第六章 银杏叶的利用 第六章 银杏叶的利用.

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1 第六章 银杏叶的利用 第六章 银杏叶的利用

2 第六章 银杏叶的利用

3 第六章 银杏叶的利用

4 银杏叶含有黄酮类、萜内酯类、有机酚酸类、聚异戊烯醇类、生物碱和多糖类等60余个化合物，其中主要活性物质为黄酮类化合物和萜内酯类化合物。
6.1 银杏叶的化学成分 银杏叶含有黄酮类、萜内酯类、有机酚酸类、聚异戊烯醇类、生物碱和多糖类等60余个化合物，其中主要活性物质为黄酮类化合物和萜内酯类化合物。 　　德国首先提出银杏叶提取物的质量标准： 黄酮甙≥24％， 萜内酯≥6％， 白果酚和银杏酚＜10μg/g. 第六章 银杏叶的利用 6.1 银杏叶的化学成分

5 6.1.1黄酮类化合物 黄酮类化合物约36个，分为以下四类： （1）黄酮醇类化合物
黄酮醇类化合物包括山萘酚、槲皮素、异鼠李素、丁香亭、3′－甲氧基杨梅黄素及它们的甙 、山萘酚香豆酸酯和槲皮素香豆酸酯，共有23个化合物。 黄酮醇类化合物的结构式如下： 第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

6 R1 R2 1 H 7 OH 13 OCH3 15（甙元） 16（甙元） 第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

7 R1 R2 R3 17 H 18 qlu 19 OH 20 21 第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

8 第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

9 双黄酮类化合物有6个双黄酮化合物， 其结构如下
（2）黄酮类化合物 （3）双黄酮类化合物 双黄酮类化合物有6个双黄酮化合物， 其结构如下 第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

10 R1 R2 R3 R4 27 OH 阿曼托黄素 28 OCH3 H 白果黄素 29 银杏黄素 30 异银杏黄素 31 金松黄素 32
5′-甲氧基白果黄素 第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

11 花色素类化合物有（＋）－儿茶素（33）、（—）－表儿茶素（34）、（＋）- 倍儿茶素（35）和（—）－表倍儿茶素（36）。
（4）花色素类化合物 花色素类化合物有（＋）－儿茶素（33）、（—）－表儿茶素（34）、（＋）- 倍儿茶素（35）和（—）－表倍儿茶素（36）。 银杏叶中的黄酮醇香豆酸酯，结构特殊，是治疗脑和四肢动脉血流失调而引起的一系列心脑血管病的重要有效成分。其它单、双黄酮类也有类似的治疗心脑血管疾病的作用。 第六章 银杏叶的利用

12 萜内酯类化合物有独特结构的二萜类（银杏内酯A、B、C、J和M）及倍半萜类（白果内酯），它们的结构如下：
6.1.2 萜内酯类化合物 萜内酯类化合物有独特结构的二萜类（银杏内酯A、B、C、J和M）及倍半萜类（白果内酯），它们的结构如下： 第六章 银杏叶的利用

13 白果内酯对神经疾病（精神病、脑病、脊髓等）具有治疗作用，它能确保神经元和轴突完整无缺。
银杏萜内酯A、B、C、J和M，是血小板活化因子的拮抗剂，能有效地抗血栓形成，对防治血管阻塞疗效显著，已用于临床。在已知血小板活化因子对抗剂中，银杏萜内酯B对新陈代谢有效全面的调理作用，受到当今医学家的关注，导致半合成及这类化合物细胞组织培养的研究。 白果内酯对神经疾病（精神病、脑病、脊髓等）具有治疗作用，它能确保神经元和轴突完整无缺。 第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

14 6.1.3 聚异戊烯醇类化合物 聚异戊烯醇类属于多烯醇类，分布于哺乳动物的肝脏中，能使甘露糖变成脂体，增加甘油蛋白的合成，对维持正常肝脏功能起重要作用。 银杏叶中聚戊烯醇类含量较高，总量约20％，其结构如下： 第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

15 它是一类二个反式、n个聚合顺式异戊醇（酰氧基）的化合。其化学结构和分子构型与哺乳动物体内含有的多烯醇类（dolichils）相似，前者是合成后者的理想原料。
第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

16 长链酚酸类化合物分布于银杏树的各组织中，白果中含量较高，约有6个化合物，它们的名称和结构如下：
6.1.4 长链酚酸类化合物 长链酚酸类化合物分布于银杏树的各组织中，白果中含量较高，约有6个化合物，它们的名称和结构如下： 第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

17 第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

18 此外，还有6－羟基犬尿烯酸、α、β－胡萝卜素、谷甾醇、谷甾醇－D-葡萄糖、中性多糖和酸性多糖、微量元素等。
白果酚和银杏酚为有毒物质，过多食用白果会引起中毒，长期服用银杏叶致过敏。银杏叶提取时，应除掉有毒物质，控制提取物中白果酚和银杏酚的含量＜10ug/g。 4－十一烷基儿茶酚为抗癌活性成分。 此外，还有6－羟基犬尿烯酸、α、β－胡萝卜素、谷甾醇、谷甾醇－D-葡萄糖、中性多糖和酸性多糖、微量元素等。 第六章 银杏叶的利用 6.1银杏叶的化学成分

19 6.2 银杏及其叶的采收 6.2.1 银杏 银杏（Ginkgo biloba）为落叶乔木，树干直立，高达30～40m。树皮淡灰色或灰褐色，有纵裂纹；叶扁平扇形，具长柄，上缘呈波状或有不规则浅裂，基部楔型，初叶浅绿色，夏季深绿，秋季变黄；花雌雄异株，雌花生于短枝先端，雌花球有长梗，雄花球为短柔荑花序状；种子核果状，椭圆形至近球形，熟时淡黄色或橙黄色，外、中和内种皮分别为肉质、骨质和膜质；花期3～4月，种子9～10月成熟。 第六章 银杏叶的利用 6.2 银杏及其叶的采收

20 银杏是主产我国的独特裸子植物。古银杏仅在浙江天目山、四川和湖北交界处神农架地区及河南和安徽邻接的大别山有少量野生和半野生。
我国人工栽培银杏已有3000多年历史，范围广（辽宁沈阳、广东广州、江苏、浙江、甘肃东南部、四川峨眉山、贵州和云南等），已成为世界上银杏分布中心，占世界总数的70％以上。 第六章 银杏叶的利用 6.2 银杏及其叶的采收

21 江苏干叶总贮量4万t，可采干叶贮量约为4700t。
全国银杏种子产量约625万～675万kg， 江苏为340万～380万kg， 江苏干叶总贮量4万t，可采干叶贮量约为4700t。 目前实际采取量约为1200t。 第六章 银杏叶的利用 6.2 银杏及其叶的采收

22 叶的采收以夏末至秋中期（大约10月初），叶片绿或微黄时为宜。
6.2.2 银杏叶的采收 叶的采收以夏末至秋中期（大约10月初），叶片绿或微黄时为宜。 　　　过早采，叶的水分大，易霉变，发霉叶的有效成分（尤其内酯类）显著下降； 　　　过晚采或落叶几乎全部变黄色，虽然总黄酮含量变化不大，内酯含量明显下降，药典规定叶应为黄绿色。 第六章 银杏叶的利用 6.2 银杏及其叶的采收

23 鲜叶应摊开阴干，常翻动，防止发热、变黄和生霉，手抓起能碎，塑料袋包装、贮放。大量鲜叶应用干燥设备在60℃以下干燥为宜 。
第六章 银杏叶的利用 6.2 银杏及其叶的采收

24 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取 银杏叶主要活性成分黄酮类和萜内酯类化合物含量较少，分别＜1.88％，＜0.15％（HPLC测定）。前者分子中有酚羟基、醇羟基和羰基，后者分子中羟基和羰基，两者均是极性化合物。 　　　根据“相似相溶”的规律，可采用甲醇、乙醇、丙酮及其与水的混合溶剂提取，常用乙醇、丙酮与水混合溶剂作提取剂。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

25 但是银杏叶中的花色素、长链酚酸类化合物、低分子糖类等也是极性化合物，长链酚酸是有毒物质，伴随黄酮和萜内酯类化合物被浸出，必须除去，使银杏提取物达到医药用的标准：黄酮 ≥24％，萜内酯≥6％，长链酚酸＜10μL/L。因此，银杏黄酮和萜内酯的制取方法如下： 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

26 1）预处理 用冷水洗3～5min，除去叶中杂物和泥沙，洗后沥干，使其湿重为干叶重的2倍，将叶切成约5mm×5mm，以便提净生物活性成分。
6.3.1 乙醇提取、吸附洗脱法 （1）稀乙醇提取、吸附洗脱法 1）预处理 用冷水洗3～5min，除去叶中杂物和泥沙，洗后沥干，使其湿重为干叶重的2倍，将叶切成约5mm×5mm，以便提净生物活性成分。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

27 2）提取 把切碎叶加入具有搅拌、回流的提取装置中，加入叶重的6～10倍50％～60％的乙醇，在50～60℃下提取2～3次，每次时间3～4h。
3）分离 提取液趁热过滤，室温下静置4h，滤去沉淀，滤液在真空下浓缩至原滤液体积的1/5左右，再冷至室温，经离心机（n＝4000r/min）离心约30min，得离心液。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

28 4）吸附洗脱 离心液加入大孔吸附树脂柱内，充分吸附生物活性成分，再用水、10％、20％、……、80％乙醇洗脱，收集30％～80％的乙醇洗脱液约1200ml，溶液颜色为淡黄、黄色、供浓缩。
第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

29 5）真空浓缩 洗脱液在真空60℃下浓缩回收乙醇，使其浓缩约30％。
5）真空浓缩 洗脱液在真空60℃下浓缩回收乙醇，使其浓缩约30％。 6）真空干燥 浓缩液在60℃下干燥2～3h。也可以用喷雾干燥，进口温度180℃，出口温度80℃。 提取物含黄酮 甙25％，得率 1.52％（绝干计）。 第六章 银杏叶的利用

30 阴干、粉碎叶放入提取罐中，用90％乙醇回流提取3次，每次1.5h，合并3次滤液，在真空60℃下回收乙醇，浓缩成膏状。
（2）浓乙醇提取、吸附洗脱法 1）提取 　　　 阴干、粉碎叶放入提取罐中，用90％乙醇回流提取3次，每次1.5h，合并3次滤液，在真空60℃下回收乙醇，浓缩成膏状。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

31 膏状物放入沉降槽中，加水搅拌溶解，静置沉降3h，由上而下抽取上板框压虑机过滤，滤饼重复水沉降4次。
2）水沉降分离 　　　膏状物放入沉降槽中，加水搅拌溶解，静置沉降3h，由上而下抽取上板框压虑机过滤，滤饼重复水沉降4次。 　　　水沉降加水量：第1次至第5次分别为浸膏体积的3倍、2倍、1倍、1倍、1倍。合并前两次滤液（后3次滤液供下批用），用盐酸调整pH值为3～4。若pH值＜2，黄酮受到破坏，损失增加。 第六章 银杏叶的利用

32 3）吸附洗脱 　　　　pH值3～4倍的滤液，加入AB－8型树脂柱内（树脂∶液＝1∶2，重量比），用13倍树脂重的水和7倍树脂重的25％乙醇洗脱，收集25％乙醇洗脱液浓缩、喷雾干燥成粉状产品。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

33 再生条件：用4％NaOH、3%HCI依次冷浸3天，水洗至中性，再用95％乙醇浸泡5天，水洗净乙醇备用。
　　　树脂每吸附3次再生1次。 　　　再生条件：用4％NaOH、3%HCI依次冷浸3天，水洗至中性，再用95％乙醇浸泡5天，水洗净乙醇备用。 粉状银杏提取物黄酮含量＞26％，内酯含量＞6％，产品收率1.2％～1.6％（干叶计）。 第六章 银杏叶的利用

34 6.3.2 酮类萃取法 酮类萃取法包括稀丙酮提取，丙酮－丁酮、丁醇和环已烷萃取： （1）稀丙酮提取
用7.5倍切碎干净叶重的60％丙酮，在约58℃下回流浸渍二次，每次30min，合并2次滤液，减压回收丙酮至固形物为30％～40％，丙酮含量＜5％，向其中加2倍水稀释，搅拌、冷却（12℃）、静置（1h）、离心，弃去沉淀，得上清液。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

35 （2）丁酮∶丙酮（6∶4）萃取 　上清液100份，加入30份(NH4)2SO4，再加丁酮－丙酮混合溶剂萃取2次，合并萃取液，分离得水相和有机相（Ⅰ）。 　　　　(NH4)2SO4易溶于上清液水中而成(NH4)2SO4溶液，使丁酮－丙酮与水分层而分离。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

36 上述水相加水稀释，再加丁醇萃取，得有机相（Ⅱ），弃去水相。
（3）丁醇、环已烷萃取 上述水相加水稀释，再加丁醇萃取，得有机相（Ⅱ），弃去水相。 有机相(Ⅰ)减压浓缩,回收溶剂至固形物为50%~70%，加水稀释至固形物为10%，再用丁醇萃取，弃去水相，得有机相（Ⅲ）。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

37 合并有机相（Ⅱ、Ⅲ），减压浓缩回收溶剂（乙醇），再用水和乙醇（95％）稀释至乙醇含量为50%、固形物10％，以环已烷萃取，弃去环已烷相，水相减压浓缩，60～80℃下真空干燥使水分＜5％，即为银杏提取物，其中黄酮 甙26.1％、萜内酯6.3％，长链酚＜1ug/g，得率2.2％。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

38 银杏叶粉1kg，加入12kg50％的丙酮，回流提取两次，每次4h。合并二次滤液，在真空下蒸出丙酮，浓缩至3L。
6.3.3 丙酮提取、吸附解吸法 银杏叶粉1kg，加入12kg50％的丙酮，回流提取两次，每次4h。合并二次滤液，在真空下蒸出丙酮，浓缩至3L。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

39 　　　加吸附剂（代号S）50g，搅拌吸附12h，滤出吸附剂，用300ml热丙酮解吸三次，合并丙酮液，减压浓缩至干，得干粉约12～15g，再溶于适量的30％乙醇中，低温静置12h，析出白色结晶，即是萜内酯混合物，其中萜内酯A35％、萜内酯B45％、萜内酯C12％、其它3％（HPLC测定）。 第六章 银杏叶的利用

40 常用的吸附剂有硅胶、中性氧化铝、活性炭、硅酸镁、硅藻土、聚酰胺、大孔吸附树脂。通过试验，选择适当的吸附剂，此法将是制取萜内酯的合理路线。
第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

41 本法包括稀丙酮（或乙醇）提取。丙酮－丁酮萃取、醋酸铝沉淀、正已烷、丁酮－乙醇萃取。
6.3.4 丙酮提取、醋酸铅沉淀法 本法包括稀丙酮（或乙醇）提取。丙酮－丁酮萃取、醋酸铝沉淀、正已烷、丁酮－乙醇萃取。 （1）稀丙酮提取、丁酮－丙酮萃取 与酮类萃取法相同，弃水相，得有机相。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

42 （2）醋酸铅沉淀 有机相（Ⅰ）中加入1/2/体积的水，搅拌、吸出上层有机相，减压浓缩，浓缩50％～70％，用95％乙醇稀释至含醇为50％，含干提取物10％，加入少量碱式乙酸铅水溶液，使单宁沉淀，提取液由褐色变为红棕色，以离心分离乙酸铅沉淀，得清液。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

43 （3）已烷、丁酮－乙醇萃取 向清液加入1/3体积的正已烷，萃取三次，弃去正已烷相，进一步除去长链酚类成分，得醇－水溶液。将其液在减压下浓缩至乙醇含量约5％。向100份浓缩液中加入20份(NH4)2SO4，溶解后加入浓缩液体积的1/2的丁酮－乙醇（6∶4，V/V），萃取2次，分离有机相，减压浓缩至固体物为50％～70％，减压、80℃下干燥至含水分＜5％。 第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

44 干燥提取物得率为2.5％（气干叶计）,其中总黄酮 甙约为30％、萜内酯约3.6％、白果内酯2.9％，原花色甙约6％，长链酚低于1μg/g。
第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

45 ， 20世纪80年代，欧洲就有用超临界CO2萃取银杏叶药用成分的专利；
第六章 银杏叶的利用 6.3 银杏黄酮和萜内酯的制取

46 6.4 银杏叶制剂的应用 6.4.1 银杏叶提取物的应用 德国研制EGb761主要用于治疗周围血管和大脑的血流障碍，脑功能障碍。它对记忆的基本神经元组有影响，治疗后能使老年患者的思维表现接近于年青健康人。德国生产的强力梯波宁（Tebonin forte）用于脑功能障碍，智力衰退和失眠症及其伴随的症状（眩晕、耳鸣、头痛、记忆力减退）、由于恐怖心理而引起情绪不稳定等，也用于颈椎综合症引起听力损害的治疗等。 第六章 银杏叶的利用 6.4 银杏叶制剂的应用

47 辽阳辽河制药厂研制的银杏口服液，治疗冠心病、心绞痛总有效率为90.86％，治疗缺血性中风总有效率为93.01％。
　浙江康恩贝制药公司的银杏制剂天保宁片与胶囊，治疗冠心病导致的心肌梗塞、心绞痛胸闷、心悸、气急、供血不足引起的头痛、头昏、眩晕、记忆力下降和认知功能衰退，脑梗塞及其后遗症。 　　　 辽阳辽河制药厂研制的银杏口服液，治疗冠心病、心绞痛总有效率为90.86％，治疗缺血性中风总有效率为93.01％。 　　　扬子江药业集团的银杏叶片、天津药物研究所与遵化制药厂生产的银杏口服液等。 第六章 银杏叶的利用 6.4 银杏叶制剂的应用

48 银杏叶提取物（EGb）黄酮含量≥15％，可作药物化妆品，皮肤吸收治疗剂，改善皮肤状况。
6.4.2 银杏化妆品及保健食品 银杏叶提取物（EGb）黄酮含量≥15％，可作药物化妆品，皮肤吸收治疗剂，改善皮肤状况。 　　　EGb中加入维生素E制成的化妆品，可抗皮肤氧化和脂质过氧化。 　　　EGb与皮肤吸收加速剂加工成喷雾剂、液剂、霜剂、贴剂等，可减轻皮肤刺激作用。 第六章 银杏叶的利用 6.4 银杏叶制剂的应用

49 含EGb的头发霜、生发液、洗发液、发乳、洗发香波系列产品，可提高头发与头皮功能，加速头发生长，并有治疗作用。
EGb中黄酮含量≥24％，作保健食品，可抗脂质过氧化，防止皮肤衰老，增进血液循环。含EGb的口香糖、巧克力和发酵酒，治疗脑中风和老年痴呆。 第六章 银杏叶的利用 6.4 银杏叶制剂的应用

50 银杏叶萜内酯A、B、C混合物或B，都可以用于转移癌的治疗，它使癌细胞对化疗极为敏感，从而提高抗癌化疗的效果，减少不良反应。
6.4.3 银杏叶萜内酯的应用 　 银杏叶萜内酯B气雾剂Ⅰ期临床试验证明，可预防PAF（血小板活化因子）和变应原诱导的哮喘儿童的支气管收缩。银杏叶萜内酯可治疗与PAF有关的疾病，如哮喘、过敏、皮炎及风湿等。 　　　银杏叶萜内酯A、B、C混合物或B，都可以用于转移癌的治疗，它使癌细胞对化疗极为敏感，从而提高抗癌化疗的效果，减少不良反应。 第六章 银杏叶的利用 6.4 银杏叶制剂的应用

51 结束 第六章 银杏叶的利用