第17章 螺旋体 spirochete 病原教研室.

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1 第17章 螺旋体 spirochete 病原教研室

2 教学目的 掌握 熟悉 了解 钩端螺旋体 梅毒螺旋体的致病性 -疏螺旋体的传播媒介及所致疾病 -雅司螺旋体 奋森螺旋体的分布与致病性
掌握内容：钩端螺旋体主要生物学性状；致病性（传染方式、致病物质、所致疾病）及微生物学检查法。梅毒螺旋体形态结构、培养特性及抵抗力；致病因素及所致疾病；微生物学检查法。对人有致病性的疏螺旋体（伯氏疏螺旋体、回归热疏螺旋体）的种类、传播媒介及所致疾病。 熟悉内容：螺旋体的特点及分类;回归热螺旋体致病机制。 了解内容：雅司螺旋体的致病性；奋森螺旋体的分布与致病性。

3 螺旋体(spirochete) 一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼 的原核细胞型微生物

4 螺菌：僵硬的螺旋形微生物，长度 3-6um 螺旋体：细长、柔软弯曲成数个螺旋长度6-20um

5 致病螺旋体的分类 对人和动物致病 钩端螺旋体属 问号钩体 密螺旋体属 梅毒、雅司、品他螺旋体 疏螺旋体属 伯氏、回归热、奋森疏螺旋体

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7 致病螺旋体的螺旋特点 名称 螺旋数 螺旋特点 举例 密螺旋体 8~14 规则，细密 苍白密螺旋体 两端尖直 苍白亚种
名称 螺旋数 螺旋特点 举例 密螺旋体 8~ 规则，细密 两端尖直 苍白密螺旋体 苍白亚种 疏螺旋体 3~ 不规则 回归热疏螺旋体 伯氏疏螺旋体 钩端螺旋体 数十个 规则，更细密 一端/两端呈钩状 问号状钩端螺旋体

8 第一节 钩端螺旋体属

9 钩端螺旋体属（Leptospira） -问号状钩端螺旋体（L. interrogans） -双曲钩端螺旋体（L.biflexa）

10 一、生物学性状

11 （一）形态与染色 螺旋细密、规则， ×6-12 菌体呈C S 或 8字型 G-，不易着染 Fontana 镀银染色法染成棕褐色

12 钩端螺旋体镀银染色

13 ♣ 10%兔血清 Korthof 培养基 ♣ 需氧或微需氧 （二）培养特性
28-30℃，pH ﹤6.5死亡，最高能耐 8.4 ♣ 需氧或微需氧 ♣ 在人工培养基中生长缓慢 (5-7d)半透明云雾状生长

14 （三）抗原构造与分类 属特异性抗原：糖蛋白 群特异性抗原：脂多糖 型特异性抗原:多糖蛋白复合物 25群 273型 我国 19群 74型

15 ♣在湿土或水中可存活数月 ♣对热抵抗力弱， 60℃ 1分 ♣对青霉素、四环素敏感 （四）抵抗力
♣ 0.5%来苏、1%漂白粉、0.1%石炭酸10-30min ♣对青霉素、四环素敏感

16 二、致病性与免疫性

17 破坏红细胞膜而溶血 3.细胞毒性因子(CTF) 注射小鼠，肌肉痉挛、呼吸困难而死亡 4.细胞致病作用 （一）致病物质
1.内毒素样物质(ELS) 2.溶血素 破坏红细胞膜而溶血 3.细胞毒性因子(CTF) 注射小鼠，肌肉痉挛、呼吸困难而死亡 4.细胞致病作用

18 鼠类与猪 ♦人与污染水或土壤接触 （二）所致疾病 钩端螺旋体病 储存宿主、传染源 ♦黏膜或皮肤侵入 ♦消化道黏膜（污染食物/饮水）
传播途径 ♦人与污染水或土壤接触 ♦黏膜或皮肤侵入 ♦消化道黏膜（污染食物/饮水） ♦胎盘垂直传播 ♦吸血昆虫

19 季节性 : 夏秋, 洪水型—猪，稻田型—鼠 地区性：三多－鼠、猪、水 职业性：农民、矿工、饲养员
鼠 猪 隐性感染 肾小管繁殖 持续随尿排出 污染水源土壤 人接触感染 流行特点 季节性 : 夏秋, 洪水型—猪，稻田型—鼠 地区性：三多－鼠、猪、水 职业性：农民、矿工、饲养员

20 致病性 临床特点 起病急，高热、乏力、全身酸痛、结膜充血
钩体 钩体血症 损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、肾、肺心及中枢神经 休克DIC 黄疸、出血心肾功能不全、脑膜炎 临床特点 起病急，高热、乏力、全身酸痛、结膜充血 腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大 三大症状：寒热、身痛、一身乏 三大体征：眼红、腿疼、淋巴大

21 免疫性 病后获得对同型钩体的持久免疫力 体液免疫为主

22 三、病原生物学检查

23 （一）查病原 血液(1w内)；尿液(2w后)；脑脊液 1.直接镜检：离心弃上清去沉淀 2.分离与鉴定 标本—Korthof--30℃-2周-培养液轻度混浊- 暗视野显微镜-动力-诊断血清 —鉴定— 血清群和血清型

24 3.动物试验 敏感(杂菌污染的标本) （二）血清学诊断 幼龄豚鼠或金地鼠 4.核酸检测 1.显微镜凝集试验
标准株或当地流行株(抗原)+病人不同稀释度 血清--37℃2 h--暗视野显微镜---凝集成小蜘蛛状 效价≥1:300 ≥4倍以上增高有诊断意义

25 2.间接凝集试验 钩体+乳胶(活性炭)-颗粒性抗原 + 病人血清--凝集

26 四、防治

27 防鼠 灭鼠 加强对带菌家畜的管理 接种 多价钩体死疫苗 外膜疫苗 治疗： 青霉素 庆大霉素 强力霉素

28 第二节 密螺旋体属

29 ♦苍白亚种(subsp. pallidum)： 梅毒螺旋体--人类梅毒 ♦地方亚种（subsp. endemicum）：
密螺旋体分类 －苍白密螺旋体（T. pallidum） ♦苍白亚种(subsp. pallidum)： 梅毒螺旋体--人类梅毒 ♦地方亚种（subsp. endemicum）： 非性传播梅毒（污染餐具传播） ♦极细亚种（subs. perternue）： 雅司病（皮肤损伤受染） －品他密螺旋体（T. carateum） ♦引起人类品他病

30 梅毒螺旋体

31 一、生物学性状

32 （一）形态染色 8-14个致密而规则的螺旋 6-20*0.1-0.2 两端尖直 常用Fontana镀银染色 菌体染成棕褐色且变粗
外膜 轴丝 圆柱形菌体 菌体表面有荚膜样物质

33 （三）抗原性 1.螺旋体表面特异性抗原 （二）培养特性 微需氧（1%-4%O2) 无生命培养基中不生长繁殖
棉尾兔单层上皮细胞在微氧环境下只能维持数代 （三）抗原性 1.螺旋体表面特异性抗原 2.螺旋体内类属抗原 3.螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原

34 （四）抵抗力 -抵抗力极弱 -4℃3天死亡 -50℃5分钟死亡 常用化学消毒剂敏感 对青霉素、四环素、红霉素及砷制剂敏感

35 二、致病性与免疫性

36 酸性粘多糖---抗吞噬作用 2.透明质酸酶 3.黏多糖酶 4.免疫病理损伤 （一）致病因素 1.荚膜样物质
分解黏多糖-组织损伤-血管塌陷-官腔闭合性 动脉内膜炎、动脉周围炎、坏死溃疡 4.免疫病理损伤

37 传播途径 性传播 垂直传播 血液传播

38 （二）所致疾病：据感染方式 1.先天性梅毒 ---- 胎传梅毒
流产、早产或死胎；先天畸形，出生后-梅毒儿锯齿形牙、间质性角膜炎、神经性耳聋等

39 2.后天性梅毒：分三期 I期梅毒： 外生殖器--无痛性、直径约1cm 硬性下疳--大量梅毒螺旋体— 传染性极强 4-8周-下疳自然愈合
2-3个月无症状潜伏期-第二期

40 全身皮肤黏膜--梅毒疹--周身淋巴结肿大 不治疗-3w-3个月-症状自然消退而痊愈 2-4年--激活--第三期 早期梅毒 感染性强 破坏性小
II期梅毒： 全身皮肤黏膜--梅毒疹--周身淋巴结肿大 不治疗-3w-3个月-症状自然消退而痊愈 2-4年--激活--第三期 早期梅毒 感染性强 破坏性小

41 III期（晚期）梅毒： 感染--2年（10-15年）--内脏器官或组织— 感染性小 破坏性大 慢性肉芽肿--心血管及中枢神经系统病变—
梅毒瘤、动脉瘤、脊髓痨 全身麻痹 感染性小 破坏性大

42 （三）免疫性 1.细胞免疫 2.传染性免疫： 3.产生两类抗体 ♦特异性制动抗体 ♦反应素：非特异性抗体 用于血清学诊断

43 三、病原生物学检查

44 暗视野显微镜---动力 形态 标本采集 Ⅰ期梅毒：硬下疳渗出液 Ⅱ期梅毒:梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液 （一）病原学检查
暗视野显微镜---动力 形态 Fontana镀银染色

45 （二）血清学诊断 非梅毒螺旋体抗原试验： 测非特异性抗体 抗原（正常牛心脂质）→血清中反应素（抗脂质抗体）

46 1.VDRL（veneral disease research laboratory）试验和RPR（rapid plasma reagin, 改良的VDRL）试验
梅毒患者的初筛 I期梅毒阳性率约70％ II期梅毒可达100％ III期梅毒阳性率低

47 Nichols株梅毒螺旋体或重组蛋白--抗原 ---病人血清--抗体 3.荧光密螺旋体抗体吸收试验（fluorescent
2.螺旋体抗原试验 Nichols株梅毒螺旋体或重组蛋白--抗原 ---病人血清--抗体 3.荧光密螺旋体抗体吸收试验（fluorescent treponemal antibody-absorption, FTA-ABS） 4.梅毒螺旋体制动试验 5.梅毒螺旋体血凝试验（treponema pallidum hemagglutination assay, TPHA） 6.ELISA

48 四、防治

49 预防：加强性卫生教育和严格社会管理 治疗：青霉素 治疗原则：早期 足量 正规 血清抗体转阴

50 第三节 疏螺旋体

51 对人致病的 伯氏疏螺旋体 回归热螺旋体 奋森螺旋体

52 一、伯氏疏螺旋体

53 莱姆病 1977年--美国莱姆镇发现 硬蜱及患者体内--分离 1985年--黑龙江省林区--莱姆病 1988年--病人血液---病原体

54 一、生物学性状

55 （一）形态染色 螺旋稀疏 两端稍尖 运动活泼 Giemsa或Wright 染色均佳 革兰染色 Wright染色

56 （二）培养特性 BSK培养 微需氧 h/代 （三）分类 10个不同基因种

57 二、致病性与免疫性

58 （一）致病性 ♥吸附--胶原纤维相关--核心蛋白多糖 ♥整合素 锚定蛋白 粘多糖结合 ♥脂蛋白--激活多种细胞--炎症反应

59 （二）所致疾病 莱姆病---人畜共患病 储存宿主：鼠类和鹿 传播媒介：硬蜱 性红斑—2-3周--皮损消退-斑痕色素沉着
3-30天--潜伏期--叮咬部位--慢性移行 性红斑—2-3周--皮损消退-斑痕色素沉着 早期: 乏力、头痛、发热、颈硬及关节炎 晚期: 慢性关节炎、神经系统与皮肤异常、 心内膜炎等

60 慢性移行性红斑

61 三、病原生物学检查

62 1.ELISA 特异 敏感 -- 多数实验室采用 特异性 IgM IgG 2.IFA 3.PCR

63 四、防治

64 加强个人防护 避免硬蜱叮咬 灭活疫苗于1992年获准在美国家犬中使用 人用重组蛋白疫苗正在临床试验中 早期:四环素、强力霉素、羟氨苄青霉素 红霉素等 晚期:青霉素联合头孢三嗪等静脉滴注

65 二、回归热疏螺旋体

66 回归热 分为两类： 虱传回归热--回归热疏螺旋体 蜱传回归热---又称地方性回归热

67 致病性 一周--潜伏期--血液--菌血症型--发热--肝脾肿大--出现黄疽--一周--退热--血中螺旋体--消失--隔一周或数日--发热--血--螺旋体 如此反复发作与缓解可达3-10次 故称回归热

68 微生物学检查 Wright染色 发热期--外周血1滴- 暗视野显微镜--螺旋 运动活泼--红细胞直径 的2-4倍--螺旋稀疏不
规则--呈波状 Wright染色

69 三、奋森螺旋体

70 与梭形梭杆菌寄居于人类口腔牙龈部 机体免疫功能下降--大量繁殖--协同--奋森咽峡炎、牙龈炎、口腔坏疽等

71 镀银染色法染色原理 AgNO3 + NH4OH→AgOH↓+ NH4NO3 AgOH+X（菌体中嘌呤） ↓ AgX 嘌呤银盐，棕褐色

72 思考题 1、对人致病的螺旋体有哪些? 2、简述钩端螺旋体的致病性？ 3、简述梅毒螺旋体的致病性？