先进行有机破
坏，否则检出结果偏低或难以检出 排除方法：进行有机破坏 ——酸破坏法或碱破坏法

102 （5）干扰与排除 古蔡氏法 酸破坏法 加稀硫酸与溴化钾 例：葡萄糖中砷盐检查 碱破坏法 ①加入氢氧化钙 500——600℃灼烧 例：酚磺酞
①加入氢氧化钙 500——600℃灼烧 例：酚磺酞 ②加入无水碳酸钠碱融 例：苯甲酸钠

103 （二）白田道夫法 1. 原理 含Sb药物中砷盐的检查，如葡萄糖酸锑钠 不受Sb干扰 但灵敏度低 一法
2As3++3SnCl2+6HCl→2As↓+3SnCl4+6H+ 不受Sb干扰 但灵敏度低 一法

104 （二）白田道夫法 2. 特点 优点：不受Sb干扰 缺点：灵敏度低（20μgAs2O3/10ml）加入少量HgCl2灵敏度提高至2μgAs2O3 /10ml

105 （三）二乙基二硫代氨基甲酸银法 Ag-DDC法 Ch.P.(2010)、USP（25） 适用于含Sb量小于500g的供试品

106 Ag-DDC法 原理 直接比色或于510nm波长处测定吸收度，进行比较

107 Ag-DDC法 装置 A.砷化氢发生瓶 B.中空磨口塞 C.导气管 D.平底玻璃管
用有机碱吸收反应产生的HDDC有利于反应的进行。USP（25）用吡啶，Ch.P.（2010）用三乙胺。

108 Ag-DDC法的特点 优点 a 灵敏度高 0.5 g As b 本法不仅用于砷盐的限量检查，而且可用作微量砷盐的含量测定。 c Sb干扰小
缺点：USP（25）用0.5%Ag-DDC吡啶溶液吡啶恶臭，Ch.P.（2010）改为0.25%Ag-DDC三乙胺-氯仿（1.8：98.2）代替，灵敏度略低。

109 （四）次磷酸法 BP（2000） 原理： 在盐酸酸性液中，次磷酸还原砷盐为棕色的游离砷，再与一定量的标准砷溶液用同法处理后所显颜色比较。
NaH2PO2+HCl→H3PO2+NaCl 3H3PO2+AsO33- →3H3PO3+As↓

110 （四）次磷酸法 特点 不受S2-，SO32-，Sb干扰，适用于硫化物、亚硫酸盐以及含锑药物砷盐检查。 灵敏度较古蔡氏法低。 5μg As

111 选择题 1.在药物的杂质检查中，其限量一般不超过百万分之十的是 A. 氯化物 B. 硫酸盐 C. 醋酸盐 D. 砷盐 E. 淀粉 （D）
2.在用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞入醋酸铅棉花的目的是 A. 除去I2 B. 除去AsH3 C. 除去H2S D. 除去HBr E. 除去SbH3 （D） （C）

112 选择题 （ACD） 3.古蔡氏法中，SnC12的作用有
A. 使As5+→As3+ B. 除去H2S C. 除去I D. 组成锌锡齐 E. 除去其它杂质 4.Ag—DDC法检查砷盐的原理为：砷化氢与Ag—DDC吡啶作用，生成的物质是 A. 砷斑B. 锑斑 C. 胶态砷 D. 三氧化二砷 E. 胶态银 （ACD） （E）

113 选择题 5. 中国药典（2010年版）收载的古蔡法检查砷盐的基本原理是 A. 与锌、酸作用生成H2S气体 （BE）
B. 与锌、酸作用生成AsH3气体 C. 产生的气体遇氯化汞试纸产生砷斑 D. 比较供试品砷斑与标准品砷斑的面积大小 E. 比较供试品砷斑与标准品砷斑的颜色强度 （BE）

114 选择题 6. Ag—DDC法检查砷盐时，所产生的红色溶液为 A. HDDC吡啶溶液 B. Ag吡啶溶液
C. Ag的胶态溶液 D. Ag(DDC)溶液 E. AsAg3溶液 7.检查葡萄糖酸锑钠中的砷盐时，应选用 A. 古蔡氏法 B. 白田道夫法 C. 碘量法 D. Ag—DDC法 E. 契列法 （C） （B）

115 选择题 8.葡萄糖中砷盐的检查，需要的试剂应有 （BCDE） A．Pb2+标准液 B．SnCl2试液 C．KI试液 D．Zn E．醋酸铅棉花
9.古蔡法检查砷盐时，加入碘化钾和酸性氯化亚锡的作用为 A．将As5+还原为As3+ B．有利于AsH3生成反应 C．抑制SbH3的生成 D．形成Zn-Sn齐以均匀而连续地发生氢气 E．催化加速生成AsH3 （BCDE） （ABCDE）

116 选择题 10.古蔡氏法检砷，药典规定制备标准砷斑时，应取标准砷溶液 A. 1ml B. 5ml C. 2ml （C）
D. 依限量大小决定 E. 以上都不对 11.古蔡氏法检查所用的溶液是 A. 强碱性溶液 B. 强酸性溶液 C. 含稀盐酸10ml/50ml溶液 D. 含稀硝酸10ml/50ml溶液 E. 含强氧化剂(硝酸或过硫酸铵)溶液 （C） (B)

117 选择题 [1—5]所含待测杂质的适宜检测量为 1.硫酸盐检查法中，50ml溶液中 2. 铁盐检查法中，50ml溶液中
A mg B. 0.01～0.02mg C. 0.01～0.05mg D. 0.05～0.08mg E. 0.1～0.5mg 1.硫酸盐检查法中，50ml溶液中 2. 铁盐检查法中，50ml溶液中 3. 重金属检查法中，27ml溶液中 4. 古蔡氏法中，反应液中 5. 氯化物检查法中，50ml溶液中 (E) (C) (B) (A) (D)

118 选择题 [6—10] 6．药物中铁盐检查 7．磺胺嘧啶中重金属检查 8．药物中硫酸盐检查 9．葡萄糖中重金属检查 （E）
A. 硝酸银试液 B. 氯化钡试液 C. 硫代乙酰胺试液 D. 硫化钠试液 E. 硫氰酸盐试液 6．药物中铁盐检查 7．磺胺嘧啶中重金属检查 8．药物中硫酸盐检查 9．葡萄糖中重金属检查 10．药物中氯化物检查 （E） （D） （B） （C） （A）

119 选择题 [11—15]可用于检查的杂质为 A. 氯化物 B. 砷盐 C. 铁盐 D. 硫酸盐 E. 重金属
11．在酸性溶液中与氯化钡生成浑浊液的方法 12．在酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色的方法 13．在实验条件下与硫代乙酰胺形成均匀混悬溶液的方法 14．Ag-DDC法 15．古蔡法 （D） （C） （E） （B） （B）

120 选择题 [16～20] 杂质检查中所用的酸是 A. 稀硝酸 B. 稀盐酸 C. 硝酸 D. 盐酸 E. 醋酸盐缓冲液 16. 氯化物检查法
[16～20] 杂质检查中所用的酸是 A. 稀硝酸 B. 稀盐酸 C. 硝酸 D. 盐酸 E. 醋酸盐缓冲液 16. 氯化物检查法 17. 硫酸盐检查法 18. 铁盐检查法 19. 重金属检查法 20. 砷盐检查法 （A） （B） （B） （E） （D）

121 六、溶液颜色检查法 目的：控制药物中可能引入的有色杂质的限量 检查方法 （1 ）目视比色法；（2）分光光度法（3）色差计法
分别配制对照溶液与供试溶液，供试溶液的颜色或吸收度不得深于或大于对照溶液的。 通过色差计直接测定溶液的透射三刺激值，对其颜色进行定量表述和分析的方法。

122 七、易碳化物检查法 目的：检查药物中所含遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质 液体石蜡中的树脂、色素、芳香烃等 柠檬酸中的酒石酸
方法：炭化后与对照液比较，不得更深

123 八、澄清度检查法 目的：检查药物中存在的不溶性杂质
原理： 药物溶液中存在分散的细微颗粒，当直线光通过溶液时，细微颗粒可引起光的散射，测量光的散射就可以测量溶液的浊度。检查中，实际上是通过比较供试品溶液和浊度标准液的浊度，来判断供试品溶液的澄清度是否符合规定。

124 八、澄清度检查法 检查方法： 在室温下，将用水稀释至一定浓度的供试品溶液与等量的浊度标准液分别置于配对的比浊用玻璃管中，在浊度标准液制备5分钟后，在暗室内垂直同置于伞棚灯下，照度为1000lx，从水平方向观察比较，用以检查溶液的澄清度或其浑浊程度。

125 八、澄清度检查法 澄清：供试品溶液的澄清度与所用溶剂相 同，或不超过0.5号浊度标准液的浊度。 几乎澄清：供试品溶液的浊度介于0.5号至1号
浊度标准液的浊度之间。

126 八、澄清度检查法 浊度标准贮备液制备原理：乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。
用1%硫酸肼溶液与10%乌洛托品溶液等量混合，配制成浊度标准贮备液，继而配制成一定级号的浊度标准液，借以判定供试品溶液的澄清度。

127 澄清度检查法 表2-1 不同级号浊度标准液 浊度标准液级号 0.5 1 2 3 4
表2-1 不同级号浊度标准液 浊度标准液级号 浊度标准原液(ml) 水(ml) 光线和温度对混悬液的形成有影响。 所用溶剂为水，也有用酸、碱或有机溶剂。

128 九、炽灼残渣检查法 检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物中混入的无机杂质(金属氧化物或无机盐类) 1. 原理
样品炭化后+ H2SO4湿润→700～800℃炽灼至恒重→炽灼残渣（硫酸灰分） 限量一般为0.1%～0.2%

129 炽灼残渣检查法 2. 操作方法

130 炽灼残渣检查法 3. 注意事项 （1）供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定 （2）含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚
如限量为0.1%者，取样约1g；若为0.05%，取样约2g；在1%以上者，取样可在1g以下。 如遇贵重药物或供试药物数量不足时，取样量可减少。 （2）含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚 （3）若残渣需留作重金属检查，则500～600℃炽灼至恒重 （4）加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化；炽灼前除尽硫酸，低温加热

131 十、干燥失重测定法 在规定条件下干燥后所减失的重量，以百分率表示，主要检查水分及其他挥发性物质。 测定方法有：
（1）常压恒温干燥法（对热稳定） （2）干燥剂干燥法（受热易分解、挥发） （3）减压干燥法（熔点低、受热不稳定、难驱出水分；压力应在2.67kPa（20mmHg）以下） （4）热分析法

132 热分析法 热分析法是在程序控制温度下，精确记录待测物质理化性质与温度的关系，研究其受热过程所发生的晶型转变、熔融、升华、吸附等物理变化和脱水、热分解、氧化还原等化学变化，对物质进行物理常数（如m.p和b.p）的确定的方法。 应用： （1）对物质进行鉴别和纯度检查 （2）用于药物的稳定性研究及制剂辅料的优选 热重法（TG）、差热分析法（DTA）、差示扫描量热法（DSC）

133 （1）热重分析(TG) 测定物质在加热过程中的重量变化 以重量变化来研究其组成和化学变化 十 干 燥 失 重 检 查 法

134 仪器： 热重天平 灵敏度1μg 测最大量200mg 一般取样1~20mg 温度可达1000~1500℃ 十 干 燥 失 重 检 查 法

135 十 干 燥 失 重 检 查 法 例：草酸钙（CaC2O4•H2O）热重曲线
T1(134~226℃):CaC2O4•H2O→CaC2O4+H2O↑,⊿G1=12.3% T2(398~478℃):CaC2O4→CaCO3+CO↑, ⊿G2=19.2% T3(635~838℃): CaCO3→CaO+CO2↑ ⊿G3=30.1%

136 十 干 燥 失 重 检 查 法 优点： 样品用量少 测定速度快 适于贵重药物 易氧化药物的干燥失重

137 十 干 燥 失 重 检 查 法 （2）差示热分析(DTA) 样品和惰性参比物 →可控制加热炉中 →升温 →测定两者温度差与温度关系
惰性参比物： α-Al2O5，石英砂，煅制MgO

138 十 干 燥 失 重 检 查 法 ⊿T>0，为放热峰 ⊿T<0，为吸热峰 ⊿T=0，无热效应

139 十 干 燥 失 重 检 查 法 峰面积： 热效应大小 峰最高点和最低点： 热效应完成的温度 根据峰的数目、形状和位置 对样品定性，估测纯度

140 例1 熔点测定 十 干 燥 失 重 检 查 法 熔融开始温度 全部熔融时温度

141 例2.药物纯度的测定（定性） 十 干 燥 失 重 检 查 法 第一次结晶 重结晶

142 （3）差示扫描量热法 样品和惰性参比物 →可控制加热炉中 →升温 →保持温度一致 →测能量差 十 干 燥 失 重 检 查 法

143 十 干 燥 失 重 检 查 法 E ⊿E>0，为吸热峰 ⊿E<0，为放热峰 ⊿E=0，无热效应

144 十 干 燥 失 重 检 查 法 热分析在药学中的应用日益增多 干燥失重 熔点测定 纯度检查 稳定性研究 辅料优选等

145 十一、水分测定法 1. 费休氏法（ Karl-Fisher卡尔费休水分滴定法） 原理： 费休试液（碘、二氧化硫、吡啶、甲醇）滴定
适用于受热易破坏的药物 不适于氧化剂、还原剂、能与试剂生成水的化合物测定 2. 甲苯法（蒸馏) 适于颜色较深的药物；氧化剂、还原剂；皂类、油类 I2 + SO2 + H2O 2HI + SO3 吡啶 +甲醇

146 十二、残留溶剂测定法 药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产 中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过 程中未能完全去除的有机溶剂。
Ch.P.（2010）GC 第一类溶剂应避免使用 第二类溶剂应限制使用 第三类溶剂按照药品GMP或其他质量要求限制使用

147 十二、残留溶剂测定法 色谱柱 1．毛细管柱 （1）非极性: 100％的二甲基聚硅氧烷 （2）极性: 聚乙二醇（PEG-20M）
十二、残留溶剂测定法 色谱柱 1．毛细管柱 （1）非极性: 100％的二甲基聚硅氧烷 （2）极性: 聚乙二醇（PEG-20M） （3）中极性: （35%）二苯基-（65%）甲基聚氧硅烷、（50%）二苯基- （50%）二甲基聚氧硅烷、（35%）二苯基-（65%）二甲基聚氧硅烷、（14%）氰丙基苯基-（86%）二甲基聚硅氧烷、（6％）氰丙基苯基-（86%）二甲基聚硅氧烷 （4）弱极性:（5%）苯基-（95%）甲基聚氧硅烷、（5%）二苯基-（95%）二甲基硅氧烷共聚物的毛细管柱等。 2．填充柱 : 直径为 mm 的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其它适宜的填料作为固定相。

148 十二、残留溶剂测定法 系统适用性试验 （1）用待测物的色谱峰计算，毛细管色谱柱的n≥ 5000；填充柱n≥1000。
（2）R >1.5。 （3）内标法，所得待测物与内标物峰面积之比的RSD≤ 5％；外标法，所得待测物峰面积的 RSD ≤ 10％。

149 十二、残留溶剂测定法 第一法 毛细管柱顶空进样等温法 适用于检查的有机溶剂的数量不多，并极性差异较小
色谱条件 柱温一般为 40~100℃；氮气为载气，流速1.0~2.0ml/min；以水为溶剂时顶空瓶平衡温度为 70~85 ℃, 顶空瓶平衡时间为 30~60min；进样口温度为 200℃；如采用火焰离子化检测器（FID），温度为250℃。 测定法 取对照品溶液和供试品溶液，分别连续进样不少于 2 次，测定待测峰的峰面积。

150 十二、残留溶剂测定法 第二法 毛细管柱顶空进样系统程序升温法 当需要检查的有机溶剂有机溶剂数量较多，且极性差异较大时，可采用此法。
色谱条件 柱温一般先在 40℃维持 8 min，再以 8 ℃ /min的速度升至120 ℃,维持 10 min；氮气为载气，流速为 2.0ml /min ；以水为溶剂时顶空瓶温度平衡温度为 70~85 ℃, 顶空瓶平衡时间 30~60min ；进样口温度为 200℃；如采用FID检测器，温度为 250℃。

151 十二、残留溶剂测定法 第三法 溶液直接进样法 可采用填充柱，亦可采用适宜极性的毛细管柱 计算法
(1) 限度检查：除另有规定外，按品种项下规定的供试品溶液浓度测定。以内标法测定时，供试品溶液所得被测溶剂峰面积与内标峰面积之比不得大于对照品溶液的相应比值。以外标法测定时，供试品溶液所得被测溶剂峰面积不得大于对照品溶液的相应峰面积。 (2) 定量测定：按内标法或外标法计算各残留溶剂的量。

152 注意事项 干扰峰的排除 测定的色谱系统中未知杂质或其挥发性热降解物与待测物的保留值相同（共出峰）；在另一种极性相反的色谱柱系统中对相同供试品再进行测定，比较不同色谱系统中测定结果的方法。 热降解产物与待测物的结构相同（如甲氧基热裂解产生甲醇）。通过测定已知不含该溶剂的对照样品来加以判断。

153 注意事项 含氮碱性化合物的测定 普通气相色谱的不锈钢管路、进样器的衬管等对有机胺等含氮碱性化合物具有较强的吸附作用，致使其检出灵敏度降低。应采用惰性的硅钢材料或镍钢材料管路；采用溶液直接进样法测定时，供试品溶液应不呈酸性，以免待测物与酸反应后不易汽化。 通常采用弱极性的色谱柱或其填料经碱处理过的色谱柱分析含氮碱性化合物，如果采用胺分析专用柱进行分析，效果更好。 对不宜采用气相色谱法测定的含氮碱性化合物，如 N-甲基吡咯烷酮等，可采用其它方法如离子色谱法等测定。

154 静态顶空进样法 顶空气相色谱分析法的理论依据是当顶空瓶中样品上面的蒸气压相当低时，峰面积Ai的大小与样品上面的气相中挥发性组分i的蒸气压Pi成正比:       fi为校正因子，在真实体系中，蒸气分压通常用下式表示：                           Pi为气相中组分i的摩尔分数; χi为样品中组分i的摩尔分数; γi为组分i的活度系数。                       当系统平衡时：                          通过顶空分析，可确定试样中的含量

155 十二、残留溶剂测定法 （1）除另有规定外，顶空条件的选择：
A. 应根据供试品中残留溶剂的沸点选择顶空平衡温度。对沸点较高的残留溶剂，通常选择较高的平衡温度；但此时应兼顾供试品的热分解特性，尽量避免供试品产生的挥发性热分解产物对测定的干扰。 B. 顶空平衡时间一般为30~45 分钟，以保证供试品溶液的气-液两相有足够的时间达到平衡。顶空时间通常不宜过长，如超过 60 分钟，可能引起顶空瓶的气密性变差,导致定量准确性的降低。 C. 对照品溶液与供试品溶液必须使用相同的顶空条件。 (2) 定量方法的验证 当采用顶空进样时，供试品与对照品处于不完全相同的基质中，故应考虑气液平衡过程中的基质效应（供试品溶液与对照品溶液组成差异对顶空气-液平衡的影响） 。由于标准加入法可以消除供试品溶液基质与对照品溶液基质不同所致的基质效应的影响，故通常采用标准加入法验证定量方法的准确性；当标准加入法与其它定量方法的结果不一致时，应以标准加入法的结果为准。

156 小 结 掌握氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等检查方法的原理、讨论，熟悉操作
小 结 掌握氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等检查方法的原理、讨论，熟悉操作 熟悉干燥失重、水分测定、炽灼残渣、易碳化物、溶液颜色、澄清度检查法的检查意义及原理

157 第四节 特殊杂质检查 特殊杂质的检查法 一、物理法 二、化学法 三、色谱法 四、光谱法

158 臭味及挥发性差异 颜色差异 溶解行为差异 旋光性质的差异 物 理 法

159 物 理 法 (一) 嗅味及挥发性差异 1. 杂质有特殊气味： 例：乙醇中的杂醇油（异臭） 2. 杂质无挥发性
利用药物在室温或加热挥发后,遗留残渣于一定温度加热至恒重,其重量不得超过规定。 例：乙醇中不挥发物的检查。 麻醉乙醚中检查异臭杂质

160 物 理 法 (二) 颜色差异 药物自身无色 生产中引入有色的有关物质或分解产物. 例：磺胺嘧啶原料药颜色检查
——磺胺苯环上胺基被氧化生成有色偶氮苯化合物。

161 物 理 法 (三) 溶解行为的差异 根据药物与杂质溶解度的差异 葡萄糖中糊精检查（醇中不溶物） 苯巴比妥钠中检查游离苯巴比妥
用作注射剂的原料药物溶液的澄清度检查等

162 物 理 法 (四) 旋光性质的差异 1. 药物有旋光度而杂质没有 2. 杂质有旋光度而药物没有
例:黄体酮在乙醇中[α]+186 °~ +198 ° 2. 杂质有旋光度而药物没有 例:硫酸阿托品中莨菪碱的检查,供试品水溶液50mg/mL不得过-0.4 °

163 供试品与含亚硝酸钠的淀粉指示剂不得显蓝。
1. 酸碱性的差异 例：苯巴比妥中苯基丙二酰脲检查 　　　甲基橙不得显红色 化 学 法 　2. 氧化还原性的差异 　例：氯化物中碘化物检查 供试品与含亚硝酸钠的淀粉指示剂不得显蓝。 Cl－的氧化电位高(1.35)不能被氧化为Cl2 I-的氧化电位低(0.53)能被氧化为I2

164 化 学 法 3. 杂质与一定试剂反应产生沉淀 4. 杂质与一定试剂反应产生颜色 Aspirin中游离水杨酸的测定
3. 杂质与一定试剂反应产生沉淀　 氯化钠中检查钡盐 化 学 法 4. 杂质与一定试剂反应产生颜色 Aspirin中游离水杨酸的测定 5. 杂质与一定试剂反应产生气体 盐酸乙基吗啡中胺盐检查 6. 药物经有机破坏后检查杂质

165 Aspirin中游离水杨酸的测定 化 学 法 ×无酚羟基 检查原理： 阿司匹林 + Fe3+ 水杨酸+ Fe3+ 紫堇色（有酚羟基）
水杨酸鉴别反应

166 色 谱 法 (一) 纸色谱法 （二）薄层色谱法(TLC) (三) 高效液相色谱法(HPLC) (四) 气相色谱法(GC)

167 （一）纸色谱法 适用范围： 极性较大的药物杂质检查 检查放射性药物注射液或溶液中的放射化学杂质 色 谱 法

168 (二) 薄层色谱法 (TLC) 色 谱 法 根据药物与杂质对吸附剂的吸附或对展开剂的解析能力不同 (Rf 值的差异), 加以分离和检查。

169 1. TLC法特点 色 谱 法 本法灵敏、简便、快速； 不需特殊的设备、费用低； 分离和鉴定同步进行。

170 2. TLC法应用 1) 杂质对照品法 色 谱 法 适用于杂质已知并有杂质对照品的情况. 方法 根据杂质限量, 取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液,分别点于同一薄层板上展开,定位后进行检查。

171 2. TLC法应用 1) 杂质对照品法 药物 杂质 点样

172 2. TLC法应用 色 谱 法 2) 供试品自身稀释对照法 适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况。

173 2) 供试品自身对照法 例：氢化可的松中“其他甾体” 检查 供试液:3mg/ml 对照液:60g/ml(供试液稀释50倍)
判断:供试液的杂质斑点数≯3个, 且供试液的杂质斑点颜色≯对照液主斑点颜色。

174 2. TLC法应用 供试液自身稀释对照法 药物 杂质 点样

175 2. TLC法应用 （一） 物 理 性 质 差 异 3）杂质对照法、供试液自身稀释法并用 存在多个杂质 有杂质对照品：杂质对照品
无杂质对照品：自身稀释对照 （一） 物 理 性 质 差 异

176 ——选用质量符合规定的与供试品相同的药物作为对照品。
4)对照药物法 色 谱 法

177 色 谱 法 TLC系统适用性试验 检测灵敏度 比移值 分离效能

178 色 (三) 高效液相色谱法(HPLC) 谱 法 根据供试品与杂质的对照品保留时间相同测定各杂质峰面积。 特点 分离效能高、应用范围广，
特点 分离效能高、应用范围广， 能准确、快速、分离分析同时进行 色 谱 法

179 色 谱 法 三、特殊杂质的检查 HPLC ①内标法加校正因子法 ②外标法 ③加校正因子的主成分自身对照法 ④不加校正因子的主成分自身对照法
⑤峰面积归一化法 色 谱 法

180 三、特殊杂质的检查 （四）GC 挥发性杂质的检查 如残留溶剂 农药残留 色 谱 法

181 三、特殊杂质的检查 检查方法： ①内标法加校正因子法 ②外标法 ③峰面积归一化法 ④标准溶液加入法 色 谱 法

182 光 谱 法 (一) 紫外分光光度法 (二) 可见分光光度法 （三）原子吸收分光光度法 （四）红外分光光度法

183 紫外分光光度法 ——利用药物和待检杂质对光选择吸收性质的差异进行 光 谱 法 例: 肾上腺素中肾上腺酮的检查 肾上腺素 肾上腺酮

184 例: 肾上腺素中肾上腺酮的检查 光 谱 法

185 例: 肾上腺素中肾上腺酮的检查 方 法 规定：A310nm≯0.05 C(g/100mL)=A/ 限量计算 肾上腺酮的

186 本章小结 基本要求 掌握药物纯度、杂质及其限度的概念,杂质限度表示及计算方式, 氯化物、铁盐、重金属、砷盐等一般杂质检查原理与操作要点.
掌握药物纯度、杂质及其限度的概念,杂质限度表示及计算方式, 氯化物、铁盐、重金属、砷盐等一般杂质检查原理与操作要点. 熟悉药品与化学试剂标准的区别, 特殊杂质检查原理,薄层色谱法在药物分析中的应用. 熟悉药物杂质的来源途径. 基本要求

187 1. 药典中的杂质检查按照操作方法不同可分为下列 三种类型 、 、 。 3.药物中微量的氯化物在 酸性条件下与 反应，
三种类型 、 、 。 2.药物中存在的杂质，主要来源于两个方面，即 和 。 3.药物中微量的氯化物在 酸性条件下与 反应， 生成氯化银的胶体微粒而显白色浑浊，与一定量的 标准氯化钠溶液（浓度为 ）在相同条件下产生 的氯化银浑浊程度比较，判断供试品中氯化物是 否符合限量规定。 4.溴化钠中硫酸盐检查法如下：称取溴化钠0.5g，置50mL纳氏比色管中，加水使成约40mL，加稀盐酸2mL，加入25%氯化钡溶液5mL，用水稀释至刻度。精密吸取硫酸钾标准溶液（100μgSO42-/mL）2.0mL，依法检查，求溴化钠中的硫酸盐的限量为百分之几？

188 5. 胃复康中检查二苯羟基乙酸的方法如下：取本品0
5.胃复康中检查二苯羟基乙酸的方法如下：取本品0.5g，酸性下用乙醚提取后蒸干，残渣用无水乙醇10mL溶解后，在258nm波长处测定吸收度，不得超过0.02,求胃复康中二苯羟基乙酸的限量（以百分表示，二苯羟基乙酸在258nm波长处的 =19.7） 6.异戊巴比妥钠中重金属的检查：取本品1.0g，加水43mL溶解后，缓缓加稀盐酸3mL，随加随用强力振摇，滤过，弃取初滤液；取续滤液23mL，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL，依法检查，含重金属不得超过20ppm，求应取标准铅溶液（浓度为10μgPb2+/mL）多少mL？