微生物学实验G 肠道杆菌 病毒的血清学实验 讲解肠道细菌的鉴定程序 组织实验考试.

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1 微生物学实验G 肠道杆菌 病毒的血清学实验 讲解肠道细菌的鉴定程序 组织实验考试

2 肠道杆菌 肠道鉴别培养基(SS 平板) 粪便或肛拭子 挑取致病性菌落(根据大小、颜色、透明度) 克氏双糖管鉴别致病性 生化分析鉴定
玻片凝集(血清学特异性诊断)

3 观察肠道杆菌标本片及在培养基上生长情况 大肠杆菌 痢疾杆菌 伤寒杆菌

4 SS培养基 中性红在酸性环境下呈红色，碱性环境下呈透明微黄色。大肠杆菌分解乳糖产酸，沙门菌属及志贺菌属分解蛋白质产碱。
培养基中硫代硫酸钠、枸橼酸铁及煌绿可抑制大肠杆菌生长；胆盐可促进沙门菌属及志贺菌属细菌生长。 沙门菌属/志贺菌属

5 2. 肠道杆菌的生化反应（讲解） 鉴别培养基—克氏双糖管 酸 碱 酚红
酸 碱 酚红 含乳糖、 含葡萄糖 志贺菌、沙门菌分解葡萄糖不分解乳糖，底层和斜面先变黄。但因葡萄糖含量较少，生成的少量酸因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物，故斜面部分又恢复红色。底层由于处于缺氧状态而保持黄色。 Control 大肠埃希菌同时分解两种糖，产酸产气

6 1. 糖发酵试验 酸 碱 加大肠埃希菌 加伤寒沙门菌 溴甲酚紫 葡萄糖 葡萄糖 乳糖 乳糖 葡萄糖 乳糖 产生丙酮酸使PH下降

7 2. VP试验 产气杆菌与丙酮酸生成乙酰甲基甲醇，加碱氧化成二乙酰，加入胍基生成红色化合物 加大肠埃希菌(-) 加产气杆菌(+) 碱与胍基
葡萄糖 乳糖 产气杆菌与丙酮酸生成乙酰甲基甲醇，加碱氧化成二乙酰，加入胍基生成红色化合物 碱与胍基

8 3. 甲基红试验 酸 碱 加大肠埃希菌(+) 加产气杆菌(-) 葡萄糖 乳糖 甲基红 甲基红

9 4. 枸橼酸盐利用试验 加产气杆菌(+) 加大肠埃希菌(-) 枸橼酸铵 枸橼酸铵

10 5.吲哚试验 加大肠埃希菌、变形 杆菌、霍乱弧菌(+) 加其它细菌(-) 对二甲基氨基苯甲醛 分解色氨酸生成吲哚

11 6. H2S试验 加沙门菌、变形杆菌 (+) 加其它细菌(-) 铅或铁离子 分解含硫氨基酸生成H2S

12 7.尿素酶试验 酸 碱 酚红 加变形杆菌 (+) 加其它细菌(-) 酚红 含尿素酶，分解尿素产氨

13 IMViC试验 I：吲哚试验 M：甲基红试验 Vi：VP试验 C：枸橼酸盐利用实验
常用于鉴定肠道杆菌，如大肠埃希菌 ，产气杆菌 。

14 二、病毒的血凝试验 含有血凝素的病毒可使某些动物红细胞凝集，称血凝实验。 本实验采用鸡瘟疫苗溶液来使鸡RBC凝集。

15 血凝单位：1：32 病毒的血凝试验(以小组为单位) 单位：mL 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 生理盐水
生理盐水 对照 生理盐水 弃去 50 病毒悬液 稀释倍数 1∶1 1∶2 1∶4 1∶8 1∶16 1∶32 1∶64 1∶ ∶256 1∶512 1∶ － 0.5％ 鸡红细胞 摇匀， 室温30-40 min左右观察结果 结果 ＋＋＋ ＋＋＋ ＋＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋ ＋ － － － 对照 血凝单位：1：32

16 ［结果判断］ ＋＋＋ 红细胞呈薄层铺管底，边缘略卷曲。
［结果判断］ ＋＋＋ 红细胞呈薄层铺管底，边缘略卷曲。 ＋＋ 红细胞在管底呈环状，边缘小凝块。 ＋ 红细胞在管底呈小圆点，边缘凝块明显。 － 红细胞沉管底呈小圆点。 出现 ＋＋ 凝集的最高稀释的血凝素，即含1个血凝单位。