1 Working Safety with Bloodborne Pathogens in the Laboratory 實驗室血液感染性病原之安全防護 林瑞燕 中央研究院學術事務組

2 目的 降低實驗室工作感染血液感染性病原的 危險 To minimize the risk for an occupationally acquired infection at the Academic Sinica.

3 簡介 操作人類血液、細胞、組織會面臨特殊 的危險。最明顯的例子為人體血液或體 液可能帶有 B 型肝炎病毒或 AIDS 病毒 若您需要操作這些實驗材料，施打 B 型肝 炎疫苗是非常重要的 加入中研院的人體細胞組織實驗操作安 全防護計畫 為避免因意外而感染，請注意以下之內 容及遵守安全操作程序

4 內容 職業感染血液感染性病原 防護計畫 緊急處理程序 警示標誌 安全防護操作

5 職業性血液感染性病原 Hepatitis B Hepatitis C HIV 其它應注意材料： Human Tumor Cells – Primary Cell Lines

6 其它潛在感染物 (OPIM) OPIM(Other Potentially Infectious Materials) ： – 人體體液：精液、陰道分泌物、腦脊液、關節 液、胸膜液、心包膜液、腹水、唾液、任何污 染到血液或體液的液體 – 未固定處理的人體組織或器官 –HIV ：包括細胞、組織培養、器官培養等 – 含有 HIV 或 HBV 之培養液或其它溶液 – 來自感染 HIV 或 HBV 之實驗動物的血液、器官 或其它組織

7 實驗室內血液傳染性病原之傳播 皮膚傷害： – 被污染之尖銳物 ( 針頭、刀片 ) 所傷 – 動物咬傷 – 設備傷害 濺灑： – 感染物傾倒 – 感染物滴落 – 離心 – 超音波打碎、震盪混勻

8 可能污染血液感染性病原之設備： 冷凍切片機 (Cryostats) 顯微注射器 (Microinjectors) 動物籠 (Animal Caging) 細胞離心機 (Cyrocentrifuges) 流速細胞分析儀 (Flowcytometers) 切片機 (Microtomes) 組織均質器 (Glass Tissue Homogenizers) 細胞收集器 (Cell Harvesters)

9 相關規定 ( 衛生署 ) 藥品非臨床試驗優良操作規範 ( 衛生署 ) 藥品非臨床試驗安全性規範 ( 衛生署 ) 人體細胞組織優良操作規範 ( 衛生署研擬 中 ) 基因治療人體試驗申請與操作規範 ( 衛生 署 )

10 中研院安全防護計畫

11 中央研究院 人體細胞組織實驗操作 安全防護資料調查表 （研擬中） 凡研究需利用具活性之人體組織 ( 包含血 液、器官、組織、細胞株或其他體液等 ) 為實驗材料者，必須填寫此表格，由實 驗室負責人同意後，送中央研究院生物 實驗安全委員會存檔備查

12 HIV 、 Hepatitis B & C 傳播方式： – 血液或可能感染之體液 – 病毒培養液、病毒感染之組織及濃縮之病毒

13 人類免疫缺乏病毒 (HIV) 原發性感染症狀：感染後約 2-6 星期 – 疲倦 – 似感冒症狀 – 體重減輕 – 淋巴腺腫大 隱形期：感染愛滋病毒後到出現臨床 症狀的期間，一般是 5-10 年，無特殊病 徵

14 台灣地區感染人類免疫缺乏病毒者依職業別統計表 民國 73 年 ~91 年 ( 衛生署疾病管制局資料 )

15 職業風險： HIV 感染愛滋病毒後，是否發病成為 AIDS – 病毒量多寡 – 感染者的免疫力 – 病毒種類 – 有無接受抗病毒藥物治療 – 伺機性感染的預防與治療

16 HIV 感染 意外發生一小時內處理 需盡速提出報告 目前仍無疫苗保護 醫療諮詢 藥物治療：衛生署自 1997 年 4 月開始免費 提供藥物，每位感染者及患者都可以在 指定醫院取得這些藥物 –

17 B & C 型肝炎病毒感染症狀 初期症狀 – 似感冒症狀 – 食慾降低 – 腹部不適 – 噁心、嘔吐 – 肌肉疼痛 二期症狀 – 黃疸

18 B 型肝炎病毒 (HBV) 感染 長期影響： – 帶原者： 15% - 20% 受感染者 – 慢性肝炎 – 肝硬化 – 肝癌

19 Ｂ型肝炎預防注射 1984 年陸續針對孕婦 HBsAg 檢驗呈現陽 性反應的新生兒施打 B 型肝炎疫苗 1986 年開始推行全國性新生兒Ｂ型肝炎 預防注射 目前國小一年級的帶原者比例已從未推 行疫苗接種之前的 10.5% 降到 1.7%

20 B 型肝炎疫苗 使用血液 /OPIM 為實驗材料者應接受 B 型 肝炎疫苗接種 三劑 B 型肝炎疫苗接種： – 第一劑 – 第二劑 ( 第一劑一個月後 ) – 第三劑 ( 第一劑六個月後 )

21 是否應接受 B 型肝炎疫苗接種 若從未檢查過 B 型肝炎病毒抗原及抗體， 則需抽血檢查 若為陽性，則曾感染 B 型肝炎病毒 (HBV) 若為陰性，則給予 B 型肝炎疫苗接種

22 疫苗接種之效果檢測 接種後，採血檢查疫苗接種效果 約有 10% 沒有抗體反應。其原因可能為： –>40 歲 – 體重 – 抽煙 – 免疫缺陷

23 感染 B 型肝炎病毒 (HBV) 目前尚無根治法  - 干擾素注射治療 口服藥 Lamivudine(3TC)

24 C 型肝炎病毒 (HCV) 感染 確認 C 型肝炎病毒 (HCV) 主要造成慢性肝病 許多病例為輸血感染

25 C 型肝炎病毒 (HCV) 感染之治療 目前尚無疫苗 目前尚無根治法 以  - 干擾素及口服 Ribavirin 合併治療

26 職業風險： HIV 、 HBV & HCV 一級風險：皮膚損傷 二級風險：濺灑污染

27 皮膚損傷之感染風險 HBV6%-30% HCV3%-10% HIV0.32%- 若較深之穿刺或較高效價 之病毒則感染風險更高

28 ★血液感染性病原污染之緊急處置 步驟一： – 污染之皮膚及傷口需以優碘擦洗十五分鐘， 而後以大量的水沖洗 – 污染之眼睛或黏膜需以生理鹽水沖洗十五分 鐘 步驟二： – 立刻通知實驗室負責人

29 步驟三： – 通報醫療中心：本院醫務室 – 必須在感染一小時內處理 – 若需緊急運送到醫院，請打 119 – 若醫療中心已下班，且感染源包含 HIV ，請 撥打 119 ，立即送醫。 ★血液感染性病原污染之緊急處置

30 避免感染 人員及技術 安全防護裝備 實驗室硬體設計

31 生物安全防護等級 (P/BL) P1 (BL1) ：低風險 P2 (BL2) ：中等風險 P3 (BL3) ：高風險 P4 (BL4) ：極高風險

32 警示標誌 可向本院學術事務組索取 ( ,

33 張貼於操作血液 /OPIM 之實驗區域 張貼於儲存血液 /OPIM 之冰箱。 標示於儲存或運送血 液 /OPIM 之容器。 標示於放置血液 /OPIM 廢棄物之容器。 警示標誌 可向本院學術事務組索取 ( ,

34 安全防護操作 生物安全操作櫃 使用尖銳物品 運送生物體 個人防護裝備 污染除污 廢棄物處理

35 生物安全操作櫃 (Biological Safety Cabinets; BSC) 保護人員 (Personnel) 保護實驗品 (Product) 保護環境 ( Environmental ) Chemical Fume Hoods ◎ Laminar Flow Clean Benches ◎ Class I BSC ◎◎ Class II & III BSC ◎◎◎

36 使用針頭針筒 除非必要，避免使用針筒、針頭及其他 尖銳器具。當必須使用這些器具時，要 小心操作以免意外刺傷或割傷 不用雙手套回針筒蓋 盡可能使用有安全設計之針頭針筒 使用過的針頭及拋棄式切割器具必須棄 置於有蓋、防漏、防破之容器中。使用 過的針頭不可重複使用、彎曲或折斷

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39 安全注射器 Self-sheathed protected position Retracted protected position Attached to syringe needle

40 使用防漏之雙層容器 使用之容器必須防漏，可滅菌處理，可 鎖蓋 容器上標示：內容物、實驗者姓名、實 驗室名稱及日期 標示： BIOHAZARD 不可使用私人車輛運送 不可使用大眾交通工具運送 私自運送需自負責任 運送感染性病原

41 個人防護裝備 手套 臉部保護：若可能發生濺灑意外時需戴 上臉部保護裝備 不宜穿著短褲、露趾鞋 實驗衣

42 個人防護裝備 - 手套 操作感染物時，必須戴手套 若手套污染，脫去污染手套、洗手、換 上新手套 脫去手套後必須洗手 若手上有傷口，戴上手套前先將傷口包 紮好 選擇合適大小、功能之手套

43 個人保護裝備 - 實驗衣 P2(BL2) 級以上實驗室必須穿著實驗衣 – 穿著時記得扣上鈕扣 – 注意污染 – 離開實驗室前脫下實驗衣

44 污染除污 每個人都必須負責對所使用的設備除污， 維持無污染狀態

45 消毒、殺菌 當污染發生時，至少消毒殺菌 分鐘 適用之消毒殺菌劑 –Chlorine Compounds such as Sodium Hypochlorite ( 家用漂白水 ) –Wescodyne (iodine with detergent) –Alcohol(70-85% Ethyl or Isopropyl)

46 Sodium Hypochlorite Disinfection 家用漂白水 每日配製 以水十倍稀釋

47 少量血液污染之除污 使用適當之個人防護裝備 以吸收材料覆蓋污染物 自污染外圍向內側加上消毒劑 反應 分鐘 清除污染 ( 血液必須完全擦乾淨 ) 以新的消毒劑消毒污染區 將污染廢棄物以生物感染性廢棄物處理

48 實驗室發生嚴重污染 緊急電話： 119

49 生物感染性廢棄物之處理方式 放置於專用垃圾袋及容器內 清除 –3/4 滿時即該清除 – 依各實驗室之標準程序進行垃圾清除 包裝 – 標示 (BIOHAZARD) – 不可用力擠壓

50 減少感染性廢棄物 垃圾分類 化學消毒、殺菌 滅菌 依各所之標準程序進行垃圾清除

51 實驗室工作者之責任 參加訓練課程 仔細考量是否應施打 B 型肝炎疫苗 安全之實驗操作 若有感染發生，立即通報

52 請牢記 自己必須負責自己在實驗室的安全。 The Ultimate Responsibility for Your Safety in the Laboratory Lies With You!

53 參考資料 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, NIH, 1999 Working Safety with HIV and Other Bloodborne Pathogens, NIH, 2002 行政院衛生署 衛生署疾病管制局