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实验二 尿蛋白定性检查
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一、磺基水杨酸法 【目的】 掌握尿蛋白定性磺基水杨酸法。
【目的】 掌握尿蛋白定性磺基水杨酸法。 【原理】 生物碱试剂磺基水杨酸，在酸性条件下，其磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不溶性蛋白盐沉淀。
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【操作】 1．调pH 2．加尿液 3．加试剂 4．判断结果
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【注意事项】 1 .标本:①如果尿液呈现明显的混浊，应先离心或过滤。②当获知患者应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂时，应告知结果可能产生假阳性。③指导患者正确采集中段尿，避免混有生殖系统分泌物。 2. 调pH 本法在尿液偏碱或偏酸时（pH＞9 ，pH＜3）可呈假阴性，因此检测前可先测试尿pH，必要时用稀NaOH或5%醋酸进行调节。 3．掌握好结果判断时间。如果通过镜检发现阳性是由于混有生殖系统分泌物造成的，有可能是假阳性，可用离心后上清液再检测进行验证。对于微弱阳性的判断，可选用黑色衬纸作背景，以提高分辨力。 4．本法灵敏度高，为0.05～0.10g/L。
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二、加热乙酸法 【目的】 掌握尿蛋白定性加热乙酸法。
【目的】 掌握尿蛋白定性加热乙酸法。 【原理】 蛋白质遇热变性，加稀乙酸使尿液pH减低并接近蛋白质等电点（pH 4.7），使得变性凝固的蛋白质进一步沉淀。同时，稀乙酸还可消除因加热引起的磷酸盐或碳酸盐析出所造成的浑浊。
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【操作】 1．加尿液 2．加热 3．加酸 4．再加热 5．判断结果
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【注意事项】 1．标本要新鲜，陈旧尿液因大量细菌生长或引起假阳性。尿液呈现明显的混浊，应先离心或过滤。正确采集中段尿，避免混有生殖系统分泌物。对于限盐或无盐饮食的患者，由于离子强度太低，需在尿液标本中滴加饱和氯化钠溶液l～2滴后再进行检测。 2．加入的乙酸量要适当，约为尿量的1/10。 3．操作一定要遵循加热→加酸→再加热的程序。 4．加热后立即直立试管观察结果。试管中上l/3段尿液进行加热为检测区，下段尿液未加热作为对照区。 5．本法灵敏度为150mg/L，是最经典、最准确的方法，但操作略显繁琐，常作为蛋白定性的确证试验。
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