实验总则 实验室规则 显微镜的使用 寄生虫学实验方法 实验报告 白大衣、实验报告、绘图工具,按规定座位入座 不得迟到、早退或无故缺席 遵守纪律,保持实验室整洁、安静,禁止进食、吸烟 实验报告在规定的时间内完成 实验前后认真检查实验仪器、器材和实验标本,如有缺损立即向带教老师报告,放回或送还原处 实验课后值日学生应做好实验室清洁卫生工作,关好门、窗、水、电后方可离开 每人固定使用某一编号的显微镜 轻拿轻放,右手拿镜臂,左手托镜座,平拿平放 观察标本,依次低倍、高倍、油镜 两眼同时睁开 保持清洁,擦镜纸擦拭,勿口吹、手抹或布擦 不要随意取目镜 观察标本: 针插标本 大体标本 玻片标本:示教标本的观察:视野中央有指针指示, 观察时,用细调节器适当调节,请勿移动 玻片,以免影响其他同学观察 绘图工具 以精确为主,不得艺术加工渲染 点线图,(实线、虚线) 大小适宜、布局合理 文字注明结构,平行线引出
线虫实验 蛔虫、钩虫、鞭虫、蛲虫、丝虫、旋毛虫 自看标本: 受精蛔虫卵 钩虫卵 班氏微丝蚴 旋毛虫囊包 示教标本: 钩虫口囊 蛔虫唇瓣 鞭虫卵 蛲虫卵 蛔虫、钩虫、蛲虫、鞭虫等成虫
一 蛔虫(Ascaris lumbricoides) 目的要求 1 .掌握蛔虫受精卵与未受精卵的形态特征 2.认识蛔虫成虫的形态
区别 蛔虫受精卵与未受精卵的形态特征 大小形状(60 × 45 、90×40um) 卵壳薄厚(1 受精膜、2壳质层、3蛔甙层) 蛋白质膜层脱落 区别 大小形状(60 × 45 、90×40um) 卵壳薄厚(1 受精膜、2壳质层、3蛔甙层) 卵内容物(4 新月空隙,受精卵内卵细胞两周发育成幼虫)
二 鞭虫 (Trichuris trichlura) 目的要求 1.掌握鞭虫卵的形态特征 2.认识鞭虫成虫的形态 3.了解其寄生部位 外形类似马鞭,长约3—5cm,前3/5细长,尾部较粗 雌虫大于雄虫(尾端:雄虫环状卷曲,雌虫钝圆)
卵壳厚,卵壳外被呈黄褐色(与卵塞成鲜明对比) 鞭虫卵 诊断特征: 大小:长: 50 to 54 µm 短:22 to 23 µm 纺锤形 两端各一个透明的盖塞 卵壳厚,卵壳外被呈黄褐色(与卵塞成鲜明对比) 内含一个受精的卵细胞 卵壳 卵细胞 透明塞(盖塞)
(蠕形住肠线虫) (Enterobius vermicularis) 三蛲虫 (蠕形住肠线虫) (Enterobius vermicularis) 目的要求 1.掌握蛲虫卵的形态特征 2.认识蛲虫成虫的形态 3.了解其病原诊断方法
虫体细小乳白色,雌虫( 8~13×0.3~0.5mm ) 雄虫(2~ 5×0.1~0.2mm ) 体后端向腹面卷曲 头翼 虫体角皮具有横纹,头端角皮膨大,形成头翼。体两侧角皮突出如嵴,称侧翼。口囊不明显,口孔周围有三片唇瓣。。雌虫大小约为,.生殖系统为双管型,前后二子宫汇合通入阴道,阴门位于体前、中1/3交界处腹面正中线上,肛门位于体中、后1/3交界处腹面。,具有尾翼及数对乳突,生殖系统为单管型,泄殖腔开口于虫体尾端,有1根交合刺(图16-7)。 雌虫 雄虫 咽管球 成虫形态 虫体细小乳白色,雌虫( 8~13×0.3~0.5mm ) 雄虫(2~ 5×0.1~0.2mm ) 体后端向腹面卷曲 虫体中部膨大,尾端直而尖细,尖细部分为虫体长的1/3 头翼(虫体角皮具有横纹,前端角皮扩大) 咽管末端膨大呈球形,称咽管球
形状 :柿核状,一侧扁平,一侧隆起,两端不等宽 卵壳较厚透明,两层壳质,蛋白质膜光滑 卵内幼虫,内含蝌蚪期胚胎 卷曲的幼虫:卵细胞6小时发育为感染期幼虫 蛲虫卵形态 大小: 50~60×20~30um 形状 :柿核状,一侧扁平,一侧隆起,两端不等宽 卵壳较厚透明,两层壳质,蛋白质膜光滑 卵内幼虫,内含蝌蚪期胚胎
三 钩虫(hookworm) 目的要求 1.掌握钩虫卵的形态特征 2.了解两种钩虫的形态和鉴别
美洲钩虫 十二指肠钩虫 一对板齿 近端分支,再分2小枝 一刺包套于另一刺的凹槽内 两对钩齿 远端分支,再分3小枝 两刺长鬓状,末端分开
钩虫卵形态 大小:(57-76) X( 36-40) µm 形状:卵形或椭圆形 无色透明,卵壳薄,光滑 卵内数个已经分裂的卵细胞(4-8个) 卵细胞与壳有间隙
虫卵辨别 蛔虫卵 鞭虫卵 蛲虫卵 钩虫卵 类型 蛔虫卵 鞭虫卵 蛲虫卵 钩虫卵 大小 60 ×45µm 90×40µm 50 ~ 54 µm 形状 宽/长椭圆形 纺锤形 柿核状 卵形、椭圆形 卵壳 厚、透明 黄褐色 较厚、透明 薄、光滑 排出时 未分裂卵细胞 卵内蝌蚪胚 数个分裂细胞 结构 新月空隙 透明盖塞 卵壳与细胞中有间隙
丝虫(Filarial worm) 两个阶段六个环节 目的要求 掌握班氏微丝蚴,马来微丝蚴的形态特征 了解成虫寄生部位,中间宿主,感染方式与感染阶段 两个阶段六个环节 生物学特点: 成虫形如丝线,寄生于宿主体内的淋巴系统、皮下组织、结缔组织、肌肉和体腔 雌虫卵胎生,产生的幼虫称微丝蚴 人是丝虫关键或唯一终宿主,通过节肢动物叮咬传播 丝虫在终宿主内主要为成虫和微丝蚴两个阶段 人体内阶段: 丝状蚴—成虫—微丝蚴 蚊体内阶段: 微丝蚴—腊肠蚴—经过两次蜕皮—丝状蚴(感染期幼虫)
班氏丝虫与马来丝虫的鉴别要点 班氏丝虫微丝蚴 马来丝虫微丝蚴 头隙 长宽 相等 长大于 宽 体细 胞核 排列整齐 清晰可数 排列紧 尾核 无 密不可数 尾核 无 有两 体态 弯曲自然 体态僵硬 大小 长244-298微米,宽5.3微米 长177-230微米,宽约4.8 微米
乳糜尿 血性乳糜尿 正常尿 病原学诊断 一、血液检查(注意采血时间及血量) 鲜血检查法、厚血膜检查法 血液浓集法、海群生、日间诱出法 二、体液和尿液检查 收集患者淋巴液 睾丸鞘膜积液 乳糜尿 三、活组织检查 摘取病变组织 进行病理切片查虫体 乳糜尿 血性乳糜尿 正常尿
旋毛虫Trichinella spiralis 一种动物源性肠内兼组织内寄生线虫 寄生部位:成虫 宿主的十二指肠和空肠上段 幼虫 同一宿主横纹肌细胞内形成囊包 生活史过程必须更换宿主才能使虫种绵延 主要致病阶段:幼虫 致病过程:侵入期、幼虫移行期、囊包形成期 确诊依据:肌肉活检查见幼虫囊包 感染:生吃或半生吃受染的猪肉等肉类
2.幼虫囊包 幼虫形态 幼虫囊包寄生于宿主的横纹肌肉,呈梭形,其纵轴与肌纤维平行,囊包幼虫头端较细,尾端钝圆,咽管结构与成虫相似大小约为0.25~0.5×0.21~0.42mm。一个囊包内通常含有1-2条卷曲幼虫,也可达6~7条。
华支睾吸虫(肝吸虫) 目的和要求 1 掌握华支睾吸虫卵的形态特征 2 认识华支睾吸虫囊蚴的形态特征 3 了解成虫及其中间宿主
肝吸虫—虫卵形态 1 大小:29×17m 2 颜色:黄褐色 3 形状:芝麻状 内容物:毛蚴 华支睾吸虫虫卵光镜图 1 大小:29×17m 2 颜色:黄褐色 3 形状:芝麻状 内容物:毛蚴 结构:有小盖、峰,后端钝圆有一小棘,卵壳 较 厚,卵壳薄厚均匀 华支睾吸虫电镜图
肝吸虫—虫卵形态 蠕虫卵中我最小 形似芝麻棕黄色 上有盖来下有疣 肩峰明显内毛蚴
肝吸虫—成虫形态 共性 个性 1 长舌状/叶片状 ,背腹扁平 2 有口无肛 3 雌雄同体(血吸虫除外) 4 有口吸盘和腹吸盘 1 葵瓜籽状 肠支 腹吸盘 卵巢 睾丸 个性 华枝睾吸虫成虫 1 葵瓜籽状
肝吸虫—成虫形态 口吸盘 肠支 腹吸盘 卵巢 睾丸 华枝睾吸虫成虫电镜图 华枝睾吸虫成虫 1 葵瓜籽状 2 口吸盘大于腹吸盘
肝吸虫—各阶段形态 雷蚴 尾蚴 胞蚴 黑色的排泄囊位于一端 囊蚴 囊蚴
卵 —→ 毛蚴—→ 胞蚴…..→ 雷蚴…..—→ 尾蚴 —→ 囊蚴—→ 成虫 肝吸虫— 中间宿主 第一中间宿主 第二中间宿主 卵 —→ 毛蚴—→ 胞蚴…..→ 雷蚴…..—→ 尾蚴 —→ 囊蚴—→ 成虫 第一中间宿主 第二中间宿主 终宿主
卫氏并殖吸虫(肺吸虫) 目的和要求 1 掌握肺吸虫卵的形态特征 2 认识肺吸虫囊蚴的形态特征 3 了解成虫及其中间宿主
肺吸虫— 虫卵形态 1 形态:椭圆,呈金黄色,最宽处靠近卵盖一端。 2 盖大而平,稍倾斜(贝雷帽)肩峰不明显。 肺吸虫虫卵 肺吸虫与蛔虫卵 1 形态:椭圆,呈金黄色,最宽处靠近卵盖一端。 2 盖大而平,稍倾斜(贝雷帽)肩峰不明显。 3 卵壳薄厚不均,底部较厚(坛子)。 4 卵内有十余个卵黄细胞,卵细胞常位于中央
肺吸虫— 成虫形态 1 形态:半粒黄豆。 2 口腹吸盘大小相似。 3 食道短,肠管分两支波浪形。 子宫 卵巢 睾丸 1 形态:半粒黄豆。 2 口腹吸盘大小相似。 3 食道短,肠管分两支波浪形。 4 睾丸分叶状,左右并列,卵巢分叶状与子宫左右分布
肺吸虫— 各阶段形态 成虫寄生的肺部 肺吸虫囊蚴 毛蚴 肺吸虫病理标本 波浪状的弯曲的肠管,排泄囊位于中央 肺吸虫囊蚴
卵 —→ 毛蚴—→ 胞蚴…..→ 雷蚴…..—→ 尾蚴 —→ 囊蚴—→ 成虫 肺吸虫— 中间宿主 川卷螺 第一中间宿主 第二中间宿主 卵 —→ 毛蚴—→ 胞蚴…..→ 雷蚴…..—→ 尾蚴 —→ 囊蚴—→ 成虫 水 川卷螺 溪蠏 蝲蛄 人
布氏姜片吸虫 目的和要求 1 掌握姜片虫卵的形态特征 2 了解成虫、囊蚴及其中间宿主
1 形态:椭圆,淡黄色,人体寄生虫卵最大者。 2 卵壳薄,小盖不明显。 3 卵内有一个卵细胞和数十个卵黄细胞。
2 口吸盘小,腹吸盘大紧贴口吸盘,易误为口吸盘,吸盘强而有力 姜片虫成虫 1 外形类似姜片,背腹扁平。 2 口吸盘小,腹吸盘大紧贴口吸盘,易误为口吸盘,吸盘强而有力
日本血吸虫 目的和要求 1 掌握血吸虫卵的形态特征 2 认识毛蚴,尾蚴,钉螺的形态特征 3 了解成虫形态特点。
日本血吸虫卵 1 形态:椭圆,淡黄色,比蛔虫卵较大 卵壳薄,无盖,一侧有小棘(不易看到),表面常有宿主组织 卵内有一个成熟的毛蚴。毛蚴与卵壳间常见毛蚴分泌物呈大小不等圆,椭圆的油滴(可溶解性虫卵抗原) 4 活体标本可见虫卵周围大量炎细胞浸润,呈现放射状排列
日本血吸虫成虫 1 雄虫:短粗,乳白色,有抱雌沟 2 雌虫:细长,前端比较细,后半段呈灰褐色
湖北钉螺
绦虫实验 病原生物学系
目的和要求 猪肉绦虫 掌握头节,妊娠节,虫卵的形态特点 认识成虫,囊尾蚴形态特点 掌握头节,妊娠节的形态特点 了解牛肉绦虫的大体形态 掌握猪肉绦虫与牛肉绦虫的区别 认识棘球蚴砂和头节的形态特点 了解棘球蚴囊和成虫的大体形态 牛肉绦虫 细粒棘球 蚴绦虫
链状带绦虫—猪肉绦虫卵 特点:光学显微镜下不能区别 圆球形,棕黄色,卵壳薄,易脱落,多见无卵壳 胚膜较厚,有放射状条纹 内有六钩蚴
链状带绦虫—猪肉绦虫头节 头节特点:头节小,圆球形 四个吸盘,位于头部侧面 顶部有顶突,其上有两圈小钩
肥胖带绦虫(牛肉绦虫) 头节特点:略呈方形 四个吸盘,位于头顶部 无顶突和小钩
成节和孕节 卵巢左右两叶 有无中央小叶 猪肉绦虫:有 牛肉绦虫:无 子宫侧支数 猪肉绦虫:≤13 牛肉绦虫:≥15
囊尾蚴 猪绦囊尾蚴 半透明小囊,囊中充满囊液,囊壁上有一个 向内翻转卷曲的头节 头节有无顶突和小钩
猪带绦虫与牛带绦虫的鉴别要点 猪带绦虫 牛带绦虫 头节 成节 孕节 虫卵 球形 有顶突和小钩 方形 无顶突和小钩 卵巢分3叶 卵巢分2叶 子宫分支≥15 子宫分支≤13 虫卵 无区别
细粒棘球绦虫(包生绦虫) 头节呈梨状,有顶突和4个吸盘,顶突有两圈大小相间的小钩,28-48个,呈放射状, 成虫
棘球蚴 从囊壁脱落的原头蚴、生发囊和小的子囊悬浮在囊液中,称为棘球蚴砂或棘球砂 原头蚴 幼虫,圆形囊状提,不足一厘米-数十厘米,外面由纤维组织包围,囊腔内充满囊液,无色透明或微带黄色,原头蚴椭圆形或者圆形, 原头蚴 从囊壁脱落的原头蚴、生发囊和小的子囊悬浮在囊液中,称为棘球蚴砂或棘球砂
自看标本 受精蛔虫卵 注意: 钩虫卵 班式微丝蚴 旋毛虫囊包 带绦虫卵 棘球蚴砂 肝吸虫卵 8 1.按照学号入座,显微镜固定使用 2.取标本盒的时候,请按照学号依次拿取,使用完毕后,按学号依次叠放 3.示教标本间的标本请只看蠕虫部分 有罩子盖着的先不看
显微镜的使用 打开电源(位于右手边) 打开光源(电源的旁边) 将标本放置载物台 选取低倍镜 标本对准光圈,启用粗调细调寻找视野 找到目标后,调至高倍镜 看完标本后,重新调回低倍镜 继续观察标本 关闭:将光源调至1,物镜调至4倍,关闭电源,盖上罩子