第八章 人工授精.

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第八章 人工授精

人工授精 与“受精”( fertilization)注意区别。 概念:人工授精(Artificial Insemination,AI)是以人工的方法,使用器械采集雄性动物的精液,再用器械把经特定处理后的精液输入到雌性动物生殖道的特定部位,以代替雌、雄动物自然交配而繁殖后代的一种繁殖技术。 与“受精”( fertilization)注意区别。

第一节 概述 第二节 采精 第三节 精液品质检查 第四节 精液的稀释 第五节 精液的保存 第六节 输精

第一节 概述 一、人工授精在家畜生产中的意义 提高优良种公畜的配种效能和种用价值。 减少了种公畜的饲养头数,降低其饲养管理费用。 第一节 概述 一、人工授精在家畜生产中的意义 提高优良种公畜的配种效能和种用价值。 减少了种公畜的饲养头数,降低其饲养管理费用。 加快家畜品种改良速度,促进育种工作进程。 可防止各种接触性疾病的传播。 克服公、母畜因体格相差过大不易交配,或生殖道因某些异常不易受胎的困难,并能及时发现不孕症等生殖器官疾病,有利于提高母畜的受胎率。 冷冻精液可以长期保存和运输。

第二节 采精 一、采精的准备 (一)采精场 宽敞、平坦、清洁、安静

第二节 采精 (二)台畜的准备 台畜的选择必须满足种公畜的要求,可利用活台畜或者假台畜。 采精时用发情良好的母畜做台畜效果最好。 第二节 采精 (二)台畜的准备 台畜的选择必须满足种公畜的要求,可利用活台畜或者假台畜。 采精时用发情良好的母畜做台畜效果最好。 种牛站常常使用另一头种公畜作台畜。健康、体壮、大小适中、性情温顺、四肢有力。 采精前,将台畜保定在采精架内,台畜的尾根部、外阴部、肛门应清洗干净,采精时将尾巴缠在一侧。 采精用的假台畜和活台畜

假台畜 真台畜

第二节 采精 二、采精技术 假阴道法 手握法 电刺激采精法 按摩法 牛假阴道示意图

最佳状态 可用

挤出包皮液并擦干包皮

用三个手指锁定龟头

接取含精子多的精液

第二节 采精 电刺激采精法 各种动物电刺激采精的刺激参数

第三节 精液品质检查 一、精液的一般性状 (一)色泽 (二)气味 (三)状态 (四)pH (五)精液量

GB 4143-2008 牛冷冻精液 对冻精标准的要求。 第4章是强制性,其余为推荐性。活力定义。 代替GB/T 4143-1984

第三节 精液品质检查 二、精子活率 概念:精子活率是指精液中直线前进运动的精子数占总精子数的百分比。它与精子的受精能力密切相关,是评定精液品质的一个重要指标。一般在采精后、精液处理前后、输精前都应进行检查。 国标对精子活力的定义。

第三节 精液品质检查 二、精子活率 (一)目测法 普通显微镜 生物电视显微镜 (二)死活精子百分率 特定的染料对取样的精液进行染色

第三节 精液品质检查 三、精子密度 概念:精子密度,指每毫升精液中所含的精子数。精子密度的大小直接关系到精液稀释倍数和输精剂量的有效精子数,也是评定精液品质的重要指标之一。评定方法一般有目测法和计数法。

第三节 精液品质检查 三、精子密度 (一)目测法 (二)计数法(血细胞计计数法) 普通显微镜,分密、中、稀 3个等级 第三节 精液品质检查 三、精子密度 (一)目测法 普通显微镜,分密、中、稀 3个等级 (二)计数法(血细胞计计数法) 血细胞计计数法检查精子密度

估测法 密:在整个视野中,精子间空隙不明显,看不清单个精子运动。10亿/ml。

精子密度仪

(computer assistant semen assay, CASA) 计算机辅助精子分析 (computer assistant semen assay, CASA)

第三节 精液品质检查 四、精子的形态 概念:精子形态是否正常与受精率密切相关。如果精液中畸形、顶体异常的精子过多,则其受精能力必然降低,因此,为保证一定的受胎率,检查精子形态十分重要。 (一)精子畸形率 (二)精子顶体异常率

第三节 精液品质检查 四、精子的形态 (一)精子畸形率 第三节 精液品质检查 四、精子的形态 (一)精子畸形率 概念:畸形精子是指精液中形态不正常的精子,精子畸形率是精液中畸形精子数占精子总数的百分率。畸形精子一般有头部畸形、颈部畸形、中段畸形、主段畸形四类。在正常精液中,一般以精子尾部畸形比较多见,而头部和颈部畸形较少。

第三节 精液品质检查 四、精子的形态 (一)精子畸形率 畸形精子类型图

第三节 精液品质检查 四、精子的形态 (二)精子顶体异常率 第三节 精液品质检查 四、精子的形态 (二)精子顶体异常率 概念:精子顶体异常率是指精液中顶体异常的精子数占精子总数的百分率。正常精子顶体内含有多种与受精有关的酶类,在受精过程中起着重要的作用。

第三节 精液品质检查 四、精子的形态 (二)精子顶体异常率 精子顶体异常图

第三节 精液品质检查 五、精子存活时间及存活指数 (一)精子存活时间 (二)精子存活指数 第三节 精液品质检查 五、精子存活时间及存活指数 (一)精子存活时间 概念:精子存活时间是指精子在体外一定保存条件下(稀释液、稀释倍数、保存温度和方法等)的总生存时间。 (二)精子存活指数 概念:精子存活指数则是指精子存活时间及其精子活率变化的一项综合指标,是反映精子活率下降速度的标志。

第四节 精液的稀释 一、稀释液的成分及作用 (一)营养物质 果糖、葡萄糖、卵黄和奶类 (二)保护性物质 缓冲物质 抗冻物质 抗菌物质

第四节 精液的稀释 一、稀释液的成分及作用 (三)其他添加剂 酶类 激素类 维生素类

第四节 精液的稀释 二、稀释液的种类与配制 (一)稀释液的种类 (二)稀释液的配制 即用稀释液 常温保存稀释液 低温保存稀释液 第四节 精液的稀释 二、稀释液的种类与配制 (一)稀释液的种类 即用稀释液 常温保存稀释液 低温保存稀释液 冷冻保存稀释液 (二)稀释液的配制

第四节 精液的稀释 三、精液稀释方法与稀释倍数 (一)精液稀释方法 (二)精液稀释倍数

第五节 精液的处理与保存 一、常温保存 (一)保存原理 (二)猪精液的处理和保存 精液稀释液的pH值,抑制精子活动 精液的稀释及稀释液 第五节 精液的处理与保存 一、常温保存 (一)保存原理 精液稀释液的pH值,抑制精子活动 (二)猪精液的处理和保存 精液的稀释及稀释液 精液品质评定 精液处理 液态精液的贮存

第五节 精液的处理与保存 一、常温保存 猪常温保存稀释液配方

第五节 精液的处理与保存 二、低温保存 (一)保存原理 降低精子代谢和运动的能量消耗 (二)绵羊精液的处理和保存 (三)马精液的处理和保存

第五节 精液的处理与保存 二、低温保存 绵羊精液低温保存稀释液配方

第五节 精液的处理与保存 三、冷冻保存 (一)保存原理 (二)冷冻精液的分装和剂型 冷冻时细胞的损伤与冷冻保护剂的作用 颗粒精液 第五节 精液的处理与保存 三、冷冻保存 (一)保存原理 冷冻时细胞的损伤与冷冻保护剂的作用 (二)冷冻精液的分装和剂型 颗粒精液 细管精液(常用)

第五节 精液的处理与保存 三、冷冻保存 (三)冷冻精液的方法 制备颗粒精液方法 制备细管精液方法

第五节 精液的处理与保存 三、冷冻保存 (四)牛精液的处理和保存 稀释液 冷冻精液生产处理程序 精液稀释 精液降温(冷却) 甘油化和平衡 第五节 精液的处理与保存 三、冷冻保存 (四)牛精液的处理和保存 稀释液 冷冻精液生产处理程序 精液稀释 精液降温(冷却) 甘油化和平衡 精液的冷冻

第五节 精液的处理与保存 三、冷冻保存 公牛精液常用冷冻保存稀释液

第五节 精液的处理与保存 三、冷冻保存 (五)羊精液的冷冻保存 (六)猪精液的冷冻保存 第五节 精液的处理与保存 三、冷冻保存 (五)羊精液的冷冻保存 (六)猪精液的冷冻保存 Beltsville F5稀释液成分及公猪冷冻精液解冻液

第五节 精液的处理与保存 三、冷冻保存 (七)马精液的冷冻保存 采精 采精后2~5分钟内用离心液 重新测定上述经离心和稀释后精液的精子浓度, 第五节 精液的处理与保存 三、冷冻保存 (七)马精液的冷冻保存 采精 采精后2~5分钟内用离心液 重新测定上述经离心和稀释后精液的精子浓度, 并进行第3次稀释 把精液分装到已标识(印字) 把细管中的气泡调整定位在细管中央

第六节 输精 一、输精前的准备 经过发情鉴定已确定要配种的母畜,在输精前应进行适当的保定并进行外阴部的擦洗和消毒; 第六节 输精 一、输精前的准备 经过发情鉴定已确定要配种的母畜,在输精前应进行适当的保定并进行外阴部的擦洗和消毒; 各种输精用具在使用前必须彻底清洗、消毒,再用稀释液冲洗; 用于输精的精液必须符合各种动物输精所要求的输精剂量、精子活率等级及有效精子数; 输精人员要身着工作服,指甲剪短磨光,手清洗消毒,牛直肠把握输精时,则应带长臂手套并涂以润滑剂。

第六节 输精 二、各种家畜的输精方法 (一)母牛的输精 一般输精方法 直肠把握子宫颈输精法 阴道开张器输精法 子宫角内深部输精法

母牛人工输精操作技术 母牛的保定与消毒 器械的准备与消毒 冻精准备与解冻 细管精液装枪 人工输精 输精配种记录

器械的准备与消毒 (A)型输精枪 一次性套管 专用细管剪 镊 子 液 氮 罐 长 臂 手 套

冻精准备与解冻 解冻方法: 自然解冻、手槎解冻、温水解冻。 解冻温度: 38~42℃(一般控制在40 ℃) 。 注意事项: 1、取冻精时,冻精离开液氮的时间不要太长,不超过10秒钟,且冻精不要超过瓶口。 2、水温控制要控制好,输精解冻时水温稍低,检查时水温可稍高。 3、解冻时间不要太长10~15秒,并要轻轻摇晃细管冻精。 4、解冻后要擦干细管上的水,并检查细管有无断裂和破损。

细管精液装枪

直肠把握输精法 直肠把握输精示意图 直肠把握手法

直肠把握输精法 输精原则: 慢插、适深、轻注、缓出、防流 注意事项: 1、插枪时先将输精枪斜向上45℃角插入10~15cm,再平行向前插入,直至子宫颈口。 2、先勿将套管外的保护套除去,待输精枪插入阴道后再去除。 3、注意保护自身的安全,避免被牛只踢伤。

开膣器(内窥镜)输精法 开发的产品 (新型输精器) 看到的子宫颈口

2.猪输精方法

3.母马(驴)输精方法 工作人员左手持玻璃注射器,右手握胶管,管的尖端于手掌中,缓慢伸入阴道内,当手指触到子宫颈口后,以食指和中指扩大颈口,将输精胶管前端导入子宫腔内10~15cm(驴8~12cm)深处,轻缓注入精液,精液流尽后,缓慢抽出输精管,用手指轻轻按捏子宫颈外口,以刺激子宫颈收缩,防止精液倒流。

4.绵羊(山羊)输精方法 阴道开张器输精法:将发情母羊固定在输精架内或由助手用两腿夹住母羊头部,两手提起母羊后肢将羊保定好。洗净并擦干其外阴部,将已消过毒的开张器顺阴门裂方向合并插入阴道,旋转45度角后打开开张器,并借助光源找到子宫颈外口,把输精器插入子宫颈内 0.5~1cm,将精液徐徐注入,随后撤出输精器和取出阴道开张器。

思 考 题 1.人工授精的意义和值得注意的问题是什么? 2.精液冷冻保存的原理和意义是什么? 3.如何做好家畜的适时输精工作? 思 考 题 1.人工授精的意义和值得注意的问题是什么? 2.精液冷冻保存的原理和意义是什么? 3.如何做好家畜的适时输精工作? 4.影响家畜人工授精效果的因素有哪些?

谢 谢!