第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析 Phenethylamine.

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1 第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析 Phenethylamine

2 一、结构 (Structure) 拟肾上腺素类药物，分子结构中具有苯乙胺基本结构 R1 R2 R3 HX 肾上腺素 (adrenaline)
盐酸克伦特罗 (clenbuterol hydrochloride) 硫酸沙丁胺醇 (salbutamol sulfate) 盐酸麻黄碱 (ephedrine hydrochloride)

3 二、化学性质 (feature) 弱碱性：烃胺基侧链，仲胺氮－弱碱性 游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水
酚羟基特性：邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络 合呈色；在空气中或遇光、热易氧化，色 泽变深；在碱性溶液中更易变色。 光学活性：手性碳原子，具有旋光性。 苯环取代基特性：如盐酸克伦特罗芳伯氨基； 紫外、红外吸收特性进行定性、定量分析。

4 三、鉴别试验 (identification)
1、与三氯化铁反应、与甲醛－硫酸反应 药物 三氯化铁 甲醛－硫酸 肾上腺素 Adrenaline 0.1mol/L盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫红色 红色 重酒石酸去甲肾上腺素 Noradrenaline bitartrate 翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，红色 淡红色 盐酸去氧肾上腺素 Phenylephrine hydrochloride 紫色 玫瑰红，橙红，深棕红 盐酸异丙肾上腺素 Isoprenaline hydrochloride 深绿色，滴加新制5%碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色 棕色，暗紫色 盐酸多巴胺 Dopamine hydrochloride 墨绿色，滴加1%氨溶液，显紫红色

5 三、鉴别试验 (identification)
2、氧化反应（酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色） 肾上腺素 盐酸异丙 重酒石酸 去甲肾上腺素 无色、微红色、 淡紫色 红棕色或紫色 酒石酸氢钾饱和液 pH 3.56 碘试液 放置5min 硫代硫酸钠 Notice : pH 6.5加碘，均被氧化为红色，无法区别三者

6 三、鉴别试验 (identification)
3、与亚硝基铁氰化钠反应(Rimini试验) 重酒石酸间羟胺的脂肪伯氨基 水 亚硝基铁氰化钠试液 重酒石酸间羟胺 红紫色 溶解 丙酮数滴，碳酸氢钠少量 △ 脂肪伯氨基的专属反应 丙酮不含有甲醛

7 三、鉴别试验 (identification)
4、双缩脲反应 盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱，芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲特征反应。 例：Chp2005，鉴别盐酸麻黄碱 方法：取本品1%水溶液1ml，加硫酸铜试液2滴与20%氢氧化钠液1ml，即显蓝紫色，加乙醚1ml振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。

8 三、鉴别试验 (identification)
5、紫外特征吸收 药物 溶剂 浓度(mg/ml) λnm (nm) 吸收度 (A) 重酒石酸间羟胺 水 0.10 272 盐酸异丙肾上腺素 0.05 280 0.50 盐酸多巴胺 0.5%硫酸 0.03 盐酸芬氟拉明 0.1mol/L盐酸 0.25 263, 270 盐酸苯乙双胍 0.01 234 0.60 盐酸克伦特罗 243, 296 硫酸沙丁胺醇 0.08 274 盐酸伪麻黄碱 251, 257, 263 红外特征吸收：上述药物还可采用红外吸收光谱进行鉴别。

9 四、特殊杂质检查 (Detection of specific impurities)
1、酮体检查 生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。 紫外分光光度法检查酮体的条件及要求 药物 检查的杂质 溶剂 样品浓度(mg/ml) 测定波长(nm) A 肾上腺素 肾上腺酮 HCl(9→2000) 2.0 310 不得过0.05 盐酸去氧肾上腺素 酮体 水 不得大于0.20 重酒石酸去甲肾上腺素 去甲肾上腺酮 不得大于0.05 盐酸异丙肾上腺素 不得大于0.15 盐酸甲氧明 酮胺 1.5 347 不得大于0.06

10 例：肾上腺素中肾上腺酮的检查 样品 供试品液(2.0mg/ml) A310nm 规定： A310nm≯0.05 盐酸溶液
(0.05mol/L) A310nm

11 四、特殊杂质检查 (Detection of specific impurities)
2、TLC法检查有关物质 例：盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇 检查方法：避光操作。取本品，加甲醇制成每1ml含20mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取上述溶液适量，加甲醇稀释成每1ml中含0.10mg的溶液，作为对照溶液。吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇－氯仿－浓氨溶液(80:5:15)为展开剂，展开后，晾干，喷以重氮苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。

12 特殊杂质检查 (Detection of specific impurities)
3、盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 有关双胍 取本品1.00g ，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，照纸色谱法试验，精密吸取上述溶液0.2ml ，分别点于两张色谱滤纸条(7.5cm ×50cm) 上，并以甲醇作空白点于另一色谱滤纸条，样点直径均为0.5 ～1cm ；照下行法，将上述色谱滤纸条同置展开室内，以醋酸乙酯－乙醇－水(6:3:1) 为展开剂，展开至前沿距下端约7cm 处，取出，晾干，用显色剂（取10％铁氰化钾溶液1ml ，加10％ 亚硝基铁氰化钠溶液与10％氢氧化钠溶液各1ml ，摇匀，放置15min，加水10ml与丙酮 12ml，混匀）喷其中一张点样纸条（有关双胍显红色带，Rf值约为0.1 ），参照此色谱带，在另一张点样及空白纸条上，剪取其相应部分并向外延伸1cm ，并分剪成碎条，精 密吸取甲醇各20ml分别进行萃取后，照分光光度法（附录Ⅳ A），在232nm 的波长处测定吸收度，不得过0.48。

13 含量测定 (Assay) 制剂： 比色法 紫外分光光度法 高效液相色谱法 原料： 非水溶液滴定法 溴量法 亚硝酸钠法

14 含量测定 (Assay) 1、溴量法—盐酸去氧肾上腺素和重酒石酸间羟胺 基本原理：
测定方法：取本品约0.1g，精密称定，置碘瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴 滴定液(0.1mol/L)50ml，再加盐酸5ml,立即密塞，放置15分钟并时时振摇，注意微开瓶 塞，加碘化钾试液10ml ，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至 近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每 1ml溴滴定液(0.1mol/L)相当于3.395mg 的C9H13NO2·HCl。

15 含量测定 (Assay) 2、比色法 测定原理：
注意：由于偶合剂（N-(1-萘基)-乙二胺）与亚硝酸也能显色干扰测定，所以在重氮化后，应加入氨基磺酸铵分解剩余的亚硝酸。

16 3、非水溶液滴定法 （一）背景知识 弱碱Kb≤10-8，水溶液中直接滴定没有明显的滴定突跃，终点难以判断。 非水的酸溶剂冰醋酸中，相对碱度显著增强，可用高氯酸的冰醋酸滴定液进行滴定。

17 （二）基本原理: BH+A- HClO4 BH+ClO4 HA 1、游离碱肾上腺素---酸碱反应
置换出的弱酸 游离碱类盐 HA酸性较强，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。

18 （三）方法 HClO4滴定 供试品 冰醋酸 结 果 空白试验校正 指示剂 若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml-5ml
+ 指示剂 若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml-5ml 10ml-30ml 碱性溶液pKb>10，冰醋酸中滴定突跃不明显，需加入醋酐，使碱性增强，突跃更明显

19 （四）问题讨论： 1.适用范围 主要用于Kb＜10-8的有机碱盐的含量测定。
碱性较弱的杂环类药物，采用合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使pKb为8～13的弱碱性药物采用本法滴定。 Kb 溶剂 10-8～10-10 冰醋酸 10-10～10-12 冰醋酸与醋酐的混合溶液 ＜10-12 醋酐 冰醋酸中加入适量甲酸，也能使滴定突跃显著增大。

20 咖啡因(pKb=14.2)

21 高氯酸＞氢溴酸＞硫酸＞盐酸＞硝酸＞磷酸＞有机酸
2.酸根的影响 (1)、醋酸介质中各种酸酸性顺序： 高氯酸＞氢溴酸＞硫酸＞盐酸＞硝酸＞磷酸＞有机酸 (2)、滴定液：高氯酸的醋酸溶液 但滴定置换出的酸酸性较强（如氢卤酸），反应不能进行到底 (3)、消除HX干扰的方法：加Hg(Ac) 冰醋酸溶液，生成难解离卤化汞 2B·HX + Hg(Ac)2 → 2B·HAc + HgX2 不足：测定结果偏低 过量(1～3倍)不影响测定结果

22 3.滴定剂的稳定性 溶剂：醋酸 具有挥发性，膨胀系数较大 温度和储藏条件影响滴定剂的浓度。 4.终点指示方法---电位法和指示剂法 电位法：电位滴定 指示剂法：结晶紫、萘酚苯甲醇、喹哪啶红 终点颜色由电位滴定确定

23 硫酸盐类药物：硫酸为二元酸，但在非水介质中只发生一级解离，生成HSO4- ，只能滴定到硫氢酸盐。
（五）、应用实例 游离弱碱性药物：肾上腺素 结晶紫为指示剂，非水溶液直接滴定，终点颜色绿色～蓝绿色。 氢卤酸盐类药物： 加入过量的醋酸汞冰醋酸溶液，形成难电离的卤化汞，用高氯酸滴定，以结晶紫、橙黄Ⅳ为指示剂，或电位法指示终点。 硫酸盐类药物：硫酸为二元酸，但在非水介质中只发生一级解离，生成HSO4- ，只能滴定到硫氢酸盐。

24 硝酸盐类： 滴定反应完全，但硝酸由于氧化性破坏指示剂使其变色 使用电位滴定法指示终点。 磷酸盐类：冰醋酸中酸性极弱，直接滴定。