实验七 溶血性贫血 东北农业大学动物医学学院 病理生理教研室.

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1 实验七 溶血性贫血 东北农业大学动物医学学院 病理生理教研室

2 实验目的 观测溶血性贫血时某些血液学变化及机体的一般变化。

3 实验动物 白色家兔

4 主要器材及药品 兔固定台，消毒的外科手术器械； 血红蛋白计，红细胞计数计或电子血细胞计数仪，手指计数器，红细胞压积容量测定管（2个）；
离心机，清洁载玻片，血推片，小试管及试管架，显微镜； 红细胞稀释液（0.9％氯化钠溶液），0.1N盐酸，蒸馏水，2%煌焦油兰生理盐水液，瑞氏染色液。

5 实验内容和方法 实验前4天选一健康白毛家兔，观察其黏膜、呼吸、心跳、精神状态等全身状态；然后测定红细胞、血红蛋白量、红细胞压积、网织红细胞数，涂血片检查红细胞的形态及着色状态。 按10－20mg/kg体重给家兔皮下注射盐酸苯肼，连续注射二天。大约经过3-4日。动物便出现贫血变化。 实验时重复检查上述指标。 比较、分析两兔的血液学和全身一般变化。

6 红细胞计数法 准确吸取抗凝兔血至红细胞稀释管的0.5处，用棉花将管端的余血擦去，然后吸红细脆稀释液至101处，摇动1-2分钟，使管内液体充分混合，弃去第一滴，以第二滴充盈于干净的血细脆计数室内，静止2-3分钟，使红细脆沉下后，在显微镜下计数。将计数室中间的一平方毫米的大方格置于视野内，数四角和中间的五个中方格（即80个小方格）中的红细脆数。计数原则：数上不数下；数左不数右。

7 红细胞稀释管

8 血红蛋白测定（目视比色法） 用滴管滴入0.1N的HCL或1%盐酸加入沙利氏血红蛋白测定管至刻度10处。然后用血红蛋白吸管准确吸入血液到刻度20立方毫米处，擦去吸管外的余血，迅速将血液吹到测定管的盐酸内，反复吸取盐酸数次，使血液与盐酸充分混合，静止10分钟后，向测定管内逐滴加入蒸馏水或盐酸，并不断混匀比色。直至被检血液的颜色与标准管的颜色相同为止，读取测定管内液面所指的克数或百分数。

9 沙利氏血红蛋白测定管

10 血液涂片制作 取干净载玻片一张，一端中央滴米粒大小血液一滴，制成推片。自然干燥后，加瑞氏染色液一滴，染色1-2分钟左右，切勿使干燥。再加等量PBS（PH7.2）。混匀，继续染15-20分钟。水洗，滤纸吸干，然后油镜检查。

11 网织红细胞测定（试管法） 取小试管一支，加煌焦油兰生理盐水溶液1-2滴，加血液2-4滴，摇匀，放置15分钟后，取少许滴于清洁玻片上，涂片，干后直接用油镜检查。计数1000个红细脆中含有的网织红细脆数，求网织红细脆的百分数。

12 MCV、MCH、MCHC计算