洁泽一号抗生殖道常见病原 微生物药效的实验研究 华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合科 洁泽一号抗生殖道常见病原 微生物药效的实验研究 陈 琢 孔小峰 王 容 徐 萍 徐丽君 陆付耳 黄光英 华中科技大学同济医学院中西医结合研究所 华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合科 国家“十五”科技攻关资助项目

生殖道炎是妇科临床常见病、多 发病。约占妇科门诊的40-60%。 在世界人口仍迅速增长的今天， 控制人口是全世界共同努力的课题。 生殖道炎是妇科临床常见病、多 发病。约占妇科门诊的40-60%。

人们迫切需要在有效避孕的 同时，拥有健康、安全的性生活。 性生活时，生殖道感染机会明 显增加。 人们迫切需要在有效避孕的 同时，拥有健康、安全的性生活。

实验目的 见病原微生物的药效及其与常用的阴道杀精 剂壬苯醇醚（N－9）的协同作用，以期为 开发具有避孕与消炎双重作用的外用药具提 观察中药复方洁泽1号体外对生殖道常 见病原微生物的药效及其与常用的阴道杀精 剂壬苯醇醚（N－9）的协同作用，以期为 开发具有避孕与消炎双重作用的外用药具提 供实验依据。

实验内容 洁泽1号体外对金黄色葡萄球菌（SA）、大肠杆菌（EC）、乙型链球菌（ST）和脆弱拟杆菌(BF)的抑制作用研究 洁泽1号体外对白色念球菌（CA）的抑制作用 洁泽1号体外对阴道毛滴虫(TV)作用研究 洁泽1号体外对解脲脲原体（UU）作用研究 洁泽1号体外对单纯性疱疹病毒2型（HSV-2） 的作用研究 洁泽1号体外对嗜酸乳杆菌(LC）的作用研究

实验材料 实验菌株： 金黄色葡萄球菌（ATCC25923)、大肠杆菌(ATCC25922)、乙型链球菌(ATCC32172)质控菌株及临床分离株（同济医院检验科提供）和脆弱拟杆菌质控菌株ATCC 25285 (OXOID) 白色念球菌国际标准株(ATCC00729) 阴道毛滴虫临床分离株 解脲脲原体临床分离株，同济医院皮肤科提供 生殖器疱疹病毒2型（HSV-2,333）株 ，武汉大学医学院病毒研究所提供 乳酸菌国际标准株（LC，CGMCC）及临床株（由同济医院妇产科门诊就诊者阴道分泌物中分离 ）

实验药品 洁泽1号（JZNo.1） 洁泽2号（JZNo.2） 壬苯醇醚（N-9） 甲硝唑针剂 洁尔阴 洁身液 无环鸟苷粉针剂 红霉素

主要试剂 金黄色葡萄球菌 营养肉汤培养基 大肠杆菌 脆弱拟杆菌 氧琼脂/厌氧血平板/硫乙醇酸盐液体培基 脆弱拟杆菌 氧琼脂/厌氧血平板/硫乙醇酸盐液体培基 乙型溶血性链球菌 10%全血营养琼脂培养基 白色念珠菌 沙氏琼脂培养基 支原体 MycoplasmaIST支原体试验试剂盒 阴道毛滴虫 肝浸汤培养基 乳酸菌 MRS培养基

主要仪器 厌氧罐 (AG0025A OXOID) 比浊仪(DENSIMAT M005230) 冰点渗透压仪（德国 Gonotec Osmomat 030） 自动酶标仪（Bim-Red） 超净工作台（SW-CT-1FD 苏州安泰空气技术有限公司） pH仪（ZXS-029 上海天达仪器有限公司）

实验方法 琼脂稀释法 SA 、EC 、ST 、CA、BF MIC、MBC 倍比稀释法 TV 死亡率 微量肉汤稀释法 支原体 MIC和MBC 运用CPE法和MTT法 HSV-2 采用纸片扩散法 乳酸杆菌

实验结果 洁泽1号体外抗菌活性检测结果 洁泽1号体外抗菌活性检测结果（表中数据均表示稀释倍数 ） 菌种 n 洁泽1号 洁尔阴 MIC范围 MIC90 MIC50 MBC范围 MBC90 MBC50 SA EC CA ST 15 4－32 8－32 0－4 2－16 6.4 12.8 2 4 16 32 3.2 8 0- 4 1.2 2－32 8－16 16－128 2-32 4－16 16－64 0-8 洁泽1号对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用优于洁尔阴,对乙型溶血性链球菌的作用与洁尔阴相当，而对白色念球菌的作用弱于洁尔阴。洁泽1号对受试细菌的抗菌活性依次为：大肠杆菌、金葡菌、乙型链球菌和白色念球菌。

洁泽1号体外抗菌活性检测结果（单位：mg•ml-1） 菌种 n 洁泽1号 MIC范围 MIC90 MIC50 MBC范围 MBC90 MBC50 SA EC CA ST 15 31.25－250.00 31.25－125.00 0.00－250.00 0.00－125.00 156.20 78.10 500.00 250.00 62.50 31.25 312.50 125.00 833.30

洁泽1号对大肠杆菌的杀菌曲线 作用24小时，洁泽1号7.8mg•ml-1能够轻微抑制大肠杆菌的生长，62.5mg•ml-1可以使大肠杆菌的存活量迅速下降，125 mg•ml-1可以完全清除大肠杆菌

洁泽1号体外抗滴虫实验结果 滴虫死亡率（%） ** * ** ** ** * ** ** g/ml

甲硝唑体外抗滴虫实验结果 * 滴虫死亡率（%） * * ** * ** ** ** ug/ml

洁泽一号对脆弱拟杆菌的抑菌圈直径 * JZ2 组和N-9 组比较 * P<0.05 A JZ2 组和JZ1组比较 A P<0.05

洁泽一号对脆弱拟杆菌的MIC 药物 MIC JZ1 N-9 甲硝唑 JZ2 0.5g.ml-1 ﹥20mg.ml-1 0.625ug.ml-1 0.125g.ml-1+0.25mg.ml-1

洁泽1号抗Uu作用结果 菌 株 n 洁泽1号 (mg•ml-1) 洁泽1号抗Uu活性的检测结果 30 10 耐药株 15.62-250 MIC范围 MIC50 MIC90 MBC范围 MBC50 MBC90 耐药株 30 15.62-250 31.25 125 62.5 250 非耐药株 10 15.62-125

CPE、MTT法检测药物细胞毒性结果 mg•ml-1 洁泽1号对Vero细胞的TC50和TC0 无环鸟苷对Vero细胞的TC50和TC0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 TC50 TC0 CPE MTT mg•ml-1 0.78 8 1.07 8 6.3 7 6 5 CPE 0.04 1.6 1.6 MTT 0.04 4 3 2 1 TC50 TC0

洁泽1号抗HSV-2保护细胞的作用 CPE和MTT法检测洁泽1号IC50值 CPE和MTT法检测无环鸟苷IC50值 0.8 0.85 0.9 0.95 1 CPE MTT 0.007 0.0075 0.008 0.0085 CPE MTT 0.98 0.98 0.0082 mg•ml-1 mg•ml-1 0.89 0.89 0.0075

洁泽1号抗HSV-2保护细胞的作用 JZ1和ACV抑制HSV-2吸附治疗指数 53 42 30.5 22.2

洁泽1号对乳杆菌作用结果 洁泽1号对嗜酸乳酸杆菌国际标准株无抑菌环产生，对7株阴道分离乳酸杆菌不产生抑菌环，对其余3株产生的抑菌环最大为2.04mm，最小仅为1.01mm。可见洁泽1号对阴道乳酸杆菌生长的影响甚微。

讨论 生殖道炎是临床常见病、多发病。下生殖道寄生的常见致病微生物较多，是导致生殖道感染的主要原因之一。 生殖道感染居高不下，加之近几年来抗生素的使用不当，病原体的耐药现象令医务者们十分关注。

寻找依从性好、便捷、有效的防治生殖道感染的药物一直是目前亟待解决的问题。 由于每一种病原体寄生繁殖和致病的条件不同，加之阴道特殊的细菌寄生的生态环境，给运用抗生素预防感染带来了难度。人们开始把目光集中在消毒剂上，但其对皮肤、粘膜的刺激等副作用未能解决。 寻找依从性好、便捷、有效的防治生殖道感染的药物一直是目前亟待解决的问题。

本实验中洁泽1号是由黄柏、公英等清热解毒、燥湿止带、收敛生肌中药组成的纯中药复方制剂，为我院使用多年的用于治疗各种阴道炎和宫颈炎的院内制剂，以往的研究证实JZNo.1在杀精方面与N-9有良好的协同作用。

本实验结果表明：洁泽1号体外对下生殖道多种致病病原体有不同程度抑菌或杀菌作用，而对阴道正常乳酸菌的影响甚微，值得进一步研究。

谢谢

洁泽1号 我院使用多年的治疗阴道炎、宫颈炎的有效中药复方，经过严格工艺筛选而成，具有清热解毒、燥湿止带、收敛生肌功效。

壬苯醇醚（N－9） 洁泽2号 中药复方洁泽1号（JZ1）