实验二 细菌分离培养与生化鉴定 李立伟 lilw2@zju.edu.cn.

Presentation on theme: "实验二 细菌分离培养与生化鉴定 李立伟 lilw2@zju.edu.cn."— Presentation transcript:

1 实验二 细菌分离培养与生化鉴定 李立伟

2 实验目的 了解常用基础培养基种类和用途 熟悉细菌在三种培养基中的生长状态 掌握细菌的各种分离培养技术和纯种细菌接种方法 熟悉细菌常用生化反应

3 培养基分类 按营养组分和用途分类 基础培养基 营养培养基 鉴别培养基 选择培养基 厌氧培养基

4 按物理状态分类 液体培养基 固体培养基 琼脂斜面培养基 琼脂平板培养基 半固体培养基

5 任务1-空气中的细菌 普通琼脂平板一只（8人/组） 启开皿盖，培养基面向上 空气中暴露10-15min，立即盖上皿盖。
37℃培养18-24h，观察结果。

6 空气中菌落总数 空气中细菌数（CFU）/m3 = 5000N/A T A：平板面积（cm2） T：平板暴露时间（min） N：平板平均菌落数

7 任务2-手指皮肤上的细菌 普通琼脂平板一只（8人/组） 于背面玻璃面划成八等份，并编号 每人在培养基面相应部位轻轻按上指印，随即盖上皿盖。
37℃培养18-24h，观察结果。

8 任务3-细菌接种 液体培养基（8人/组）

9 琼脂平板培养基（1人/组）

10 琼脂斜面培养基（8人/组）

11 半固体培养基（8人/组）

12 任务4-咽喉部细菌的分离 取灭菌棉签一支，在咽喉部轻轻涂擦（1人/组）后，再涂于血琼脂平板一区 改用灭菌接种环作分离划线接种
37℃培养24h，观察结果

13

14 咽喉部优势细菌

15 任务5-细菌在培养基中的生长状态 （示教观察）
液体培养基

16 菌膜 菌沉淀 均匀浑浊 对照

17 固体培养基 菌落 菌苔

18 半固体培养基

19 任务6-细菌生化反应（示教观察） 糖发酵试验 大肠埃希菌　　　产酸产气 ＋ 　　　　　　　　　　　　　　 产碱杆菌 　　 不发酵   — 伤寒沙门菌　 产酸不产气 ＋

20 Indol试验 大肠杆菌　　 出现红色　＋ 肖氏沙门菌　 不出现红色　 -

21 硫化氢试验 大肠杆菌：不变色 阴性 变形杆菌：穿刺线部位呈黑褐色 阳性

22 尿素分解试验 痢疾杆菌：不变色 阴性 变形杆菌： 红色 阳性

23 任务7-实验报告 细菌在液体、固体斜面、半固体和平板上的生长状态 空气中、手指细菌的分布 咽喉部细菌的分离
细菌生化反应（培养基、原理和结果） 思考题：咽喉部细菌分离鉴定程序