《中国兽药典》2015版宣贯 ------抗生素部分.

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1 《中国兽药典》2015版宣贯 ------抗生素部分

2 内容 一、附录 ——无菌检查法； ——微生物限度检查法； ——含量均匀度检查法； ——效价测定法。
二、《中国兽药典》2015版新增抗生素品种。 三、《中国兽药典》2015版修订抗生素品种。 四、标准物质通则和指导原则。

3 一、附录－无菌检查法 总的修订原则： 照2015版《中国药典》（2015版CP）附录修定。
列表比较如下：

4 一、附录－无菌检查法 不同项 2010年版 2015年版 1、试验环境 万级环境下的百级单向流或隔离系统
应在无菌条件下进行，试验条件必须达到无菌检查要求* 2、试验员 应具备微生物专业知识和培训 删除此要求 3、培养基 (1) 硫乙醇酸盐流体培养基 (2) 改良马丁培养基 置23-28℃培养 (3) 选择性培养基 (4) 0.5%葡萄糖肉汤培养基 (5) 营养琼脂培养基 (6) 营养肉汤培养基 (7) 改良马丁琼脂培养基 (1) 硫乙醇酸盐流体培养基（FTG） (2) 胰酪大豆胨液体培养基（TSB） 置20-25℃培养 (3) 中和或灭活用培养基（加了中和或灭火剂的FTG或TSB） (4) 0.5%葡萄糖肉汤培养基（和FTG、TSB一起 参与硫酸链霉素的无菌检查） (5) 胰酪大豆胨琼脂培养基 (6) 沙氏葡萄糖肉汤培养基 (7) 沙氏葡萄糖琼脂培养基 *2015版CP中的药品微生物实验室质量管理指导原则指导意见 ：“应在B级背景下的A级单向流洁净区域内或隔离系统进行”； 2015版CP中的无菌检查用隔离系统验证指导原则中给出：“隔离器安装位置为D级洁净环境” (洁净环境级别参考药品现行版“GMP”分为A、B、C、D四个级别)。

5 一、附录－无菌检查法 不同项 2010年版 2015年版 4、培养 基的灵敏度检查 5、方法适用性试验 硫乙醇酸盐流体培养基
4、培养 基的灵敏度检查 硫乙醇酸盐流体培养基 —金黄色葡萄球菌 —铜绿假单胞菌 （4种菌）→（9支） —枯草芽孢杆菌 —生孢梭菌 (2) 改良马丁培养基 —白色念珠菌 —黑曲霉 （2种菌）→（5支） (3)菌液制备：…0.9%无菌氯化钠溶液… —金黄色葡萄球菌 （3种菌）→（7支） —铜绿假单胞菌 (2) 胰酪大豆胨液体培养基 —白色念珠菌 （3种菌)→(7支) —黑曲霉 (3) 菌液制备：pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液…。 5、方法适用性试验 (1)名称的修订：方法验证试验 (2)硫乙醇酸盐流体培养基接入小于100cfu的 —大肠埃希菌 种菌 (3)改良马丁培养基接入小于100cfu的 —黑曲霉 种菌 (4)培养时间 3-5天 (1)改为：方法适用性试验 (2)硫乙醇酸盐流体培养基中接入小于100cfu的 —大肠埃希菌 种菌 (3)胰酪大豆胨液体培养基接入小于100cfu的 —白色念珠菌 种菌 (4)培养时间 不得超过5天

6 注：10年版中药二部和一部的无菌检查方法一致， 15年版建议中药也同样修订。
一、附录－无菌检查法 不同项 2010年版 2015年版 6、培养时间 (1) 阳性对照 培养48-72小时 (2) 转种的情况 细菌培养 2天、真菌培养 3天 (1) 72小时内 (2) 培养 3天 7、试验用量 (1)检验数量的修订 检验数量是指一次试验用供试品最小包装容器的数量。 ——除另有规定外，出厂产品按表1，上市产品监督检验按表2、表3 。 ——表1、表2、表3中最少检验数量不包括阳性对照试验的供试品用量。 ——一般情况下，如采用薄膜过滤法，应增加1/2的最小检验数量做阳性对照用；如采用直接加入法，应增加每种培养基中所接种的量做阳性对照用。 (2) 检验量的修订 检验量是指一次实验所用的供试品总量（g或ml）。 ——除另有规定外，每份培养基接种的供试品量按 表2、表3规定。若每支（瓶）供试品的装量按规定足够接种两份培养基，则应分别接种硫乙醇酸盐培养基和改良马丁培养基。 ——采用薄膜过滤法时，检验量应不少于直接接种法供试品的总接种量，只要供试品特性允许，应将所有容器内的全部内容物过滤。 (3) 表2、表3的修订 ——表2 液体制剂 检验量 +检验数量 ——表3 固体制剂 检验量 +检验数量 检验数量是指一次试验用供试品最小包装容器的数量。成品每亚批均应进行无菌检查。 ——表1、表2中最少检验数量不包括阳性对照试验的供试品用量。 ——删除该规定。删除原因：在阳性对照项已有原则要求：“供试品用量同供试品无菌检查每份培养基接种的样品量。” 检验量是指供试品每个最小包装接种至每份培养基的最小量（g或ml）。 ——除另有规定外，供试品检验量按表3规定。如每支（瓶）供试品的装量按规定足够接种两份培养基，则应分别接种硫乙醇酸盐培养基和胰酪大豆胨液体培养基。 ——采用薄膜过滤法时，只要供试品特性允许，应将所有容器内的全部内容物过滤。 ——表2 为固体、液体 和医疗器具的检验数量 ——表3为固体、液体 和医疗器具的检验量 注：10年版中药二部和一部的无菌检查方法一致， 15年版建议中药也同样修订。

7 总修订原则：照2015年版CP药典附录修定 CP2015版修改幅度较大，其内容与国外药典接轨。
一、附录－微生物限度检查法 总修订原则：照2015年版CP药典附录修定 CP2015版修改幅度较大，其内容与国外药典接轨。 2010版 2015版 微生物限度检查法 (1) 非无菌产品微生物限度检查： 微生物计数法 (2) 非无菌产品微生物限度检查： 控制菌检查 (3) 非无菌产品微生物限度标准

8 —需氧菌总数：胰酪大豆胨琼脂培养基和胰酪大豆 胨液体培养基
一、附录－微生物限度检查法 不同项 2010年版 2015年版 1、试验环境 万级环境下的百级 应符合微生物限度检查的* 微生物计数法 2、计数方法 (1) 平皿法 —倾注法 (2) 薄膜过滤法 —涂布法 (3) 最可能数法（MPN法） 3、目标检测菌 细菌、霉菌及酵母菌 需氧菌、霉菌和酵母菌 4、培养基适用性检查 菌种： —大肠埃希菌 —金黄色葡萄球菌 —枯草芽孢杆菌 —白色念珠杆菌 —黑曲霉 (2) 培养基： —细菌计数：营养琼脂培养基 —霉菌及酵母菌计数：玫瑰红钠琼脂培养基和酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基 (3) 结果判定：被检培养基上的菌落平均数不小于与对照培养基上的菌落平均数的70%。 —铜绿假单胞菌菌 (2)培养基： —需氧菌总数：胰酪大豆胨琼脂培养基和胰酪大豆 胨液体培养基 —霉菌及酵母菌总数：沙氏葡萄糖琼脂培养基（含抗生素）和玫瑰红钠琼脂培养基 (3)结果判定：被检培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5-2范围内。 (4)增加了阴性对照 。 *要求D级背景下的B级单向流空气区域

9 一、附录－微生物限度检查法 不同项 2010年版 2015年版 5、方法适用性试验 6、供试品检查 方法 7、计数标准
名称的修订：计数方法的验证 (2) / (3) 抗菌活性的去除或灭活 常用供试液的抑菌活性消除的方法 —培养基稀释法 —离心沉淀法 —薄膜过滤法 —中和法 —几种方法的联合使用 (1) 名称改为：计数方法适用性试验 (2) 增加了供试品微生物的回收方法 供试液接种后，按“微生物回收”规定的方法记性微生物计数。如试验组菌落数的值小于菌液对照组菌数值得50%，可采用下述方法消除供试品的抑菌活性。 —增加稀释液或培养基体积 —加入适宜的中和剂或活灭活剂 —采用薄膜过滤法 —上述几种方法的可联合使用 删去了离心沉淀法 6、供试品检查 方法 —平皿法：倾注法 (2) 培养条件 —营养琼脂培养基：30-35℃, 3天 —玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基：23-28℃，5天 —平皿法：倾注法和涂布法 —MPN法：—适用于含菌量较低的供试品需氧菌总数测定； —精确度不及薄膜过滤法和平皿计数法； —优点在于少量菌在经过增菌后进行直接观察结果， 通过查表得到计数结果； 该法不适合霉菌计数。 —胰酪大豆胨琼脂培养基：30-35℃, 3-5天 —沙氏葡萄糖琼脂培养基：20-25℃，5-7天 (3) 增加了阴性对照 7、计数标准 菌数应： <10cfu <100cfu <1000cfu <10000cfu <101cfu 可接受的最大菌数为20 <102cfu 可接受的最大菌数为200 <103cfu 可接受的最大菌数为2000 以此类推……

10 一、附录－微生物限度检查法 不同项 2010年版 2015年版 控制菌检查法 1、测试次数
如不符合规定，独立复试两次，以三次结果的平均值报告菌数（可复试） 若其中任何一项不符合该品种项下的规定，判供试品不符合规定（不复试），即同无菌检查，一次性检出，不得复试。 2、培养基适用性检查 检查项目 —促生长能力 —抑菌能力 —指示能力 (2) 控制菌检查 (3) 培养基 —大肠菌群 乳糖胆盐发酵培养基 乳糖发酵培养基 曙红亚甲蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基 —大肠埃希菌 胆盐乳糖培养基 4-甲基伞形酮葡萄糖苷酸培养基 —指示特性 (2)控制菌检查 (3) 培养基 —耐胆盐革兰阴性菌 肠道菌增菌液体培养基 紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基 —大肠埃希菌 麦康凯液体培养基 麦康凯琼脂培养基

11 一、附录—微生物限度检查法 不同项 2010年版 2015年版 2、培养基适用性检查（续） 3、方法适用性试验 4、供试品检查
(2) 控制菌检查 (3) 培养基 —沙门菌 营养肉汤培养基 四硫磺酸钠亮绿培养基 胆盐硫乳琼脂培养基或纱门志货菌属琼脂培养基 曙红亚甲蓝琼脂培养基或麦康 凯琼脂培养基 —铜绿假单胞菌 胆盐乳糖培养基 溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基 绿农菌素测定用培养基 —金黄色葡萄球菌 亚碲酸盐肉汤培养基 卵黄氯化钠琼脂培养基或甘露 醇氯化钠琼脂培养基 —梭菌 —白色念珠菌 (2) 控制菌检查 (3) 培养基 —沙门菌 RV沙门菌增菌培养基 木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基 三糖铁琼脂培养基 —铜绿假单胞菌 溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基 —金黄色葡萄球菌 甘露醇氯化钠琼脂培养基 3、方法适用性试验 名称为：验证试验 方法适用性试验 4、供试品检查 大肠菌群 ….. 耐胆盐革兰阴性菌 分为定性和定量试验 —供试液制备和预培养：TSB制备1:10的供试液，20-25℃培养，培养时间应该使供试品中的细菌充分恢复但不增值(约2小时 ) —定性试验:(1)接种 取相当于1g或1ml供试品的上述预培养物接种至肠道菌增菌液体培养基100ml中；(2)培养 ℃增菌培养24-48小时后；(3)分离培养 划线接种紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上，30-35℃培养18-24小时。如平板上无菌落生长，判供试品未检出耐胆盐格兰阴性菌。 —定量试验:(1)接种 取上述预培养物，进一步10倍稀释至1:10、1:100、1:1000（相当于0.1g(ml)、0.01g(ml)、0.001g(ml)）。取3个稀释级各1ml，分别接种至适宜体积的肠道菌增菌培养集中（9-10ml）；(2)培养 同上； (3)分离培养 同上

12 一、附录－微生物限度检查法 不同项 2010年版 2015年版 微生物限度标准 分类原则不同
（1）制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂 （2）内服给药制剂 （3）局部给药制剂：分为手术等给药、眼部给药、直肠给药和其他局部给药。 （4）含动物组织的内服给药制剂 （5）有兼用途径的制剂 （6）霉变、长螨者 （7）原料及辅料 （1）制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂和原辅料 （2）用于手术、严重烧伤、严重创伤的局部给药制剂 （3）非无菌兽药制剂：又按内服给药、耳用/皮肤给药、阴道给药、直肠给药和其他局部给药。 （4） 非无菌药用原料及辅料 总的来说：虽然分类原则变了，但限度标准基本一样的。

13 一、附录—-含量均匀度检查法 2015版增加了多剂量包装的取样方式：除另有规定外， —单剂量包装的，取供试品10个；
—多剂量包装的预混剂、可溶性粉剂、粉剂和颗粒剂等，包装规格为 500g以上者取1个包装 500g取2个包装 500g以下者取5个包装 平均在不同部位各取供试品10份。

14 一、附录－含量均匀度检查法 不同项 2010年版 2015年版 1、计算公式不同

15 一、附录－含量均匀度检查法 不同项 2010年版 2015年版 2、L值的不同
含量均匀度的限度应符合各品种项下的规定。除另有规定外，单剂量包装的口服混悬剂、内充混悬物的软胶囊剂，单剂量包装的眼用、耳用、鼻用混悬剂、固体或半固体制剂，其限度应为±25%。 如该品种项下规定含量均匀度的限度为±20％或其他百分数时，应将上述各判断式中的15.0改为20.0或其他相应的数值，但各判断式中的系数不变。 除另有规定外，L=15.0；单剂量包装的内服混悬剂， 单剂量包装的眼用、耳用、鼻用混悬剂、固体或半固体制剂L=20.0；栓剂L=25.0。 如该品种项下规定含量均匀度的限度为±20%或其他数值时，L=20.0或其他相应的数值。

16 一、附录－含量均匀度检查法 不同项 2010年版 2015年版 3、A的计算方法 没给出计算方法

17 一、附录－含量均匀度检查法 举例1 117.3% 0.898 A+S=18.2>15.0不符合规定 A+S=18.2>15.0
一、附录－含量均匀度检查法 举例1 样品 批号 测定结果（%） 平均含量 S 2010版 2015版 / 10份样品，每份样品进2针 90.0%-110.0% A+1.80S≤15.0 A+2.2S≤15 地克珠利预混剂0.2% A 117.5、117.0、117.6、117.3、117.6、117.1、117.0、117.4、117.2、117.8、115.2、115.1、117.8、117.6、117.4、117.7、117.4、117.1、118.6、119.0 117.3% 0.898 A+1.80S=18.9>15.0 A+S=18.2>15.0不符合规定 A+2.2S=19.3>15.0 A+S=18.2>15.0 不符合规定 B 101.7、101.6、102.1、101.8、102.0、102.0、101.8、101.4、102.0、102.1、101.4、101.8、101.2、101.8、101.3、100.9、100.8、100.8、102.0、101.2 101.6% 0.449 2.4 2.6 C 99.4、98.7、98.6、98.6、98.9、99.0、98.5、98.1、98.5、98.2、98.7、98.6、98.7、98.5、99.0、98.7、97.9、98.4、99.0、99.2 98.7% 0.364 2.0 2.1 D 105.0、104.8、107.7、107.7、107.1、107.2、106.6、106.2、105.7、105.7、106.9、106.8、107.1、107.0、107.4、107.8、106.1、106.1、106.1、106.1 106.5% 0.864 8.1 8.4 E 99.3、100.4、100.7、101.3、100.1、100.0、100.1、99.8、99.4、99.5、100.3、100.0、100.2、99.9、100.7、100.4、100.2、99.9、99.2、98.8 100.0% 0.577 1.1 1.3 F131001 99.9、99.8、100.3、100.4、100.3、100.3、99.9、99.4、99.9、100.4、99.6、99.7、99.9、100.0、100.2、99.8、99.9、99.7、100.0、99.6 0.287 0.6

18 一、附录－含量均匀度检查法 举例2 模拟测定数据（%） 参数 2010版 2015版 90、90、90、90、90
一、附录－含量均匀度检查法 举例2 模拟测定数据（%） 参数 2010版 2015版 90、90、90、90、90 110、110、110、110、110 A=0 S=10.5 A+1.8S=18.9 A+S=10.5 应复试 A+2.2S=23.1 A+S=10.5 90、90、90、90、90、 110、110、110、110、110、110、110、110、110、110 S=10.2 A+1.45S=14.7 小于15 符合规定 A≤0.25L A2+S2=104 0.25L2=56.3 104>56.3 不符合规定

19 一、附录—抗生素微生物检定法 抗生素微生物检定法是利用抗生素在低微浓度下有选择地抑制或杀死微生物的特点，以抗生素的抗菌活性为指标，来衡量抗生素中的有效成分效力的方法。 抗生素微生物检定法可分为： （1）稀释法 （2）浊度法 （3）琼脂扩散法（管碟法和打孔法）。 目前各国药典通常采用后两种方法测定抗生素的效价。 

20 一、附录－抗生素微生物检定法

21 一、附录－抗生素微生物检定法 抗生素效价单位的确定
由于抗生素生产工艺的复杂性（发酵、提取），早期的抗生素试制初期并非都能制备得到纯品，有些含有多种组份，有些已习惯上使用一种效价单位，从生产及临床使用上考虑均不宜更改计量方法，因此造成目前抗生素效价单位有多种确定方法，大致可按单组分和多组分抗生素两大类来阐述。

22 一、附录－抗生素微生物检定法 抗生素效价单位的确定 单组分抗生素效价单位
重量单位：以抗生素中所含特定的抗菌活性部分的重量计量效价单位。如：链霉素硫酸盐，活性成分为链霉素碱，则链霉素碱1g＝1单位，折算硫酸链霉素1mg=798单位。 类似重量单位：以特定的纯抗生素制品盐的重量作为单位，其包括无效的部分（盐）在内。沿袭早期的用法，理论上是不合理的，目前兽药上只有盐酸四环素和盐酸金霉素2个品种。

23 一、附录－抗生素微生物检定法 抗生素效价单位的确定 特定效价单位：以特定的纯抗生素的某一重量为1单位加以折算。
例如：青霉素单位最初定为一个青霉素单位系在50ml肉汤培养基内完全抑制金黄色葡萄球菌生长的最小青霉素量。早期国际标准品青霉素G钠称重0.6μg规定为1单位，即1667单位/mg。随着青霉素的纯化，青霉素G钠只需0.5988μg即可。因此，第二次定为0.5988μg为1单位。

24 一、附录－抗生素微生物检定法 抗生素效价单位的确定 多组分抗生素效价单位 以其中单一组分的活性成分的重量确定效价单位。
如庆大霉素含有C1、C1a、C2a、C2等多个组分，庆大霉素的效价单位以C1（C21H43O7N5）来计量，1g的C1＝1庆大霉素单位。 用这种方法确定效价单位在“溯源性”方面较为明确，这是目前鼓励采用的方法。

25 一、附录－抗生素微生物检定法 抗生素效价单位的确定 多组分抗生素效价单位
将多个抗生素组分按一定比例混合，以混合组分活性成分的重量确定效价单位。如螺旋霉素主要为含I、II、III三个组分的混合物，其效价单位定义为1g混合物50％的组分I（C43H74N2O14）、25％的组分II（C45H76N2O14）和25％的组分III（C46H78N2O14）＝1螺旋霉素单位。 多个抗生素组分不定比例的混合物，以混合组分活性成分的重量确定效价单位。如吉它霉素为含有A1、A3、A4、A5、A6、A7等的多组分抗生素，其效价单位定义为1g吉它霉素混合物（C37－42H61－69NO14－15）＝1吉它霉素单位。此效价单位类似于特定效价单位，其“溯源性”较模糊，目前不鼓励使用。

26 一、附录－抗生素微生物检定法 抗生素制剂规格的表示： 例如：盐酸土霉素 1g（ 100万单位) 青霉素钠 0.6g（ 100万单位)
实际称取重量= 抗生素总单位/含量

27 一、附录－抗生素微生物检定法 抗生素总量(效价)的对数lgM与所形成抑菌圈半径的平方r2呈直线关系 二剂量法 原理 抗生素微生物检定法基于量反应平行线原理，因此供试品和对照品形成的对数计量-反应关系曲线应当相互平行。

28 一、附录－抗生素微生物检定法 二剂量法 同质性：效价测定的计算式，是假定两者剂量反应直线是互相平行的。 非平行的计量-反应关系曲线

29 一、附录－抗生素微生物检定法 管碟法测定中的影响因素 抑菌圈圆正的控制 滴加抗生素溶液从小管口或毛细滴管口溅出落在琼脂培养基表面上；
小钢管二端面不够平、双碟底不平、制备琼脂培养基平板时，工作台不够水平，结果使培养基层厚度不均匀； 双碟、小钢管、钢管放置器被微量抗生素（或其他杀菌剂）污染，使抑菌圈破裂； 琼脂培养基上，小钢管彼此间隔距离太小而抑菌圈较大时，形成互相影响的卵圆形或椭圆形抑菌圈； 双碟培养过程中，温度不均匀； 底层平板上有冷凝水； 培养基内有小凝块。

30 一、附录－抗生素微生物检定法 管碟法测定中的影响因素 抑菌圈边缘清晰度的控制 试验菌种的纯化； 培养基的质量； 试验菌的菌龄和试验菌的菌量；
双碟的培养时间； 等等。

31 一、附录－抗生素微生物检定法 浊度法 原理：是利用抗生素在液体培养基中对实验菌生长的抑制作用，通过测定培养后细菌浊度值的大小，比较标准品与供试品对实验菌生长抑制的程度，以测定供试品效价的一种方法，这种方法在国外普遍被采用。 优点：检测快速，易于操作，扩散因素影响小，检测结果的正确程度和精密度都优于管碟法。

32 一、附录－抗生素微生物检定法 浊度法 缺点： 对试验仪器的性能及试验器具的要求较高，如培养温度要求一致，比色管的清洁等。
温度的均匀性直接影响试验菌的生长速率。美国药典35版中对管碟法的培养温度要求为±0.5℃，而比浊法的温度要求±0.1 ℃ ，更为严格。 任何影响液体培养基内微生物生长的因素都会影响抗生素效价的测定。 适用范围小。并不适用于所有抗生素，需选择适宜的菌种来检测。

33 一、附录－抗生素微生物检定法 浊度法

34 一、附录－抗生素微生物检定法 浊度法注意事项
玻璃容器与清洁 所用玻璃仪器，必须用硬质中性玻璃，软质玻璃易吸附抗生素。使用的移液管要求管壁不挂液；由于比浊法的灵敏度较高，所用比色皿的清洁更为重要，用清洗溶液洗涤浸泡后，必须用蒸馏水冲洗干净。 菌液需新鲜配制 菌液最好当天制备，当天使用，若在冰箱放置一段时间后再使用，所测定的数据不稳定，误差大。因为菌液在放置一段时间后，部分细菌老化甚至死亡，从而影响试验时活菌的量，使结果产生偏差。 试验用菌种 不宜超过5代 。

35 一、附录－抗生素微生物检定法 浊度法测定注意事项
菌液的浓度 菌液过浓可使浓度-光吸收度不成直线关系；菌液过稀，则读数偏低，误差增大。分光光度计的最正确测量范围在36.8%T处，最好将吸光度控制在0.3～0.7范围内。 温度 温度的恒定与均匀性直接影响试验菌的生长速率。培养用的试管厚度、玻璃质地应一致，否则会影响传热速度，同一批样品的各支培养管，应按正交拉丁方排列，以抵消各位置温度的差异。

36 一、附录－抗生素微生物检定法 浊度法测定注意事项 各种溶液的放置顺序

37 一、附录－抗生素微生物检定法 浊度法测定注意事项
通气 各培养管静止培养时，试验菌慢慢沉降至底部，就会产生梯度的微生物生长区及代谢环境。培养基的上半部分为微亲氧性，底部为厌氧性，如采用振摇或搅拌培养法，增加氧的供应，可促进生长。 培养时间 培养时间的差异可导致误差。已接种试验菌种的培养基加至含有抗生素溶液的各支试管的次序有先后，抗生素与试验菌接触时间也存在着差异。含菌培养基从加第一支试管至加最后一支试管，在室温的时间也不同。要使每管尽量一致，最好将培养基冷却至4℃，然后种入试验菌种。

38 二、新增品种 增加四个抗生素品种（10个标准）： 乙酰氨基阿维菌素：原料+注射液 延胡索酸泰妙菌素：原料+可溶性粉+预混剂
苄星氯唑西林：原料+注入剂 硫酸头孢喹肟：原料 +注射用+注射液 特点：均为兽用专用抗生素品种，充分体现兽药典的特色； 苄星氯唑西林注入剂，为兽用专用剂型，与药典附录配套。

39 二、新增品种－乙酰氨基阿维菌素 乙酰氨基阿维菌素B1a ：R= C2H5 C50H75NO14 914.13
乙酰氨基阿维菌素B1b：R=CH3 C49H73NO 为乙酰氨基阿维菌素B1a和乙酰氨基阿维菌素B1b的混合物。

40 二、新增品种－乙酰氨基阿维菌素 乙酰氨基阿维菌素属大环内酯类体内外杀虫剂
国内标准情况：兽药质量标准汇编中收载了乙酰氨基阿维菌素及其注射液的3个不同的质量标准，分别为644号、804号和942号公告。 国外标准情况：美国药典收载该标准。 结合国内标准、国外标准及产品特性修订此标准，充分体现该标准的适用性。

41 二、新增品种－乙酰氨基阿维菌素 有关物质和含量测定方法：来源于USP方法
同一色谱条件：用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1%高氯酸溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流速为每分钟1.5ml，按下表进行线性梯度洗脱；检测波长为245nm。理论板数按乙酰氨基阿维菌素B1a峰计算不低于4500，乙酰氨基阿维菌素B1a和B1b的分离度应大于3。 时间（分钟） 流动相A(%) 流动相B（%） 45 55 15 25 5 95 30 35

42 二、新增品种－乙酰氨基阿维菌素 有关物质和含量测定方法：来源于USP方法
根据USP标准，杂质A、乙酰氨基阿维菌素B1b、乙酰氨基阿维菌素B1a、杂质C+D和杂质E的相对保留时间为0.55、0.77、1.00、1.05和1.28。 实际系统适用性溶液的图谱中，没有发现有杂质A峰，B1b、乙酰氨基阿维菌素B1a、杂质C+D和杂质E的相对保留时间为0.77、1.00和1.05和1.29，但实验中发现，该相对保留时间并不固定，每次试验会有一定偏差。

43 二、新增品种－乙酰氨基阿维菌素 有关物质和含量测定方法：来源于USP方法
考虑到各企业生产工艺不同，导致其杂质不同，因此没有按相对保留时间逐一定位各杂质。只规定：单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积（1.0%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的5倍（5.0%）。 系统适用性图谱

44 二、新增品种－乙酰氨基阿维菌素 对照品溶液的色谱图 λmax=245nm

45 二、新增品种－乙酰氨基阿维菌素 参照USP增加了8氧代-B1a测定

46 二、新增品种－乙酰氨基阿维菌素 增加了残留溶剂测定 综合各企业的生产工艺及企业标准，确定可能存在的溶剂为乙醇、乙腈与丙酮。
乙醇、乙腈与丙酮 以二乙烯基-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为固定相的毛细管柱为色谱柱，初始温度为50℃，以每分钟2℃的速率升温至80℃，再以每分钟5℃的速率升温至220℃；进样口温度为170℃；检测器温度为170℃；出峰顺序依次为乙腈、乙醇、丙酮与二甲基甲酰胺，各峰之间的分离度均应符合要求。 按外标法以峰面积计算，均应符合规定。

47 残留溶剂 乙腈、乙醇、丙酮对照品混合溶液色谱图
二、新增品种－乙酰氨基阿维菌素 残留溶剂 乙腈、乙醇、丙酮对照品混合溶液色谱图

48 二、新增品种－延胡索酸泰妙菌素 C28H47NO4S•C4H4O4 609.82 该标准合并了国内2个标准：山东鲁抗和江苏赛奥生化有限公司；
同时参照进口兽药质量标准和英国兽药典进行了修订。

49 二、新增品种－延胡索酸泰妙菌素 比旋度 原定加二氧六环溶解并定量稀释制成每1ml中含本品2mg的溶液，但旋光度均较小，测量误差大。
厂家 批号 比旋度 A TMF 25° TMF 27° TMF 28° B 26° C

50 二、新增品种－延胡索酸泰妙菌素 有关物质和含量测定：照EP方法
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-碳酸铵溶液〔取碳酸铵10g，加水800ml使溶解，加6％高氯酸溶液（取高氯酸8.5ml，加水至100ml，摇匀）24ml，用水稀释至1000ml，摇匀，滤过〕-乙腈（49︰28︰23）为流动相，柱温30℃，流速为每分钟1.2ml，检测波长为212nm。分别取延胡索酸泰妙菌素对照品和苯甲磺酰截短侧耳素对照品适量，用流动相溶解并稀释成每1ml各含0.08mg的混合溶液，作为系统适用性溶液；取系统适用性溶液20µl，注入液相色谱仪，记录色谱图，泰妙菌素峰与苯甲磺酰截短侧耳素峰的分离度应大于2.0，理论板数按泰妙菌素峰计算不低于10000。

51 有关物质和含量测定 延胡索酸和泰妙菌素色谱图
二、新增品种－延胡索酸泰妙菌素 有关物质和含量测定 延胡索酸和泰妙菌素色谱图

52 二、新增品种－延胡索酸泰妙菌素 有关物质和含量测定 供试品色谱图 欧洲药典杂质标准色谱图

53 二、新增品种－延胡索酸泰妙菌素 有关物质和含量测定
EP对各相对保留时间的杂质都有明确规定：供试品溶液色谱图中如有杂质峰，相对保留时间约为0.25、0.3、0.5、0.6、0.8、1.1、1.3、1.4和2.3的单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积（1.0%）。 而实际考核9批样品在相对保留时间约为0.4普遍存在一个杂质峰，且该杂质峰的峰面积大于对照溶液的主峰面积的0.5倍。（见下表） 鉴于样品的复杂性，相对保留时间一般情况下无法准确定位、最后定稿为：单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积（1.0%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液峰面积的3倍（3.0%）。

54 各相对保留时间杂质峰占对照品主峰面积的倍数
二、新增品种－延胡索酸泰妙菌素 有关物质和含量测定 批 号 各相对保留时间杂质峰占对照品主峰面积的倍数 0.25 0.3 0.5 0.6 0.8 1.1 1.3 1.4 2.3 0.4 大于0.5倍的其它峰 杂质和 1 0.60 0.22 / 0.23 0.33 无 1.5 2 0.35 3 0.12 0.54 0.70 2.0 4 0.51 0.17 0.07 0.05 0.40 0.15 0.39 1.8 5 0.55 0.16 0.06 0.29 6 0.47 0.04 0.08 0.28 1.7 7 0.27 0.09 0.13 0.32 8 0.20 0.43 1.2 9 0.21

55 二、新增品种－延胡索酸泰妙菌素 延胡索酸测定
取供试品约0.2g,精密称定，加50%乙醇溶液60ml溶解后，照电位滴定法（附录0701）用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于5.804mg的延胡索酸,滴定结果用空白试验校正。按干燥品计算，含延胡索酸应为18.6%～19.4%（98%～102%）。 延胡索酸与泰妙菌素1:1成盐，其理论含量为19.0%。 鉴别 按上述HPLC方法，色谱图中出现延胡索酸和泰妙菌素两个峰，因此可同时进行延胡索酸和泰妙菌素的鉴别。

56 二、新增品种－苄星氯唑西林 原名：苄星邻氯青霉素，为氯唑西林的二苄基乙二胺盐。
国内标准：原收录在《兽药质量标准》2003年版以及新颁布的《兽药国家标准（化学药品、中药卷）》第一册中，但原名为苄星邻氯青霉素注射液。 国外标准：美国和英国药典中均已收录。 《中国兽药典》2010年版第一次收入了乳房注入剂制剂通则，配合该制剂通则，2010版药典中就拟收入该品种，由于方法未研究充分，直至本版药典才完成。

57 二、新增品种－苄星氯唑西林 氯唑西林含量测定 二苄基乙二胺的含量测定
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1mol/L磷酸二氢钠溶液-乙腈（3：1），用磷酸调pH值至4.6±0.2为流动相；检测波长220nm；柱温40℃。理论板数按氯唑西林计算不低于3000。 二苄基乙二胺的含量测定 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（端基封尾）；以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至5.1）-乙腈（87:13）为流动相；检测波长为220nm。理论板数按二苄基乙二胺峰计算不低于3000，拖尾因子应不得过2.0。

58 二、新增品种－苄星氯唑西林 注意：二苄基乙二胺对色谱柱的要求较高，应采用端基封尾的色谱柱 无菌检查是该品种的难点：苄星氯唑西林在水中不溶
原料无菌检查： 原标准：取本品约0.6g，加30%吐温80ml，摇匀，取1ml置含青霉素酶500万单位的瓶内，取1ml用薄膜过滤法处理后，依法检查。问题：检查量太少，无代表性。 USP34标准：将供试品加入青霉素酶和含0.5%吐温80的无菌培养基中，按直接接种法测定。问题：消耗大量酶，且接入培养基后，培养基混浊，无法观察。

59 二、新增品种－苄星氯唑西林 无菌检查是该品种的难点：
原料无菌方法 取供试品10g，加入无菌聚山梨酯80 10g，搅拌使供试品浸润。加无菌十四烷酸异丙酯50ml，混匀，转至500ml无菌分液漏斗中，充分摇匀，静置4分钟，缓慢排出下层沉淀，取全部上清液，加无菌十四烷酸异丙酯200ml，摇匀，经薄膜过滤法处理，每管培养基中加入不少于600万单位青霉素酶溶液，依法检查（附录1101），应符合规定。

60 二、新增品种－苄星氯唑西林 无菌检查是该品种的难点 注入剂无菌 注入剂为灭菌油混悬液，辅料包括注射用油、单硬脂酸甘油酯等。
注入剂无菌 注入剂为灭菌油混悬液，辅料包括注射用油、单硬脂酸甘油酯等。 按原标准取本品不少于2瓶，检查量太少，不符合要求。 新无菌方法－萃取离心与薄膜过滤相结合的方法。

61 二、新增品种－苄星氯唑西林 无菌检查是该品种的难点
注入剂无菌 取本品约100ml，加无菌十四烷酸异丙酯200ml，摇匀，再加无菌pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液400ml，充分振摇后，离心20分钟（每分钟3000转），取全部下层溶液，置无菌分液漏斗中，振摇，静置使油水明显分层，取全部水层，用无菌pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释至800ml；照薄膜过滤法处理，用含0.1%聚山梨酯80的无菌pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液为冲洗液，每张滤膜冲洗量为400ml，分8次冲洗后；再用0.9%无菌氯化钠溶液冲洗3次，每张滤膜每次冲洗量为50ml。每管培养基中加入不少于600万单位的青霉素酶溶液，摇匀，置37℃下作用1小时，依法检查（附录1101），应符合规定。

62 二、新增品种－苄星氯唑西林 无菌检查是该品种的难点 注入剂无菌测定时应注意：
在弃去上层和中层的液体和药物时，用无菌一次性吸管紧贴离心管壁旋转一周，使黏贴在离心管壁的药物层脱离管壁，以便倒出，倒出时可以用吸管轻轻的往外剥离，以提高效率。 在吹打液体混匀时，不要吹打高于液体并粘附于管壁的药物，使药物尽量去除干净。 应充分清洗干净，为了防止残余抗生素干扰测定，还应加入中和用的青霉素酶。

63 硫酸头孢喹肟是兽医专用第四代头孢类抗生素。 本标准是对现有的7个部颁质量标准的统一。 C23H24N6O5S2 · H2SO4 626.61
二、新增品种－头孢喹肟 硫酸头孢喹肟是兽医专用第四代头孢类抗生素。 本标准是对现有的7个部颁质量标准的统一。 C23H24N6O5S2 · H2SO

64 晶型确认 经热分析确认，该化合物不含结晶水。
二、新增品种－头孢喹肟 晶型确认 经热分析确认，该化合物不含结晶水。

65 二、新增品种－头孢喹肟 有关物质 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.025mol/L高氯酸钠溶液-磷酸-乙腈（1000∶12∶115）（用三乙胺调节pH值至3.6）为流动相；检测波长为270nm。取头孢噻肟约25mg，加流动相100ml使溶解，另取头孢喹肟约25mg，置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀；取5ml置25ml量瓶中，加上述头孢噻肟溶液1 ml，用流动相稀释至刻度。取20µl注入液相色谱仪，记录色谱图，头孢喹肟与头孢噻肟的分离度应大于1.0。 取5,6,7,8-四氢喹啉对照品适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含5μg的溶液，量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。

66 二、新增品种－头孢喹肟 有关物质 标准上写2,3-环己基吡啶，有标准上写2,3-环己烷吡啶，现统一修订为化学名称：5,6,7,8-四氢喹啉
原7个部颁标准中描写5,6,7,8-四氢喹啉与头孢喹肟相对保留时间有0.20，也有0.3的，为准确定位并判断杂质峰，修订标准中增加5,6,7,8-四氢喹啉对照定位。 随着样品溶液放置时间的增长，5,6,7,8-四氢喹啉峰面积会逐渐增大，为防止样品溶液因放置而影响检测结果，增加：“临用现配”注意事项。另外实验单位在检测过程中采取4℃控温低温进样。

67 二、新增品种－头孢喹肟 有关物质 5,6,7,8-四氢喹啉对照溶液色谱图 头孢喹肟 头孢噻肟 系统适用性色谱图

68 三、修订品种 序号 名称 修订情况 1 吉他霉素 修订【性状】，删除“味苦” 。 吉他霉素预混剂
吉他霉素预混剂 增加了100g:30g（3000万单位）规格 2 伊维菌素注射液 增加规格 3 红霉素 1.增加附注：红霉素组分色谱图和各组分结构、名称、分子式。 2.删去“红霉素维生素B、C组分”和“红霉素A组分”，合并为“红霉素组分”； 3.单独列出“有关物质”项。 4 阿莫西林 修订【检查】项下“阿莫西林聚合物”的计算方法。 5 纯化水 修订【检查】项下“微生物限度” 6 青霉素钠 1.增加“附：有关物质色谱图和各杂质信息”； 2.修订【检查】项下的“有关物质” 注射用青霉素钠 增加规格2.4 g（400万单位）

69 三、修订品种 序号 名称 修订情况 7 苯唑西林钠 增加“附：杂质信息” 注射用苯唑西林钠 增加规格2.0g 8 乳糖酸红霉素
注射用苯唑西林钠 增加规格2.0g 8 乳糖酸红霉素 修订【检查】项下“红霉素A组分测定法”的限度。88.0%→59.1% 9 氟苯尼考 修订【检查】项下“有关物质” 氟苯尼考注射液 增加规格 10 盐酸大观霉素盐酸林可霉素可溶性粉 增加规格100g∶大观霉素10g（1000万单位）与林可霉素5g（按C18H34N2O6S计算） 11 注射用盐酸四环素 1.修订【检查】项下“有关物质”：浓度由每ml含0.5mg改为0.8mg； 2.增加规格

70 三、修订品种 序号 名称 修订情况 12 盐酸多西环素片 增加规格 13 氨苄西林钠 修订【鉴别】项的红外 14 酒石酸吉他霉素可溶性粉
15 替米考星 1.修订【鉴别】（1）、 2.【检查】项下“有关物质”、 3.【含量测定】 替米考星预混剂 修订【鉴别】 替米考星溶液 1.增加规格； 2.修订【性状】 16 硫氰酸红霉素 增加【检查】项下“红霉素B﹑C组分及有关物质”、“硫氰酸盐”和“红霉素A组分” 硫氰酸红霉素可溶性粉 1.增加【检查】项下“红霉素A组分”，2.增加规格

71 三、修订品种 序号 名称 修订情况 17 硫酸卡那霉素 修订【检查】项下“无菌”：薄膜过滤前的处理方法不同。 18 硫酸庆大霉素
1.修订【性状】下的溶解性; 2.【检查】项下“硫酸盐”液相法改为滴定法、【检查】项下“有关物质”：总杂质限度5.0%→4.5%；“庆大霉素C组分”：改变色谱条件等 硫酸庆大霉素注射液 1.修订【性状】; 2.【有关物质】和“庆大霉素C组分” 19 硫酸链霉素 修订【性状】：删去味微苦 硫酸链霉素可溶性粉 增加规格 20 氯唑西林钠 修订【性状】：删去味苦

72 三、修订品种－替米考星 本品为大环内酯类药物，抗菌作用与泰乐菌素相似，主要抗革兰氏阳性菌，对少数革兰氏阴性菌和支原体也有效。对胸膜肺炎放线杆菌、巴氏杆菌及畜禽支原体的活性比泰乐菌素强。95%的溶血性巴氏杆菌菌株对本品敏感。主要用于防治家畜肺炎、禽支原体病及泌乳动物乳腺炎。 替米考星原料及3个制剂的标准在《中国兽药典》一部（2005年版）中正式统一收录，美国药典中收载有替米考星原料及注射液的质量标准。

73 三、修订品种－替米考星 【鉴别】 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液替米考星顺式异构体峰和反式异构体峰的保留时间应与对照品溶液两峰的保留时间一致。 替米考星反式异构体保留时间（min） 替米考星顺式异构体保留时间(min) 中监所对照品 8.5 9.7 企业A 8.6 9.8 企业B 企业C

74 三、修订品种－替米考星

75 三、修订品种－替米考星 《中国兽药典》中收载的有关物质方法与最新版的USP35标准略有不同，主要体现在梯度洗脱过程中流动相比例的变化、相对保留时间的变化和增加了供试品溶液的使用期限规定。

76 三、修订品种－替米考星 2010版兽药典 USP35 流动相比例 梯度洗脱：0-30分钟 流动相A与B的比例从80:20线性变化到58:42
2010版兽药典 USP35 流动相比例 梯度洗脱：0-30分钟　流动相A与B的比例从80:20线性变化到58:42 梯度洗脱：0-30分钟　流动相A与B的比例从82:18线性变化到60:40 相对保留时间 替米考星反式异构体（两个不完全分开的峰）的相对保留时间为0.8，替米考星顺式异构体的相对保留时间为1.0，替米考星顺式-8-差向异构体的相对保留时间为1.2。 替米考星反式异构体（两个不完全分开的峰）的相对保留时间为0.9，替米考星顺式异构体的相对保留时间为1.0，替米考星顺式-8-差向异构体的相对保留时间为1.1。 供试品溶液的使用期限规定 无 24小时内使用

77 三、修订品种－替米考星 USP35 CVP2010 企业 进样次数 最大单个杂质含量（%） 总杂质含量(%) A 第1针 1.6 9.2
USP35 CVP2010 企业 进样次数 最大单个杂质含量（%） 总杂质含量(%) A 第1针 1.6 9.2 第2针 9.1 9.4 B 1.0 6.3 7.0 6.7 C 2.1 7.5 7.3

78 三、修订品种－替米考星 USP35 CVP2010 生产企业 比较项目 反式异构体 顺式异构体 顺-8-差向异构体 A 保留时间 9.309
USP35 CVP2010 生产企业 比较项目 反式异构体 顺式异构体 顺-8-差向异构体 A 保留时间 9.309 9.911 10.865 9.099 9.961 11.106 9.306 10.866 9.367 10.242 11.414 相对保留时间 0.9 1.0 1.1 B 9.262 9.873 10.799 9.128 9.977 11.097 9.314 9.923 10.864 8.729 9.560 10.644 C 9.290 9.891 10.838 9.516 10.403 11.605 9.118 9.714 10.646 9.526 10.422 11.651

79 三、修订品种－替米考星 时间（h） 最大单个杂质峰面积 总杂质峰面积 最大单个杂质含量（%） 总杂质含量(%) 991486 3405640
991486 2.06 7.06 2 2.08 7.63 4 985311 2.04 7.36 6 985725 7.46 8 985216 7.39 10 984870 7.50 12 980978 2.03 7.31 14 989622 2.05 7.70 16 991366 7.59 18 7.48 20 999728 2.07 7.56 22 997114 7.64 24 996715

80 三、修订品种－硫氰酸红霉素 目前有4家原料生产厂，这次修订3家企业提供了原料。
增加了“红霉素组分、有关物质和硫氰盐”的检查，使标准更严谨完善。方法依据：2010版兽药典中红霉素组分和有关物质的液相色谱方法。 色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐溶液（取磷 酸氢二钾8.7g，加水1000ml，用20%磷酸溶液调节pH值至8.2）-乙腈（40∶60）为流动相；流速为每分钟0.8~1.0ml；柱温35℃；检测波长为215nm。取红霉素标准品适量，130℃加热破坏4小时，加甲醇适量（10mg加甲醇1ml）溶解后，用磷酸盐缓冲液（pH7.0)-甲醇（15:1）稀释制成每1ml中约含4mg的溶液，取20μl注入液相色谱仪。

81 三、修订品种－红霉素（红霉素A组分） 出峰顺序：红霉素C、红霉素A、杂质1、红霉素B和红霉素烯醇醚峰

82 三、修订品种－硫氰酸红霉素 原料红霉素A组分结果 生产企业 生产批号 取样量 峰面积 检测结果 干燥品计（%） A 130411-111
82.26% 87.7 83.14% 81.6 83.20% 88.2 B 78.92% 83.9 78.60% 83.5 78.61% C 85.27% 90.6 84.97% 89.7 85.30% 90.2 原料红霉素A组分结果

83 三、修订品种－硫氰酸红霉素 原料红霉素A组分限度依据：根据红霉素A的限度不得少于88.0%，按1:1硫氰酸成盐计，红霉素与硫氰酸红霉素的分子量分别为733.94和793.02，则红霉素A的理论限度应为：88.0%×733.94/793.02×100%=81.40% 适当放宽限度为80.0%，各企业结果也均在此限度范围内。

84 三、修订品种－硫氰酸红霉素 原料红霉素B、C组分和有关物质结果 A/批号 供试品溶液（峰面积） 对照溶液峰面积 （0.6倍） C峰 B峰
（0.7校正后） 杂质1 （0.15校正后） 烯醇醚 （0.09校正后） 杂质 总和 最大 杂质峰 130411 -111 37806 \ 95392 （14309） 73439 （6610） 113958 47361 93656 （56194） 130508 39102 96531 （14480） 70442 （6340） 116859 51301 93160 （55896） 130507 -113 36911 95403 （14310） 67860 （6107） 100169 46575 94814 （56888） 结论 不符合规定 原料红霉素B、C组分和有关物质结果

85 三、修订品种－红霉素 原料红霉素B、C组分和有关物质结果 B/批号 供试品溶液（峰面积） 对照溶液峰面积 （0.6倍） C峰 B峰
（0.7校正后） 杂质1 （0.15校正后） 烯醇醚 （0.09校正后） 杂质 总和 最大 杂质峰 96092 27796 （19457） 34901 （5235） 97486 （8774） 74398 39053 108774 （65264） 97901 26757 （18730） 35499 （5325） 92651 （8339） 74802 37543 110956 （66574） 97371 27267 （19087） 35121 （5268） 90116 （8110） 76089 37749 106841 （64105） 结论 符合规定 原料红霉素B、C组分和有关物质结果

86 三、修订品种－硫氰酸红霉素 红霉素B、C组分和有关物质结果 C/批号 供试品溶液（峰面积） 对照溶液峰面积 （0.6倍） C峰 B峰
（0.7校正后） 杂质1 （0.15校正后） 烯醇醚 （0.09校正后） 杂质 总和 最大 杂质峰 21169 13914 （9740） \ 109874 （9889） 25734 59153 （35492） 20839 12786 （8950） 105139 （9463） 23665 57765 （34659） 18915 12228 （8560） 107275 （9655） 24671 61842 （37105） 结论 符合规定 红霉素B、C组分和有关物质结果 红霉素B、C组分和有关物质限度依据：与红霉素一致。

87 三、修订品种－硫氰酸盐红霉素 硫氰酸盐测定结果 企业 A B C 批号 结果 （%） 6.69 6.57 6.55 6.93 6.97
130411 -111 130508 130507 -113 12035 0230 0250 0240 2013 03238 03239 03240 结果 （%） 6.69 6.57 6.55 6.93 6.97 6.66 6.52 6.58 结论 符合规定 硫氰酸盐测定结果

88 三、修订品种－硫氰酸红霉素 硫氰酸： 测定方法：取本品约0.1g，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，精密量取2ml，置50ml棕色量瓶中，加三氯化铁试液1ml，用甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液；取105℃干燥1小时的硫氰酸钾2份，各约0.1g，精密称定，分别置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，再精密量取2ml，置50ml棕色量瓶中，加三氯化铁试液1ml，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；量取三氯化铁试液1ml，置50ml棕色量瓶中，用甲醇稀释至刻度作为空白溶液。照紫外-可见分光光度法(附录0401)，在492nm波长处分别测定吸光度（供试品溶液、对照品溶液和空白溶液均应在30分钟内测定）。

89 三、修订品种－硫氰酸红霉素 硫氰酸： 限度依据：按1:1硫氰酸成盐计，硫氰酸根的理论含量应为7.45% 。
而3家企业的测定结果均在6.5%～7.0%范围内，说明成盐量偏低。 两者结合确定限度为6.0%～8.0%。

90 三、修订品种－硫氰酸红霉素 硫氰酸红霉素可溶性粉： 同样增加了红霉素A组分测定，限度制订依据同原料。 A 20130401 3202454
生产企业 生产批号 峰面积 检测结果 标准规定 A 82.18% 应不少于76.0% 81.04% 82.52% B 81.64% 80.96% 78.39% C 373094 12.27% 270859 8.92% 278658 9.16% 更好地控制企业产品的质量

91 四、兽用化学药品国家标准物质 通则和制备指导原则
新版兽药典第一次增加标准物质有关的2个附录 兽用化学药品国家标准物质通则 兽药国家标准物质制备指导原则 意义： 第一次系统阐述了兽药标准物质的定义，确定了兽药标准物质的分级和分类，规范了标准物质的制备和使用。 第一次明确地向大家揭开了标准物质制备的面纱，有利于企业制备新标准物质和工作标准物质。有利于更多单位主动参与到兽药标准物质的制备中。

92 四、兽用化学药品国家标准物质 通则和制备指导原则
定义 兽用化学药品国家标准物质系指供国家法定兽用化学药品标准中兽药的物理、化学及生物学等测试用，具有确定的特性或量值，用于校准设备、评价测量方法、给供试兽药赋值或鉴别用的物质。 特性 稳定性：所选原料稳定，可选用活性成分相同盐基不同的原料、稳定的晶型－稳定性检验、监测； 均匀性：同批均质－均匀性检验； 准确性。

93 四、兽用化学药品国家标准物质 标准物质通则和制备指导原则
标定：须经3家以上实验室协作完成。参加标定单位应采用统一的设计方案、统一的方法和统一的记录格式，标定结果应经统计学处理。 使用：只在规定的用途中使用有效。如果作为其他目的使用，其适用性由使用者自行决定。 稳定性监测：定期监测，确保兽用化学药品国家标准物质正常贮存的质量。

94 四、兽用化学药品国家标准物质通则和指导原则
分类：标准品和对照品 标准品，系指含有单一成分或混合组分，用于生物检定、抗生素或生化药品中效价、毒性或含量测定的兽用化学药品国家标准物质。其生物学活性以国际单位（IU）、单位（U）或以重量单位（g，mg，μg）表示。 对照品，系指含有单一成分、组合成分或混合组分，用于化学药品、抗生素、部分生化药品、药用辅料、中药材（含饮片）、提取物、中成药、生物制品（理化测定）等检验及仪器校准用的兽用化学药品国家标准物质。

95 四、兽用化学药品国家标准物质通则和制备指导原则
在通则基础上进一步细化了制备要求 结构确证：适用于第一次新制备的标准物质－质谱、核磁共振、热分析、红外、紫外、元素分析、液相等。 理化性质检查：性状、熔点、比旋度、晶型以及干燥失重、引湿性等。 纯度和有关物质检查：应根据兽药标准物质的使用要求确定纯度及有关物质的检查项，如反应中间体、副产物及相关杂质等。

96 四、兽用化学药品国家标准物质通则和制备指导原则
均匀性检验 定值 定值原则：测定一个候选化学标准品/对照品含量时，水分、有机溶剂、无机杂质和有机成分测定结果的总和应为100%。 定值方式： 1）绝对或权威方法定值； 2）2种以上不同原理的已知准确度的可靠方法定值； 3）多个实验室协作标定定值。

97 四、兽用化学药品国家标准物质通则和制备指导原则
稳定性考察 时间间隔：先密后疏，应有多个时间间隔； 考察样品随机抽取，样品数有足够代表性； 有多个特性量值时，应选择易变的和有代表性的特性量值进行稳定性考察。

98 Thank You ! 谢谢大家的耐心 祝各位每天好心情