第8章 T/B淋巴细胞 温医微免教研室 夏克栋.

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1 第8章 T/B淋巴细胞 温医微免教研室 夏克栋

2 淋巴细胞是构成机体免疫系统的主要细胞群体，其显著特征是其异质性，可分为许多表型和功能均不同的群体：T、B、NK等。

3 第一节 T淋巴细胞 T细胞是胸腺依赖性淋巴细胞的简称 发育基本过程： 骨髓多能造血干细胞→淋巴干细胞→前T细胞→ T淋巴细胞。

4 T细胞的发育过程是基因重组和膜分子变化的过程,

5 T细胞在胸腺内的发育过程-------“三步曲”：
早期阶段 早期T细胞的主要表型为CD4-和CD8-,称双阴性细胞（Double Negative cell ,DN） 第二阶段 前T细胞由双阴性分化为双阳性CD4+CD8+（ Double Positive cell,DP） 第三阶段 DP细胞经历阳性和阴性选择，发育为CD4+或CD8+的单阳性细胞(Single Positive cell,SP),即成熟T细胞。 成熟T细胞有两个基本特性: 同时具有识别抗原的受体(TCR)和自身MHC分子的受体(受MHC限制); 对自身抗原不识别,即免疫耐受.

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7 T细胞发育的阳性选择 早期胸腺细胞为CD2+CD3+CD4-CD8-，由于TCRβ基因重排和表达，继而发育成双阳性CD4+CD8+（DP）
如DP细胞的TCRαβ能与胸腺基质细胞表面的MHC-I和MHC-II类分子高亲和力结合，被选择继续发育，否则凋亡(apoptosis) 生物学意义:使T细胞获得MHC 限制性.

8 MHC-I →DP细胞表面CD8分子结合 导致CD4分子 表达关闭 CD4-CD8+细胞 MHC-II →DP细胞表面CD4分子结合 导致CD8分子 表达关闭 CD4+CD8-细胞

9 T细胞发育的阴性选择 1、胸腺内树突状细胞和巨噬细胞表达高水平的MHC-I和MHC-II类抗原，并与自身抗原形成复合物，SP细胞如能识别自身抗原肽-MHC复合物，即发生凋亡，否则继续发育成熟 2、生物学意义:通过阴性选择获得自身耐受性

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12 二、T细胞的表面标志 淋巴细胞的表面标志是指存在于细胞表面的多种膜分子，是淋巴细胞识别抗原、与其他免疫细胞相互作用以及接受微环境刺激的分子基础，也是鉴别和分离淋巴细胞的重要依据。

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14 (一）T细胞表面受体 1、TCR 为T细胞特异性识别抗原的受体 TCR-CD3复合物 2、细胞因子受体（CKR）
IL-1、2、4、5、6、7 等受体 3、其他表面受体 病毒受体：HIV包膜gp120的受体—CD4 丝裂原受体：能诱导T、B细胞增殖和分化的物质: 刀豆蛋白（ConA） 植物血凝素（PHA） 美洲商陆（PWM） 绵羊RBC受体(E受体）： CD2分子，人类T细胞表面标志 补体受体：CR1(CD35)

15 (一）T细胞表面受体 1、TCR 为T细胞特异性识别抗原的受体。TCR-CD3复合物 是T细胞抗原受体与一组CD3分子以非共价键结合而形成的复合物，是T细胞识别抗原和转导信号的主要单位。TCR可分为TCRαβ（约95%）和TCRγδ两种类型

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18 T细胞（E受体）+ 绵羊RBC---E花环：E玫瑰花形成试验

19 (二）T细胞表面抗原 ① MHC抗原： MHC-I，MHC-II ② 分化抗原： CD4（或CD8）作为协同受体
②  分化抗原： CD4（或CD8）作为协同受体 CD2、CD28、CD40L、CD45R 等，作为协 同刺激分子（黏附分子）参与T细胞抗原识别、信号转导及激活。  

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21 三、T细胞亚群及其功能 （一)T细胞分类原则 表型 ：CD4+T(Th1、Th2、Th17) CD8+T细胞 αβT
功能：免疫调节：Th和Ts T细胞 γδT 效应性T细胞： CTL/Tc、Th1、 γδT 和TDTH  

22 1、根据TCR种类：αβT、γδT细胞 αβT γδT TCR 分布 表型 识别抗原 较少多样性 极大多样性 5-15％,粘膜上皮
MHC限制 功能 αβT γδT 较少多样性 5-15％,粘膜上皮 成熟大多数CD2CD3 简单多肽、 HSP、脂类、多糖 MHC样分子 Tc（是具有原始受体的第一线防御细胞，活化后可分泌细胞因子参与免疫调节） 极大多样性 60-70％,外周淋巴组织 成熟CD2CD3CD4/CD8 8－17aa 经典MHC Th、Tc

23 2、根据T细胞是否表达CD4或CD8分类 ： CD4 + T细胞或CD8+ T细胞
TCRαβTCD4+细胞：CD2+、CD3+、CD4+、CD8- TCR识别抗原是MHCⅡ类分子限制性 TH0、Th1和Th2等 行使Tc、Ts功能 TCRαβTCD8+细胞：CD2+、CD3+、CD4-、CD8+ TCR识别抗原是MHCI类分子限制性 行使Tc、Ts功能 3、根据功能性：Th、 Ts 、Tc、TDTH 、 记忆T（Tm) 4、根据所分泌的细胞因子不同 Th细胞又分 ：Th0、Th1、Th2 、Th17 、Th9亚型

24 (二) CD4+效应（辅助）性T细胞 辅助性和效应性双重关系 1、人（鼠）Th1和Th2细胞 （1）细胞生物学特征：
1)产生细胞因子种类不同 Th1 分泌IL-2、IFN-γ和TNF-β等, Th2 分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10 2）对细胞因子的反应性不同 IFN-γ诱导Th1分化，抑制Th2增生； IL-4诱导Th2分化，与IL-13一起抑制Th1细胞功能；

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27 （2）Th1和Th2的分化和相互转换 主要因素： 1）抗原类型和浓度 2）抗原提呈细胞APC类型 3）局部微环境细胞因子作用 4）其他因素

28 （3）Th1和Th2免疫学功能 参与细胞免疫和迟发型变态反应,又称炎症性T细胞（相当于 TDTH ),对胞内菌感染作用大； Th2：
参与调节免疫球蛋白类别转换,与体液免疫有关。

29 2、Th17、Th9细胞 （1）因分泌IL-17、IL-9得名。
3、滤泡辅助性T细胞（Tfh细胞)： 相当于传统的Th细胞，向B细胞提供共刺激信号，辅助B细胞活化、增殖，产生免疫应答。

30 （三）CD4+调节（抑制）性T细胞 （Ts）
类型： 1、天然调节T细胞（natural Treg, nTreg) (1) 占外周CD4+的10%~15%，表型主要CD4+、CD25+。 （2）抑制性调节CD4+、CD8+细胞活化与增值，抑制单核细胞、DC细胞功能。 作用机制： ①直接对抗原提呈细胞产生胞毒效应； ②通过表达膜分子（LAG-3、Nrp-1、CTLA-4等）发挥作用。 2、诱导性Treg 由静息T细胞在特定微环境和细胞因子诱导下形成。包括： Tr1细胞、Th3细胞和适应性Treg细胞 CD4+抑制性T细胞作用意义： 参与免疫调节，抑制自身免疫病产生

31 (四）CD8+T细胞 1、分类： 按CD28标志分类： CD8+、CD28+T细胞------分泌IL-2
CD8+、CD28-T细胞------不分泌IL-2，表达CD11b/CD18、抑制杀伤受体CD94。 通过抑制抗原提呈细胞对辅助T细胞的活化作用，维持免疫耐受。类似于Ts。 按分泌的细胞因子分类： Tc1（分泌IL-2、IFN-γ、LT) Tc2（ 分泌IL-5、6、9、10、12） 生物学特征类似于Th细胞。

32 2、细胞毒T细胞（CTL,Tc) 多数为CD8+，少数为CD4+ CTL功能-----杀伤功能: 参与抗肿瘤、抗病毒作用
①分泌穿孔素； ②释放多种丝氨酸酯酶，通过活化穿孔素而促进杀伤作用； ③分泌淋巴毒素，直接杀伤靶细胞； ④活化的CTL高表达FasL，通过与靶细胞表面Fas抗原结合，可诱导靶细胞凋亡。 CTL杀伤靶细胞特点：受MHC-I类分子限制

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34 T细胞功能 1）免疫调节功能（Tfh、Th1、Th2、Ts） 2）特异性杀伤功能（CTL、γδT）
CD4+T细胞 和CD8+T细胞有相互交叉功能

35 是由哺乳动物骨髓或鸟类法氏囊中淋巴样前体细胞分化成熟而来
第二节 B淋巴细胞 是由哺乳动物骨髓或鸟类法氏囊中淋巴样前体细胞分化成熟而来

36 一、B细胞的个体发育 起源： 胎儿期—胎肝和骨髓 出生后—骨髓 两阶段: 骨髓内成熟(抗原非依赖期) 骨髓外成熟(抗原依赖期)

37 B细胞在骨髓内的分化发育过程 多能干细胞 (HSC) 淋巴干细胞 pro- B细胞（祖B细胞） SCF等 pre-B细胞（前B细胞）
IL－7、 IL-4等 不成熟B细胞 成熟B细胞 祖B细胞（pro B cells） 前B细胞（pre B cells） 未成熟B细胞（immature B cells） 成熟B细胞（mature B cells） B细胞的分化过程实质上是基因重组和膜分子变化的过程

38 是否发育成熟，关键是有无形成抗原受体（BCR）？

39 BCR基因结构及重排 1、BCR的胚系基因结构 κ链基因-- 2号染色体 λ链基因-- 22号染色体 H链基因-- 14号染色体
轻链基因分为V、J、C三组基因片段 重链基因分为V、D、J、C四组基因片段

40 特点：各基因被分隔开形式存在，不能编码完整的Ig（BCR）

41 2、BCR的基因重排机制 B细胞成熟过程中，Ig基因片段经重排后方能表达为功能性的Ig 重链基因重排 轻链基因重排 等位排斥和同种型排斥

42 Splicing of IgM and IgD RNA
Cg1 Cg3 Cd Cm V D J Cm1 Cm2 Cm3 Cm4 Cd1 Cd2 Cd3 DNA pA1 pA2 V D J Two types of mRNA can be made simultaneously in the cell by differential usage of alternative polyadenylation sites and splicing of the RNA V D J Cm IgM mRNA Cm1 Cm2 Cm3 Cm4 Cd1 Cd2 Cd3 V D J RNA cleaved and polyadenylated at pA1 AAA AAA RNA cleaved and polyadenylated at pA2 V D J Cd IgD mRNA Cm1 Cm2 Cm3 Cm4 Cd1 Cd2 Cd3 pA1 V D J

43 等位排斥 同种型排斥 Ig 基因重排时，一对同源染色体上的两个等位基因中只有一个能表达 使得一个B细胞只能表达一种轻链和一种重链
机制：一种表达成功即抑制另一种表达

44 未成熟B细胞(immature-B)（轻链基因重排、阴性选择）
分期 重链 轻链 表面标志 祖B细胞(pro-B) （重链基因重排） 前B细胞(pre-B) （轻链基因重排） μ Pre-BCR 未成熟B细胞(immature-B)（轻链基因重排、阴性选择） κ或λ ｍIgM 成熟B细胞(mature-B) μ+δ ｍIgD

45 B细胞在骨髓发育过程中免疫耐受形成机制 BCR重排 与自身抗原结合弱 前B 阴性选择 成熟B 与自身抗原高亲和结合 淋巴干 细胞 外周
在B细胞发育过程中，可能出现针对自身抗原的B细胞克隆。机体通过阴性选择过程清除具有自身反应性的B细胞克隆，实现自身耐受。

46 二、B细胞的表面标志 （一）表面受体 1、抗原受体（BCR）BCR-CD79α/β复合物
----SmIg IgM 、 IgD 单体形式存在于细胞膜 B细胞共受体——CD19/CD21/CD81信号复合物 协同刺激分子——CD80/CD86、CD40 2、细胞因子受体（CKR）使B细胞活化、增殖 3、补体受体（CR）：CR1（CD35）是C3b受体，CR2（CD21）也是EB病毒受体。 4、IgGFc段受体（FcR） 5、丝裂原受体 LPS、SPA、PWM

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48 B细胞抗原受体复合体 （BCR-CD79α/β复合物） Igα/Igβ BCR B细胞特异性表面标志 B细胞抗原受体，特异性识别Ag
膜表面免疫球蛋白（mIgM、mIgD） 胞外区 跨膜区 胞内区 Igα/Igβ 异源二聚体，胞内段含ITAM 转导B细胞活化的第一信号

49 Transduction of signals by the B cell receptor
Extracellular antigen recognition domains ITAMS Iga Igb Intracytoplasmic signalling domains （免疫受体酪氨酸活化基序）

50 BCR共受体 CD19/CD21/CD81信号复合物

51 协同刺激分子——CD80/CD86、CD40 CD40 B细胞及其它APC表面 CD40/CD40L结合为B细胞提供协同刺激信号
B7-1 (CD80) 、B7-2 (CD86) B7-CD28 ，为T细胞活化提供协同刺激信号 B7-CTLA-4 黏附分子：ICAM-1、LFA-1

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53 （二）表面抗原 ①     MHC抗原：MHC-I，MHC-II ②     分化抗原：CD19、CD21、CD40、 CD80 CD19为所有B细胞共有

54 三、B细胞亚群及功能 按是否表达CD5分子，分为B1细胞和B2细胞 B1：早期B细胞 CD5+，参与固有免疫应答。
多为低亲和力的IgM、IgA和IgG3， 能清除变性的自身抗原，维护自身稳定。 B2：即成熟的B细胞 CD5-; 参与特异性免疫应答。 产生高亲和力抗体，行使体液免疫功能。

55 B-1细胞与B-2细胞的异同 性质 B-1细胞 B-2细胞 产生时间 胎儿期 出生后 更新方式 自我更新 骨髓产生 自发性Ig产生 高 低
特异性 分泌的Ig类型 IgM为主 IgG为主 体细胞突变频率 低/无 对TI抗原的应答 是 可能 对TD抗原的应答

56 B淋巴细胞的功能 产生抗体 提呈抗原 免疫调节

57 本章要点 T细胞发育基本过程、表面分子（抗原、受体） T细胞在胸腺内发育过程及其结果 何谓T细胞发育过程的阴性选择和阳性选择？
B细胞发育基本过程 B细胞表面分子（抗原、受体）

58 休息吧