Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University

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1 Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University
医学微生物学 Medical Microbiology 病原生物学教研室 Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University

2 虫媒病毒（Arbovirus） 由节肢动物传播 (arthropod borne arboviruses) 为RNA病毒 非分类学概念

3 虫媒病毒 黄病毒科（Flaviviridae） 单正链RNA，有包膜，二十面立体对称 披膜病毒科（Togoviridae）
乙型脑炎病毒、登革病毒、黄热病病毒、森林脑炎病毒 披膜病毒科（Togoviridae） 东方马脑炎病毒、西方马脑炎病毒、 委内瑞拉马脑炎病毒 布尼亚病毒科（Bunyaviridae） 单负链RNA，有包膜，多形态 汉坦病毒、新疆出血热病毒、La Cross病毒

4 虫媒病毒 黄病毒科(黄病毒属)结构基因位于5‘端，合成聚合蛋白，在胞质内复制，内质网获得胞膜。
披膜病毒科(甲病毒属) 结构基因位于3’端，分别合成早期蛋白与晚期蛋白，细胞膜芽生获胞膜。

5 虫媒病毒的基本特性 病毒呈球形，基因组为RNA 衣壳20面对称。具包膜。 宿主广泛，节肢动物可长期储存和传播病毒
症状以发热、脑炎、出血热为主 具明显的季节性及地方性

6 Life cycle of Arbovirus
乙脑病毒、新疆出血热病毒等 登革病毒

7 虫媒病毒所致疾病 脑炎（encehpalitis） 出血热（hemorrhagic fevers ） 黄病毒科 登革病毒、黄热病病毒
黄病毒科 乙型脑炎病毒、森林脑炎病毒、 圣路易斯脑炎病毒 布尼亚病毒科 La Cross病毒 披膜病毒科 东方马脑炎病毒、西方马脑炎病 毒、委内瑞拉马脑炎病毒 出血热（hemorrhagic fevers ） 黄病毒科 登革病毒、黄热病病毒 布尼亚病毒科 汉坦病毒、新疆出血热病毒

8 脑炎相关虫媒病毒

9 乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus）

10 乙脑病毒的生物学性状 单正链RNA 有包膜 二十面立体对称 三种结构蛋白 E 镶嵌在包膜上的糖蛋白 M 位于包膜的内面 C 为衣壳蛋白
抗原性稳定,仅一个血清型

11 乙脑病毒的电镜照片

12 Japanese encephalitis virus
5’端帽结构-非编码序列-C-PrM-M-E-NS1-NS2a-NS2b-NS3-NS4a-NS4b-NS5-非编码序列-polyA-3’端 易感动物:乳鼠 细胞培养:C6/36、幼猪肾原代细胞，产生明显的细胞病变

13 致病机制 流感样综合症 带毒蚊虫叮咬 毛细血管内皮细胞及淋巴节内增殖 第一次病毒血症 少量入血 肝、脾单核巨噬细胞内增殖 第二次病毒血症
顿挫感染 突破血脑屏障 中枢神经系统广泛病变

14 流行病学 传染源及储存宿主 传播媒介 三带喙库蚊、伊蚊、按蚊 易感人群 人群对乙脑病毒普遍易感 主要传染源是家畜、家禽 猪→蚊→猪的传播环节
传染源及储存宿主  主要传染源是家畜、家禽 猪→蚊→猪的传播环节 病毒在蚊体内增殖，可终身带毒 传播媒介 三带喙库蚊、伊蚊、按蚊 易感人群 人群对乙脑病毒普遍易感 通常流行区以10岁以下的儿童发病较多 病后免疫力强而持久，罕有二次发病者

15 乙型脑炎的流行特征 乙脑仅分布在亚洲 80～90%的病例都集中在7、8、9三个月内
华南地区6～7月，华北地区7～8月，东北地区8～9月，均与蚊虫密度曲线相一致 乙脑呈高度散发性

16 临床特点 有高热或超高热,深昏迷并有反复强烈抽搐,可在短期内因中 轻型 中型 体温常在40℃左右,有意识障碍如昏睡或浅昏迷，偶有抽搐 重型
体温通常在38～39℃, 患者神志始终清晰，有不同程度嗜睡， 一般无抽搐，脑膜刺激不明显,多在一周内恢复 中型 体温常在40℃左右,有意识障碍如昏睡或浅昏迷，偶有抽搐 病程约为10天 重型 体温在40℃以上，神志昏迷，持续性抽搐,可出现呼吸衰竭, 恢复期常有不同程度的精神异常及瘫痪表现 暴发型 有高热或超高热,深昏迷并有反复强烈抽搐,可在短期内因中 枢性呼吸衰竭而死亡,幸存者也常有严重后遗症

17 免疫性 感染后5～7天出现IgM IgG血凝抑制抗体 中和抗体 补体结合抗体（无保护作用） 免疫力稳定持久，隐性感染也可获免疫力

18 实验室检查 脑脊液检查 化脓性脑膜炎IgM明显升高，结核性脑膜炎则IgA、IgG升高显著，而病毒性脑膜炎在后期时IgG可有升高 病毒分离 尸检或以延髓穿刺取脑组织制成悬液，离心后取上清液接种乳鼠脑内或做细胞培养，可作回顾性诊断 血清学检查 特异IgM检测（4D出现，2-3W高峰）90%

19 血清学检查 ELISA法 二巯基乙醇（2ME）耐性试验 血凝抑制试验 中和试验 补体结合试验 检测血清或脑脊液中的特异性IgM抗体
由于单份血清即有辅助价值，故可对乙脑进行早期诊断 血凝抑制试验 测定IgM抗体及IgG抗体，双份血清效价增长4倍以上可确诊 单份血清抗体效价1:100为可疑，1:320可作诊断、1:640可确诊 中和试验 效价增长4倍以上可确诊。早期为IgM，后期为IgG 补体结合试验

20 乙脑的预防 灭蚊防蚊 稻田养鱼或洒药等措施控制稻田蚊虫孽生；在畜圈内喷洒杀虫剂 人群免疫 灭活疫苗和减毒活疫苗
对象主要为流行区6个月以上10岁以下的儿童 在流行前1个月开始，间隔7～10天复种1次，以后每年加强注射一次

21 森林脑炎病毒 生物学性状与乙脑病毒相似 蜱是传播媒介也是储存宿主 在我国东北和西北林区曾有流行 林区工作者应接种疫苗 病后免疫力持久

22 出血热相关虫媒病毒 出血热（hemorrhagic fevers ） 黄病毒科 登革病毒、黄热病病毒 布尼亚病毒科 汉坦病毒、新疆出血热病毒

23 登革病毒（dengue virus） 登革病毒(Dengue virus)感染引起登革热
该病流行于热带、亚热带地区，特别是东南亚、西太平洋及中南美洲 我国于1978年在广东佛山首次发现本病，以后在海南岛及广西等地均有发现

24 生物学性状 病毒颗粒呈哑铃状（700×20--40nm）、棒状或球形（直径为20--50nm） 单正链RNA
基因编码序列：5‘端帽结构-非编码序列-AUG-C-M-E-NS1-NS2a-NS2b-NS3-NS4a-NS4b-NS5-非编码序列 外层为两种糖蛋白组成的包膜，包膜含有型和群特异性抗原，4个血清型 E是主要包膜蛋白，M增强病毒的感染性 登革病毒对寒冷的低抗力强，-70℃可存活8年之久不耐热，不耐酸、不耐醚

25 致病机制 单核细胞、巨噬细胞、网状内皮系统增殖 病毒血症 带毒蚊虫叮咬 靶细胞为单核-巨噬细胞　 登革热 登革出血热／休克综合症

26 发病原理的三种假说 病毒株的毒力不同 病毒变异 认为病毒基因变异后导致毒力增强 二次感染学说 Ⅱ型病毒引起登革出血热，其他型病毒引起登革热
有人报告55例登革出血热患者，其中51例均为二次感染 抗体依赖促病毒感染作用（ADE）

27 流行病学 传染源 传播媒介 伊蚊 患者和隐性感染者为主要传染源 轻型患者数量为典型患者的10倍，隐性感染者为人群的1/3
丛林山区的猴子和城市中某些家畜可感染登革病毒 传播媒介 伊蚊 病毒在蚊体内复制，传染期长者可达174日 是病毒的储存宿主

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29 流行特征 地方性 季节性 突然性 传播迅速 凡有伊蚊孳生的自然条件及人口密度高的地区 城镇的发病率高于农村 发病季节与伊蚊密度、雨量相关
广东、广西为5～10月，海南省3～10月 突然性 流行多突然发生 传播迅速 1978年5月广东省佛山市石湾镇，1980年3月海南省流行

30 临床表现 登革热 登革出血热 登革休克综合征 在病程中或退热后，病情突然加重 潜伏期5～8天，按世界卫生组织标准分为 （轻型、典型、重型）
发热 骨、关节疼痛 皮疹 出血 全身中毒样症状 （轻型、典型、重型） 登革出血热 开始表现为典型登革热，出血倾向严重 常有两个以上器官大量出血，出血量大于100ml 登革休克综合征 在病程中或退热后，病情突然加重 有明显出血倾向伴周围循环衰竭

31 登革出血热（Dengue hemorrhagic fever ）
黑斑蚊 皮下出血 胰腺组织切片

32 实验室检查 病毒分离 血清学检查 急性期患者血清 白纹伊蚊胸内（白纹伊蚊细胞株C6/36）（1~3D） 小白鼠脑内、猴肾细胞株
单份血清补体结合试验效价超过1：32 红细胞凝集抑制试验效价超过1：1280者有诊断意义 双份血清恢复期抗体效价比急性期高4倍以上者可以确诊 ELISA法及斑点免疫测定法检测IgM（５D80%、6~10D 99%）

33 预防 预防措施的重点在于防蚊和灭蚊

34 汉坦病毒（hantavirus） 肾综合征出血热（HFRS）及汉坦病毒肺综合征（HPS）的病原 由鼠类等传播的自然疫源性急性病毒性传染病
首先由韩国李镐汪等在1978年从该国疫区捕获的黑线姬鼠肺组织中分离出，并根据分离地点称为汉滩病毒

35 生物学性状 有包膜，包膜上有刺突 单负链RNA，分为L、M、S三节段 大小不同，但3′末端相同 四种病毒蛋白
G1 G2 聚合酶 N 有包膜，包膜上有刺突 单负链RNA，分为L、M、S三节段 大小不同，但3′末端相同 四种病毒蛋白 RNA多聚酶 糖蛋白G1、G2 核衣壳蛋白（N） pH5.6～6.4时可凝集鹅红细胞

36 其它生物学特性 培养特性 病毒型别 抵抗力 对酸（pH3）和丙酮、氯仿、乙醚等脂溶剂敏感 可在人肺传代细胞（A549）等中增殖
不引起明显的细胞病变 在感染细胞细胞质内形成包涵体 病毒型别 据基因序列和抗原性可分为14个型别 我国流行的是汉坦病毒和汉城病毒 抵抗力 对酸（pH3）和丙酮、氯仿、乙醚等脂溶剂敏感 60℃60分钟可灭活病毒

37 传播途径 黑线姬鼠和褐家鼠是我国各疫区HFRS病毒的主要宿主动物和传染源 可能的途径有3类5种 动物源性传播（呼吸道、消化道 、 伤口）
虫媒传播（厉螨） 垂直传播

38 流行特点 疫源地遍及世界五大洲 我国是HFRS疫情最严重的国家 本世纪30年代首先在黑龙江省孙吴县发现此病
80年代中期以来，年发病人数超过10万，病死率为3～5%，有的地区高达10% 分地区性和季节性

39 肾综合征出血热（HFRS） 潜伏期一般为两周左右，起病急，发展快 典型病例具有三大主症，即发热、出血和肾脏损害
病程分为发热期、低血压休克期、少尿期、多尿期和恢复期 HFRS的发病机理很复杂 嗜毛细血管内皮细胞及免疫细胞 病毒直接作用 、免疫病理损伤

40 免疫性 G1和G2糖蛋白刺激产生中和抗体和血凝抑制抗体（起主要作用） N蛋白刺激产生的特异性抗体 感染后抗体出现早 细胞免疫也有重要作用
1～2天即可检测出lgM抗体，第7～10天达高峰 3～4天可检测出lgG抗体，第14～20天达高峰 细胞免疫也有重要作用 免疫力牢固 lgG抗体在体内可持续存在30余年 隐性感染产生的免疫力多不能持久

41 汉坦病毒肺综合征（HPS） 汉坦病毒属的辛诺柏病毒为病原 以肺组织急性出血、坏死为主 常引起双侧肺弥散性浸润、间质水肿 严重时可导致呼吸衰竭

42 微生物学检查 病毒分离 病人急性期血液、尸检组织或感染动物的肺、肾等组织均可用于病毒分离
Vero-E6细胞分离培养，培养7～14天后，用免疫荧光染色法检查细胞内是否有病毒抗原，胞浆内出现黄绿色颗粒荧光为阳性 取检材接种易感动物来分离病毒，常用者为小白鼠乳鼠，通过腹腔或脑内接种 细胞或动物分离培养阴性者继续盲传，连续三代阴性者方能肯定为阴性

43 血清学检查 检测特异性lgM 抗体 检测特异性lgG抗体 检测血凝抑制抗体 抗体在发病后第1～2天即可检出 急性期阳性率可达95%以上
具有早期诊断价值 检测特异性lgG抗体 需检测双份血清（间隔至少一周） 抗体效价4倍升高有诊断意义 可用于血清流行病学调查 检测血凝抑制抗体 血凝抑制试验 辅助诊断和流行病学调查

44 预防与治疗 灭鼠、防鼠 注意个人防护 三类HFRS疫苗 纯化鼠脑灭活疫苗 细胞培养灭活疫苗 基因工程疫苗 病毒唑有一定疗效

45 新疆出血热病毒 属布尼亚病毒科 病毒结构、培养特性、抵抗力与汉坦病毒相似 抗原性、致病性及传播方式与汉坦病毒不同

46 新疆出血热 自然疫源疾病，主要分布于有硬蜱活动的荒漠和牧场 野生啮齿动物（牛、羊、马、骆驼等）是储存宿主
传播媒介为亚洲璃眼蜱，病毒也可经卵传递 发病有明显的季节性，每年4～5月为流行高峰 潜伏期7天左右，临床表现为发热、全身疼痛、 出血及中毒症状 病后免疫力牢固

47 埃波拉病毒（Ebola virus） 有包膜、单股负链RNA、螺旋对称 损伤血管内皮细胞 多部位出血，以胃肠道为主；可广泛组织坏死
传染性强，可经接触污染物而传播 治疗艰难，可用干扰素/康复血清