支原体、立克次体、衣原体、螺旋体、真菌学

Presentation on theme: "支原体、立克次体、衣原体、螺旋体、真菌学"— Presentation transcript:

1 支原体、立克次体、衣原体、螺旋体、真菌学
第六周 支原体、立克次体、衣原体、螺旋体、真菌学

2 教学基本要求 了解支原体的形态、结构无细胞壁；熟悉支原体与细菌L型的区别；了解肺炎支原体和解脲脲原体的致病性
了解立克次体的特点，是专性细胞内寄生、繁殖；了解立克次体的致病性及所致疾病。 了解衣原体的特点，严格细胞内寄生，有发育周期；了解衣原体的致病性及所致疾病。 熟悉螺旋体的特点；掌握钩端螺旋体的生物学性状，形态结构和观察方法、抵抗力、抗原及分类；掌握钩端螺旋体的致病物质和所致疾病；掌握钩端螺旋体病的防治原则。 了解真菌的微生物学性状，单细胞真菌、多细胞真菌，菌丝、孢子；真菌的致病性，真菌性感染、真菌变态反应、真菌性中毒；了解真菌感染的防治。

3 支原体和脲原体 无细胞壁、多形性、能营独立生活最小的原核细胞型微生物 支原体目：支原体科 支原体属 脲原体属

4 支原体(mycoplasma)和脲原体（ Ureaplasma)
微生物学特性 体积微小： um，可通过滤菌器 无细胞壁，多形性 DNA＋RNA 二分裂为主，出芽繁殖 Giemsa染色

5 培养： 营养要求高＋胆固醇 生长慢，菌落小， mm 油煎蛋样菌落

6 支原体与L型细菌的区别 支原体 L型细菌 自然界中广泛存在 绝大多数生长需胆固醇 在遗传上与细菌无关，且无论在什么条件下也不能变成细菌 菌落较小，0.1～0.3mm 自然界很少存在 生长不一定需要胆固醇 在遗传上与原菌相关，并可在诱导因素去除后回复为原菌 菌落稍大，0.5～1.0mm

7 致病性 肺炎支原体：原发性非典型性肺炎（间质性肺炎） 解脲脲原体：非细菌性尿道炎 男：尿道炎、不育 女：早产、不孕、低体重儿

8 衣原体（chlamydia） 严格细胞内寄生 有独特发育周期 原体、始体 种与亚种：沙眼衣原体 沙眼生物亚种 性病淋巴肉芽肿亚种 鼠亚种
有独特发育周期 原体、始体 种与亚种：沙眼衣原体 沙眼生物亚种 性病淋巴肉芽肿亚种 鼠亚种 肺炎衣原体 鹦鹉热衣原体 兽类衣原体

9 2 阶段 发育周期 原体（elementary body, EB): 感染性，小而致密
始体（initial body)/网状体（reticulate body, RB):繁殖体，大而疏松

10 包涵体 易感细胞内含繁殖的始体和子代原体的空泡
包涵体 易感细胞内含繁殖的始体和子代原体的空泡

11 沙眼衣原体 Chlamydia trachomatis
传染源：人 沙眼生物亚种、LGV亚种、鼠亚种 沙眼生物亚种 汤飞凡，1956，鸡胚卵黄囊接种法 14个血清型

12 沙眼生物亚种 --- 沙眼 眼---眼，眼---手---眼 沙眼生物亚种A、B、Ba和C血清型
感染眼结膜上皮细胞→增殖，包涵体→局部炎症→早期流泪、有粘液脓性分泌物、结膜充血及滤泡增生→后期结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜损害→影响视力或致盲

13 沙眼生物亚种 ---包涵体结膜炎( 成人、婴儿）
由沙眼生物亚种B、Ba、D、Da、E、F、G、H 、I、Ia、J及K血清型引起 婴儿—产道传染 成人同沙眼 沙眼生物亚种 --- 泌尿生殖道感染 （STD） 性接触 血清型与包涵体结膜炎相同

14 免疫性 抗体持续时间短 免疫力不强，易再受感染

15 微生物学检查法 直接涂片镜检 采用Giemsa、碘液或荧光抗体染色镜检，检查上皮细胞内有无包涵体。 分离培养 接种鸡胚卵黄囊或传代细胞
分离培养 接种鸡胚卵黄囊或传代细胞 核酸检测

16 防治原则 注意个人卫生，不用公共毛巾、脸盆等。 无特异预防方法

17 性病淋巴肉芽肿亚种--- LGV（STD）
血清型（L1、L2、L2a及L3） 致病性 传染源：人 传播途径：性接触 侵犯淋巴组织 男性→腹股沟淋巴结→化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿→瘘管 女性→会阴、肛门和直肠→肠皮肤瘘管，会阴-肛门-直肠狭窄和梗阻

18 肺炎衣原体 Chlamydia pneumoniae
只有一个血清型：TWAR株 传染源：人 传播途径：呼吸道 所致疾病：呼吸道感染，肺炎为主. 可能与冠心病和心肌梗塞有关

19 螺旋体(spirochete) -- 一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物
-- 基本结构与细菌相似，例如有细胞壁、原始核质，以二分裂方式繁殖和对抗生素等药物敏感等

20 螺旋体的科和属 螺旋体 引起人类疾病 病原体 螺旋体科 密螺旋体属(Treponema) 梅毒 苍白密螺旋体苍白亚种
螺旋体 引起人类疾病 病原体 螺旋体科 密螺旋体属(Treponema) 梅毒 苍白密螺旋体苍白亚种 疏螺旋体属(Borrelia) 莱姆病 伯氏疏螺旋体 流行性回归热 回归热疏螺旋体 钩端螺旋体科 钩端螺旋体属(Leptospira) 钩端螺旋体病 问号状钩端螺旋体

21 钩端螺旋体（Leptospira ）

22 生物学性状 形态与染色 螺旋细密、规则，形似细小珍珠排列的细链。一端或两端呈钩状。运动活泼 ,常使菌体呈C、S或8字型
革兰染色阴性，不易着染 Fontana镀银染色法→染成棕褐色 运动活泼 – 内鞭毛

23 培养 营养要求复杂，常用Korthof培养基 适宜生长温度为28~30℃ 钩端螺旋体在人工培养基中生长缓慢 需氧或微需氧

24 抵抗力－弱 热抵抗力弱，60℃1min即死亡 0.2%来苏、1%石炭酸经10~30min被杀灭 对青霉素敏感 在湿土或水中可存活数月

25 致病性与免疫性 致病物质---类似细菌内毒素与外毒素 1．内毒素样物质(ELS)或称脂多糖样物质(LLS) 2．溶血素
3．细胞毒性因子(CTF) 4.细胞致病作用(CPE)物质

26 钩端螺旋体病------一种人畜共患传染病
所致疾病 钩端螺旋体病------一种人畜共患传染病 传染源 鼠类和猪 传播途径 接触疫水或疫土，经粘膜或破损皮肤进入 经胎盘垂直传播 进入损伤全身毛细血管内皮细胞 及肝、肾、肺心及中枢神经 可出现休克、DIC、黄疸、出血、 心肾功能不全、脑膜炎等 先形成钩体血症 临床表现

27 免疫性 疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力 体液免疫为主

28 微生物学检查法 病原体检测 发病10天内取血液;1周后取尿液;有脑膜刺激者取脑脊液 直接镜检
分离与鉴定 接种至Korthof培养基，置28℃孵育。 阳性标本：在2周内可见培养液呈轻度混浊→暗视野显微镜检查→有→则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。 　　阴性标本:分离培养应连续观察4个月，仍无生长者 动物接种 分子生物学方法

29 血清学诊断 病初和发病后第3~4周各采血清一次。有脑膜刺激 症状者采取脑脊液 方法: 显微镜凝集试验(MAT) 间接凝集试验
病初和发病后第3~4周各采血清一次。有脑膜刺激 症状者采取脑脊液 方法: 显微镜凝集试验(MAT) 间接凝集试验 以乳胶 (聚苯乙烯)或活性炭微粒为载体， 吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物

30 防治原则 防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理 在常年流行地区，对易感人群和与疫水接触者宜接种包含当地流行株在内的多价钩端螺旋体疫苗

31 苍白密螺旋体苍白亚种 （梅毒螺旋体 T.pallidum）
生物学性状 形态与染色 8~14个致密而规则的小螺旋，两端尖直，运动活泼 革兰染色阴性，不易着染 Fontana镀银染色法→染成棕褐色

32 培养 不能在无活细胞的人工培养基中生长繁殖 在家兔上皮细胞培养中能有限生长，繁殖慢 抵抗力－极弱 对温度和干燥特别敏感。 对常用化学消毒剂亦敏感，1%~2%石炭酸内数分钟就死亡。 对青霉素、四环素、红霉素或砷剂均敏感。

33 致病性与免疫性 致病物质 所致疾病---梅毒 （STD） 免疫性 外膜蛋白 透明质酸酶 宿主细胞纤维粘连蛋白覆于表面 人是梅毒的唯一传染源
获得性 性接触传播 先天性 母体→胎盘→胎儿 免疫性 感染性免疫 细胞免疫比体液免疫重要

34 获得性梅毒 Ⅱ期梅毒：感染性强，破坏性小 Ⅲ期(晚期)梅毒：感染性小，破坏性大 Ⅰ期（初期）梅毒：感染性极强，破坏性小
感染后3周左右局部出现无痛性硬下疳，多见于外生殖器，一般4~8周后，常自愈。 Ⅱ期梅毒：感染性强，破坏性小 发生于硬下疳出现后2~8周。苍白亚种螺旋体血症，全身皮肤、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、关节、眼及其他脏器。 Ⅲ期(晚期)梅毒：感染性小，破坏性大 发生于感染2年以后，亦可长达10~15年的。病变可波及全身组织和器官。基本损害为慢性肉芽肿，局部组织坏死。损害常进展和消退交替出现。皮肤、肝、脾和骨骼常被累及。可危及生命。

35 Ⅰ期（初期）梅毒

36 Ⅱ期梅毒

37 Ⅲ期(晚期)梅毒

38 先天性梅毒（胎传梅毒） 多发生于妊娠4个月之后 引起胎儿的全身性感染，导致流产、早产或死胎； 出生梅毒儿，呈现马鞍鼻、锯齿形牙、间质性角膜炎、先天性耳聋等特殊体征

39 微生物学检查法 1.标本 Ⅰ期梅毒----硬下疳渗出液 Ⅱ期梅毒----梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液 2.显微镜检查 3.血清学诊断

40 非特异性：非密螺旋体抗原试验 抗原(正常牛心肌的心脂质)→血清中的反应素(抗脂质抗体) 方法:VDRL和RPR试验。适用于大量过筛 特异性：密螺旋体抗原试验 抗原（Nichols株螺旋体）→螺旋体特异抗体 优点：特异性强，可用作梅毒证实试验 常用方法：FTA-ABS试验和MHA-TP试验

41 防治原则 加强性卫生教育和严格社会管理 梅毒确诊后，宜用青霉素等药物及早予以彻底治疗

42 立克次体（rickettsia） 细胞内寄生 二分裂繁殖 Giemsa 染色 节肢动物可成为寄生宿主、储存宿主及传播媒介
人畜共患病 自然疫原性疾病

43 外斐反应 变形杆菌代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应，检测人类或动物血清中有无相应的抗体 本质：交叉凝集试验 立克次体病的辅助诊断

44 外斐反应（Weil-Felix reaction）
立克次体 变形杆菌菌株 OX19 OX2 OXK 普氏立克次体 +++ + - 斑疹伤寒立克次体 恙虫病立克次体 贝纳柯克斯体 五日热巴通体

45    DISEASE   CAUSAL AGENT  ANIMAL RESERVOIR WEIL-FELIX RESPONSE Human, louse 人虱 epidemic typhus 流行性斑疹伤寒 R. Prowazekii 普氏立克次体 OX-19 Endemic typhus 地方性斑疹伤寒 Mice, flea 鼠蚤 R. Mooseri 莫氏立克次体 OX-19 Scrub 恙虫病 Chigger 恙螨 R. Tsutsugamushi 恙虫病立克次体 OX-K Q fever Q热 Tick 蜱 - R. Burnelii

46 真菌学

47 一、 概述 二、 浅部感染性真菌 三、 深部感染性真菌 四、 条件致病性真菌
一、  概述 二、  浅部感染性真菌 三、  深部感染性真菌 四、  条件致病性真菌

48 第一节  概述       一、真菌的生物学特性 二、真菌的分类 三、常用真菌实验技术

49 真菌生物学特性 定义 真菌是真核细胞型微生物 有细胞壁和完整的核 以腐生或寄生的方式摄取养料 不含叶绿素 少数为单细胞 大多为多细胞 能进行有性生殖和无性繁殖 细胞壁: 不含肽聚糖 含几丁质及纤维素 种类繁多 分布极广 与人关系密切

50 1.形态与结构 单细胞: 圆形/卵圆形 母细胞出芽并脱离母细胞 成为子细胞 (新的繁殖体)--- 酵母菌(酵母样菌) 多细胞: 菌丝与孢子交织成团 菌落疏松呈丝状 ---丝状菌(霉菌) 菌丝--- 成熟孢子在适宜条件下长出芽管 逐渐延长呈丝状 ＼ 有隔菌丝 无隔菌丝 ＼ 菌丝体(菌丝交织成团) 形态大小不一 (螺旋状 球拍状 鹿角状) 菌丝间有无分隔　　　　　　　　　　→ 鉴别真菌 形状特征 (绒毛状 絮状 粉末状)

51 孢子---- 是真菌的繁殖器官 真菌种类不同 孢子形状大小也不同→鉴别真菌 有性孢子 : 卵孢子 接合孢子 子囊孢子 担子孢子
有性孢子 : 卵孢子 接合孢子 子囊孢子 担子孢子 无性孢子 :芽生孢子 厚壁孢子 关节孢子 分生孢子 孢囊孢子 芽生孢子 : (常见于隐球菌 念珠菌) 母孢子发芽形成→与母体脱离→新个体 ＼芽体延长 互相连接(不脱离母体) ↓ 假菌丝 厚壁孢子 : 为休眠孢子 菌丝内胞浆浓缩 胞壁增厚而成 (环境不适时形成) 真菌种类不同 孢子形状大小也不同→鉴别真菌

52 2.培养特性 培养条件: 营养: 一般细菌用培养基上都能生长 沙保(Sabouraud)培养基 温度 :22 ℃ ~28℃ (深部真菌: 28 ℃ / 37℃) PH : 4.0~6.0 (弱酸性) 需氧 湿度高 生长速度 : 慢 (1~4周见典型菌落) 菌落特征 :酵母/酵母样菌 :光滑 柔软 湿润 丝状菌 : 疏松 (绒毛状 棉絮状 粉末状) 颜色 (正 / 背面)

53 临床意义 若在人体正常无菌部位分离到非病原性真菌 且37℃生长 加上临床表现 可视为该病人的病原体 全身性真菌病: 病原性真菌 : 组织胞浆菌 芽生菌-----急慢性 /局部肉芽肿性炎症 条件致病菌 : 念珠菌 隐球菌 曲霉菌 毛霉菌 浅部真菌病 : 皮肤真菌 瓶形酵母 白色念珠菌 皮下真菌病 : 较少见 真菌过敏 真菌中毒 真菌毒素致癌

54 图20-1 真菌的菌丝

55 图20-2 真菌的孢子

56 分类 生物学分类 与医学有关的真菌 ↓　　　 　　　　无鞭毛菌门: 接合菌亚门 子囊菌亚门 　　　　　　　　　 担子菌亚门 半知菌亚门(病原性真菌) 临床分类 (按致病部位) 浅部真菌 深部真菌 形态学分类 单细胞真菌 多细胞真菌 真菌的形态与结构在鉴定上起重要作用

57 1. 标本 : 毛发 皮(甲)屑 痰 血 脑脊液 分泌物 穿刺液
2.真菌检验 非培养法 : 直接镜检: 染色标本 (乳酸酚棉兰染色) 不染色标本 →观察菌丝 /孢子形态 其它染色 墨汁负染 新型隐球菌 (荚膜) 10%KOH 癣菌(菌丝 孢子) 抗原检出 : 隐球菌荚膜多糖抗原 白色念珠菌甘露聚糖抗原

58 培养法: 试管法---初代培养 菌种保存 大培养---纯种的培养 研究 小培养---菌种鉴定 (玻片法 钢圈法 方块法)

59 真菌的致病性： (1)致病性真菌感染：一些外源性真菌感染可引起皮肤、皮下和全身性疾病。如皮肤癣菌有嗜角蛋白特性，在皮肤局部大量增殖后，通过机械刺激和代谢产物的作用引起局部的炎症和病变，即手足癣、甲癣、头癣等。 (2)条件致病性真菌感染： 一些内源性真菌在机体免疫力降低，如长期应用抗生素、放射治疗等情况下发生。如白念珠菌是存在于人体表及腔道中的正常菌群，当人体免疫力低下时可侵入人体许多部位，包括发生于皮肤粘膜的鹅口疮、口角糜烂、发生于内部器官的肺炎、食道炎、膀胱炎、发生于中枢神经系统的脑膜炎等。

60 (3)真菌变态反应性疾病： 有些真菌本身并不致病，但对某些具过敏倾向的个 体可引起变态反应性疾病，如曲霉、青霉、镰刀菌等可 引起荨麻疹、哮喘、变应性鼻炎。 (4)真菌性中毒： 有些真菌在粮食上生长，人及动物食后可因真菌本 身或真菌产生的毒素而中毒。 肝损害 黄曲霉毒素、杂色霉素 桔青霉素 肾小球损害 节菱孢菌引起的霉甘蔗中毒 抽搐，昏迷直至死亡 真菌中毒与一般细菌病毒感染不同，有地区性与季节性，但没有传染性，不引起流行。

61 第二节 浅部感染性真菌 一、皮肤表面感染性真菌 二、皮肤癣真菌 三、皮下组织感染性真菌

62 皮肤癣真菌 主要侵犯皮肤 毛发 指(趾)甲 寄生于表皮毛发和甲板的角质组织中---- 癣 手足癣 体癣 股癣 甲癣(灰指甲) 头癣 致病特点: 一菌一病 一菌多种癣 多菌引起同一症状 致病机制: 皮肤真菌对表皮角化组织有特别的 亲嗜性

63 属名 侵害部位 皮肤 指(趾)甲 毛发 毛癣菌属 小孢子菌属 表皮癣菌属

64 微生物学检查 标本 : 病损部位皮肤 甲屑 病发 直接镜检 : 10%KOH将标本制成湿片 -----观察菌丝 孢子 分离鉴定 : 沙保培养基 菌落 / 培养物镜检特征 其他试验

65 第三节      深部感染性真菌 一、隐球菌 二、二相性真菌

66 隐球菌属 新型隐球菌 : 人类病原菌 经呼吸道感染→血液→脑/ 脑膜→隐球菌脑病 荚膜多糖抗原结构不同----- 四种血清型 变种----gattit 变种 上海变种 致病物质 : 荚膜多糖 微生物学检查: 直接镜检 : 墨汁负染--- 黑色背景中有圆形出芽菌体 周围有宽厚的荚膜 分离鉴定 : 酚氧化酶试验 尿素酶试验 : 阳性 糖同化及发酵试验:不发酵糖 同化纤维二糖 肌醇

67 图20-3 新生隐球菌墨汁负染色

68 二相性真菌 特征: 1. 组织内和37℃培养时----- 酵母(组织相) 室温---- 霉菌 (菌丝相) 2. 自然界的腐生菌 人体---原发性真菌病病原 荚膜组织胞浆菌 粗球孢子菌 副球孢子菌 申克孢子丝菌 马尔尼菲青霉 致病 :申克孢子丝菌病(慢性结节性 /溃疡性损害) 马尔尼菲青霉病 (皮下脓肿 网状内皮系 统感染)

69 第四节   条件致病性真菌 一、假丝酵母菌 二、曲霉 三、毛霉目真菌 四、卡氏肺孢菌

70 假丝酵母菌属 （念珠菌属） 1. 临床意义 浅部感染 :皮肤/粘膜念珠菌病(指间糜烂 鹅口疮 口角炎 阴道炎)
白假丝酵母菌 热带假丝酵母菌 近平滑假丝酵母菌 1. 临床意义 浅部感染 :皮肤/粘膜念珠菌病(指间糜烂 鹅口疮 口角炎 阴道炎) 深部感染 : 支气管 肺念珠菌病 念珠菌性肠炎 念珠菌性心内膜炎

71 2.微生物学检查 直接镜检 :革兰染色阳性 圆形/卵圆形芽 生孢子 着色不均 分离鉴定 :芽管形成试验 糖同化/发酵试验 厚壁孢子形成试验 科玛嘉显色培养基上 : 绿色菌落

72