实验119 碘-淀粉比色法测定淀粉酶 董雷鸣.

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1 实验 碘-淀粉比色法测定淀粉酶 董雷鸣

2 一、概述 （一）淀粉酶的分类 α-淀粉酶（人体） β-淀粉酶（植物、微生物）

3 （二）含淀粉酶的人体组织 胰腺 唾液腺（腮腺） 胃、胆囊、输卵管、子宫、脾、空肠、回肠、骨骼肌等

4 （三）淀粉的分类 直链淀粉（糖淀粉） 支链淀粉（胶淀粉）

5 直链淀粉(糖淀粉)的结构

6 碘－淀粉包合物结构

7 支链淀粉(胶淀粉)的结构

8 葡萄糖单位 连接键 分子量 自然界中 的比例 直链 50-250个 α-1，4糖苷键 150000 10-20% 支链 个 β-1，6糖苷键 80-90%

9 二、实验 (一)原理 α-淀粉酶 淀粉 葡萄糖 + 麦芽糖 + 糊精 + 碘液 兰色包合物

10 (二)试剂 淀粉溶液（0.4g/L） 碘应用液

11 (三)操作 加入物 空白管 测定管 缓冲淀粉溶液(37℃预温) 0.5 稀释血清 — 0.1 混匀，置37℃水浴准确15min 碘应用液
蒸馏水 3.1 3.0 混匀，蒸馏水调零，波长660nm，比色。

12 (四)单位定义 100ml血清中的淀粉酶，在37℃, 15min水解淀粉5mg为1个单位。

13 （ ） (五)计算 400 = 淀粉酶（U） = ※100ml血清中的淀粉酶，在37℃,15min水解淀粉5mg为1个单位。
空白管吸光度－测定管吸光度 ×0.5 × × × 空白管吸光度 （ ） （ml） （min） （mg） ※100ml血清中的淀粉酶，在37℃,15min水解淀粉5mg为1个单位。

14 (六)参考值 血清 U 尿液 U

15 (七)临床意义 升高 ——急性胰腺炎、流行性腮腺炎； 降低 ——肝炎、肝硬化、肝癌；
——急性胆囊炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后。 降低 ——肝炎、肝硬化、肝癌； ——肾功能障碍。

16 急性胰腺炎时血、尿淀粉酶升高的不同表现 开始升高时间 高峰时间 恢复时间 血清 8-12h 12-24h 2-5d 尿液 5-7d 1-2w

17 (八)注意事项 草酸盐、枸橼酸盐、EDTA-Na2及氟化钠对淀粉酶有抑制作用，肝素无抑制作用。 唾液含高浓度淀粉酶，须防止带入。
缓冲淀粉溶液若出现浑浊或絮状物，应重新配制。

18 实验 比色法测定血清碱性磷酸酶 董雷鸣

19 一、概述 含碱性磷酸酶酶的人体组织 骨骼 肝脏 肠黏膜细胞 胎盘等

20 二、实验 (一)原理 碱性磷酸酶 磷酸苯二钠 磷酸 + 酚 + 4-氨基氨替比林 醌类化合物 铁氰化钾

21 (二)试剂 碳酸盐缓冲液(pH 10) 磷酸苯二钠底物溶液 铁氰化钾溶液 酚标准应用液

22 (三)操作(Beckman CX7全自动生化分析系统)

23 Beckman CX7的规格 检测量 900个检验结果/小时 检测项目及种类（共33项）
电解质、急诊项目、普通生化、特殊生化、免疫、蛋白、药物检测、毒品检测 检测样品种类 血清、血浆、尿液、脑脊液

24 (四)单位定义 100ml血清在37℃与底物作用15min,产生1mg酚为1个金氏单位。

25 (五)参考值 成人 金氏单位 儿童 金氏单位

26 (六)临床意义 血清ALP活力测定常为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。

27 活性升高 ——骨paget病、恶性肿瘤骨转移或肝转移、佝偻病、骨软化、骨折愈合期、成骨细胞瘤； ——胆道梗阻、甲旁亢等。 活性降低（少见） ——呆小病、磷酸酶过少症、维生素C缺乏症等。

28 (七)注意事项 底物溶液中不应有游离酚，如有酚则空白管显红色，说明磷酸苯二钠开始分解，应弃去不用。
铁氰化钾溶液应避光保存，出现蓝绿色应废弃。 加入铁氰化钾溶液后必须立即混匀，否则显色不完全。