第三章 血型与输血（2） 魏彦刚 菏泽医学专科学校.

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1 第三章 血型与输血（2） 魏彦刚 菏泽医学专科学校

2 三、Rh血型系统 Rh阳性：含D抗原的红细胞 Rh阴性：不含D抗原的红细胞 汉族人中Rh阴性率﹤1%

3 （一）Rh血型系统抗体 1. Rh抗体的产生 Rh抗体绝大多数是通过Rh血型不合输血或妊娠产生的免疫性抗体，这些抗体均为IgG
2. Rh抗体的种类 主要有5种，即抗D、抗E、抗C、抗c、抗e，最常见的是抗D，凡被检红细胞和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集为Rh阴性 3. Rh抗体的特性 为免疫性抗体IgG

4 （二）Rh血型鉴定方法及评价 1. 酶介质法 分为直接酶介质法、间接酶介质法
1. 酶介质法 分为直接酶介质法、间接酶介质法 2. 抗球蛋白试验（Coombs test） 分为直接抗球蛋白试验（DAT）和间接抗球蛋白试验（IAT） 3. 凝聚胺试验（polybrene test） 4. 人源盐水介质抗D试验 (临床应用广泛) 5. 低离子强度（盐）溶液试验

5 1. 酶介质法 在酶处理下 IgG抗体可凝集RBC

6 1. 酶介质法 阳性 阴性 37 ℃  37℃ 水浴30分钟 离心 看结果

7 2.抗球蛋白（Coombs）试验 DAT（直抗）:直接检测红细胞表面有无不完全抗体吸附的试验。
IAT（间抗）：通过体外致敏红细胞，再检测红细胞上有无不完全抗体吸附的试验。

8 IgM抗体凝集RBC示意图 在盐水介质中

9 在盐水介质中、 IgG抗体不凝集RBC

10 2.抗球蛋白试验 抗球蛋白

11 3.凝聚胺技术 原理 凝聚胺（Polybrene），一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。

12 在凝聚胺处理下 IgG抗体可凝集RBC

13 4.人源盐水介质试验 临床应用广范 原理：加入蛋白变性剂，使IgG抗D抗体转变为类似大分子的“IgM”，在盐水中发生肉眼可见的凝集反应。

14 当溶液中离子增多时，抗原抗体之间的静电作用力减弱
5.LISS(低离子强度溶液)的原理 抗原 非离子 静电作用力 抗体 离子 当溶液中离子增多时，抗原抗体之间的静电作用力减弱 当溶液中缺少离子时，抗原抗体之间的静电作用力较强

15 （三）Rh血型鉴定的临床意义 1. 输血前的检查 2. 新生儿溶血病诊断 3. 协助治疗

16 医院坚持验血后输血 失血孕妇苦等6小时逝去 稀有血型孕妇董明霞在引产时出现大出血，家属要求先输血救命并愿意承担一切后果，但医院坚持严格按照法律规定输血。经过6个多小时的焦虑等待，这位山东济阳的孕妇终于9日下午在山东大学齐鲁医院含恨死去。（齐鲁晚报－ 2008年10月10日）

17 血液中心冷冻库提供的4个单位（800ml）RH阴性O型血浆，每个单位按照常规最快也要3个小时才能解冻，且不能满足需要，只能临时从稀有血型志愿者中采集7个单位（1400ml）的血液，这样的血液又需要3个小时的检验，待其筹足之时，抢救的最佳时间已经过去 。

18 尽管病人家属要求先输血救命并愿意承担一切后果，但医院仍坚持严格按照法律规定等到血液检验完毕才能输血。经过6个多小时等待后，引产大出血的济阳患者董明霞最终于9日下午不幸去世

19 一个省会所在的大医院，为什么自己不备有RH阴性O型等稀有血浆？为什么不建立稀有血型志愿者队伍？在紧急情况下，为什么不及时组织稀有血志愿者紧急采集 ？

20 四、红细胞血型系统交叉配血试验

21 交叉配血试验的原理 交叉配血试验中红细胞血型抗原与相应抗体的凝集反应，可用盐水配血试验、酶介质试验 、抗球蛋白试验、凝聚胺试验、低离子强度溶液试验及微柱凝胶试验进行观察。

22 盐水介质配血方法 阳性 阴性 患者 献血者 主侧 次侧 离心 看结果

23 交叉配血试验（盐水配血法） 原理 ：完全抗体分子链较长，在电解质学液中，能克服红细胞表面电荷排斥力，与相对应的抗原结合，使红细胞凝集，从而发现配血不合，有对应抗原抗体存在。 方法： 1、自被检者静脉采血2~3ml,分离血清，并配制5%红细胞悬液。 2、主侧：病人血清+献血员红细胞 次侧：献血员血清+病人红细胞 混匀，1000转/分，然后观察结果。

24 报告方式： 交叉配合试验（**法） 受血者***（*）型血清+***（*）型红细胞不凝集，无溶血。 受血者***红细胞+***血清不凝集。无溶血 结果判断： 同型配血，主侧、次侧均不凝集，表示无配血禁忌，可以输血；异型配血时，主侧无凝集，无溶血，次侧凝集，但效价<1：64，无溶血，可以输给少量，如次侧不凝集时，应追查原因。

25 大量交叉配血 献血员之间应进行交叉配备 如：献1血清+献2红细胞 献1红细胞+献2血清

26 抗球蛋白配血方法 患者 37 ℃  主侧 37℃ 水浴30分钟 三洗 次侧 献血者

27 抗球蛋白方法配血方法 阳性 抗球蛋白试剂 上海市血液中心血 加抗球蛋白 离心 看结果 阴性

28 酶介质配血方法 患者 献血者 主侧 次侧 酶 上海市血液中心血 主次侧 均加酶

29 酶介质配血方法 阳性 阴性 37 ℃  37℃ 水浴30分钟 离心 看结果

30 凝聚胺技术 原理 凝聚胺（Polybrene），一种高价离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。

31  聚凝胺(Polybrene)配血方法 Polybrene 患者 主侧 室温放置 主次侧均 1 分钟 加聚凝胺 次侧 献血者
上海市血液中心血  室温放置 1 分钟 主次侧均 加聚凝胺

32 聚凝胺(Polybrene)配血方法 阳性 阴性 重悬液 上海市血液中心血 离心 主次侧均 加重悬液 看结果 聚凝胺引起红细胞非特异性凝集

33 基本操作方法 1、试管中加入待检血清或血浆1滴 2、加入用LIM溶液配置的2~3的红细胞悬液2~3滴 3、摇匀，室温放置1分钟（时间长，效果好） 4、加聚凝胺试剂1滴，混匀后3400rpm离心15秒 5、轻摇观察由聚凝胺引起的红细胞非特异性凝集，若未见红细胞凝集则需重做试验 6、加入1滴重悬液，轻摇观察结果 由聚凝胺引起的非特异性凝集应在1分钟内完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开

34 微柱凝胶介质配血法 红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶介质中发生凝集发应

35 凝胶试验使用的试剂和器材

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38 交叉配血试验的方法学评价 方法 优点 缺点 盐水配血试验 简单、快速 检不出IgG型抗体 酶介质试验 简便、经济 准确性、稳定性差
方法 优点 缺点 盐水配血试验 简单、快速 检不出IgG型抗体 酶介质试验 简便、经济 准确性、稳定性差 抗球蛋白试验 最准确、可靠 复杂、费时、试剂贵 凝聚胺试验 快速、准确 需特殊试剂及器材 微柱凝胶试验 灵敏 成本高

39 交叉配血的质量保证 ①检测前：标本、试剂及实验器材的要求 ②检测中：工作态度严谨，高度责任感 ③检测后：标本存放7天以上

40 交叉配血的临床意义 ① 保证输血安全 ② 发现亚型和不规则抗体

41 第五节 新生儿溶血病

42 (一)ABO新生儿溶血病 是由于母婴血型不合，母体的IgG抗A(B)经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。

43 ABO溶血症 父母血型匹配，子女才能优生。 如果父母血型不匹配，子女很可能得母婴血型不合溶血症。
此种溶血症主要发生在母亲为O型，婴儿为A型或B型者。所以也叫ABO溶血症。 父母血型匹配，子女才能优生。 如果父母血型不匹配，子女很可能得母婴血型不合溶血症。

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45 (二) Rh血型引起的新生儿溶血

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47 分娩 时胎儿 红细胞大量进入母体使母亲受到免疫

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52 HDN 的发病示意图

53 二、实验室检查（产前检查） 1. 血型鉴定 2.检查没亲血清中有无IgG性质的抗体并检测其效价 3.羊水分析

54 二、实验室检查 （患儿血标本检查） 直接抗球蛋白试验 红细胞抗体放散试验:与直接抗球蛋白相同，也是检测新生儿红细胞上是否存在免疫抗体。
游离抗体试验:是检测新生儿血清中的血型抗体。

55 三、新生儿溶血病治疗与预防 1.药物治疗与血浆置换 2. 提早分娩 3. 宫内换血 4.光照治疗与换血疗法 5.预防

56 第六节 自动化血型分析技术 1.微柱凝胶法 2.微板法(血站较普及) 3.全自动血型分析仪检测法

57 小结 本章节的重点内容是：ABO血型亚型、血型的鉴定、交叉配血的方法及临床意义！

58 课后练习 一、名词解释 血型 血型鉴正向定型 血型鉴反向定型 交叉配血试验 二、选择题 A IgM B IgG C IgE D 以上均是
血型 血型鉴正向定型 血型鉴反向定型 交叉配血试验 二、选择题 1、交叉配血时,当血清和红细胞发生肉眼可见的凝集反应,则血清中的抗体是 A IgM B IgG C IgE D 以上均是

59 2、ABO新生儿溶血症可见于母亲为O型,胎儿的血型可为
A A型 B B型 C A型和B型 D O型