实验二 细菌的培养与生化反应 【目的要求】 １．熟悉细菌培养的原理、方法，结果观察和实际用途。

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1 实验二 细菌的培养与生化反应 【目的要求】 １．熟悉细菌培养的原理、方法，结果观察和实际用途。
实验二　细菌的培养与生化反应 【目的要求】 １．熟悉细菌培养的原理、方法，结果观察和实际用途。 ２．熟悉细菌分解代谢产物及常用于鉴别细菌的生化反 应。 ３．熟悉细菌分离培养的原理、方法、结果观察和实际 意义。

2 细菌培养箱

3 液体培养基： （混浊生长、表面生长、沉淀生长） 半固体培养基：（扩散生长、沿穿刺线生长）
一．示教内容： （1）常用细菌培养基：液体培养基、半固体培养基、 固体培养基（平板和斜面） （2）常用的细菌培养法和生长现象观察： 液体培养基： （混浊生长、表面生长、沉淀生长） 半固体培养基：（扩散生长、沿穿刺线生长） 平板培养基（菌落） 固体斜面培养基（菌苔） （3）常用于鉴别细菌的生化反应试验（吲哚试验、 甲基红试验、V-P试验、柠檬酸盐利用试验、单糖发酵试验、H2S试验和尿素分解试验） 固体培养基：

4 选择培养基 厌氧培养基 鉴别培养基 增菌（营养）培养基 基础培养基

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6 培养基按照物理性状分类 液体培养基 半固体培养基 固体斜面培养基 固体平板培养基

7 Growth features of bacteria in liquid media
细菌在液体培养基中的生长情况 菌膜 对照 均匀浑浊 菌沉淀

8 Growth features of bacteria in semi-solid media
细菌在半固体培养基中的生长情况 1、3: 有动力 2: 无动力

9 Growth features of bacteria in solid plate media

10 单糖分解反应 左起1~5管分别为葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖阳性（黄色），第6管为阴性对照（紫色）

11 Indol test 吲哚试验 - + tryptophan色氨酸 indole吲哚 玫瑰吲哚
Kovac‘s reagent吲哚试剂（对二甲基氨基苯甲醛） E.coli 大肠杆菌：+ 产气杆菌：—

12 Methyl red test 甲基红试验 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 甲基红 － 葡萄糖 丙酮酸 甲基红 ＋ - +
E.aerogenes 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 甲基红 － 葡萄糖 丙酮酸 甲基红 ＋ E.coli

13 Voges-Proskauer Test VP试 验 阴性 阳性 大肠杆菌：— 产气杆菌：+

14 Citrate utilization test 枸橼酸盐利用试验
E.aerogenes 铵盐 氨 + 唯一碳源：枸橼酸盐 唯一氮源：铵盐 E.coli: 不生长 - －

15 IMViC试验(Indole Test; Methyl Red (MR) Test; Voges-Proskauer (VP) Test; Citrate Utilization Test)
大肠埃希菌 ＋　＋ － － 产气杆菌 －　－ ＋　＋

16 Urease Test 尿素酶试验 urea尿素 ammonia氨

17 H2S Production 硫化氢试验 PbS 含硫氨基酸 含硫无机化物 H2S Pb2+ （黑色） Fe2+ FeS 阳性

18 二．操作内容：细菌标本的分离培养 【材料】 1. 葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液的棉拭子 2. 普通固体琼脂平板 3. 接种环、酒精灯等 【方法】细菌标本的分离培养 — 分区划线

19 2、什么叫菌落？为什么平板划线接种可分离纯培养？
三、实验报告 1、液体、半固体、固体斜面培养基的接种方法和其上 （中） 的生长现象。 2、什么叫菌落？为什么平板划线接种可分离纯培养？ 3、细菌分离培养的方法、结果 每区分别见到的现象 菌落的特征描述