艾滋病初筛实验室检测技术规范 株洲市疾控中心 罗建平

初筛实验室基本要求 一、人员条件： 至少由3名医技人员组成，其中具有中 级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试 验的技术人员需具有2年以上从事病毒性血清 学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检 测技术培训，并获得培训证书。

二、建筑条件： 实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验 (BSL-2)要求，实验室面积不小于40平方米。

三、仪器设备条件： 配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备、 至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰 箱、水浴箱（或温箱）、离心机、加样器（仪）、消毒与污物处理设备、冲眼器、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。

复检试验 对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确认。

生物安全二级实验室 1、满足生物安全一级实验室要求。 2、实验室门应带锁并可自动关闭。实验室的 门应有可视窗。 3、应有足够的储存空间摆放物品以方便使 用。在实验室工作区域外还应当有供长期 使用的储存空间。 4、在实验室内应使用专门的工作服；应戴乳 胶手套。

5、在实验室的工作区域外应有存放个人衣物 的条件。 6、在实验室所有建筑内应配备高压蒸汽灭菌 器，并按期检查和验证，以保证符合要求。 7、应在实验室内配备生物安全柜。 8、应设洗眼设施，必要时应有喷淋装置。 9、应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱 窗。

10、有可靠的电力供应和应急照明。必要 时，重要设备如培养箱、生物安全柜、 冰箱等应设备用电源。 11、实验室出口应有黑暗中可明确辨认的标 识。

样品采集和处理 一、样品采集（略） 二、样品保存 1、用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20 ℃以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8℃。 2、用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20 ℃以下，进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80 ℃

三、样品的运送 根据病原微生物实验室生物安全管理条例有关规定，运输高致病性病原微生物菌毒株或者样本应具备下列条件： ①、符合国务院卫生主管部门的规定。 ②、高致病性病原微生物菌毒株及样本的运送包装应密封、防水、防外泄、耐压耐高温要求。包装材料上应有生物危险标识和警告用语，提示用语。

③运输高致病性病原微生物菌毒株及样本应经省级人民政府卫生主管部门批准。在省内运输经省人民政府卫生主管部门批准，需要跨省或运往国外的由出发地的省人民政府卫生主管部门初审后，报国务院卫生主管部门批准。通过民航运输的高致病性病原微生物菌毒株还应当经国务院民航主管部门批准。

④、运输高致病性病原微生物菌毒株应当由不少于2人专人护送，有关单位或者个人不得通过公共电（汽）车和城市铁路运输高致病性病原微生物菌毒株。需要通过铁路、公路、民用航空等公共交通工具运输高致病性病原微生物菌毒株，承运单位应当采取措施确保高致病性病原微生物菌毒株的安全。

感染性物质的等级 A级：当人或动物与之接触时能够导致永久性的残疾、构成生命威胁或致死疾病的感染性物质。 ①UN2814（感染性物质对人感染），如：炭疽杆菌培养物、埃博拉病毒、鼠杆菌培养物等。 ②UN2900（感染性物质只对动物感染），如：非洲猪热病毒、口蹄疫病毒、牛疫病毒等。

B级：未达到A级的感染性物质划为B级。 UN3373：甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、风疹病毒等。

1、采用WHO三级包装体系 ①第一层容器：包装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者的姓名、种类和采集时间。在试管的周围应有缓冲吸水材料，以免碰碎。随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。

②第二层容器：要求耐受性好、防渗 漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干个 第一层容器将试管装入装用带盖的容器内， 容器的材料要易于消毒处理 ③第三层容器：放在一个运输用外层包 装内，应易于消毒。在第三层容器外面要贴 标签（数量、收、发件人）。

3、血清和血浆标本应在2-8℃条件下由专人运送。标本和送检资料必须为一一对应关系。 4、运送感染性材料必须要有记录。

四、样品的接收 1、必须由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包裹应消毒。 2、核对样品送检单，检查样品管有无破损和溢漏、有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况，如污染严重应将样品安全废弃并告知送样人，打开标本应在生物安全柜中进行并配以生物安全二级个人防护。 3、接收样品时应填写样品接收单。

实验室管理 一、生物安全防护 1、艾滋病实验室操作，个体防护为生物安全二级防护，其具体要求为：进入实验室应穿隔离衣、戴(双层)手套、戴防护眼镜（必要时），不用戴手套的手触摸暴露的身体部分。 2、禁止采用口腔吸液管，工作完毕要对工作台面消毒。工作台面应当用0.1%-0.2%次氯酸溶液消毒；用消毒液消毒后要干燥20min以上。

建立个人健康档案 每半年对HIV实验室工作人员进行一次健康 检查，项目包括：HIV抗体检测、梅毒检 测、乙肝和丙肝检测。并保留本底血清。

废弃物处置和消毒 一、废弃物处置 1、废弃物处置应符合《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2004）和《消毒技术规范（2002年版）》 2、从艾滋病实验室出来的所有废弃物，包括不再需要的样品、培养物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器中，安全运至消毒室，并在高压消毒后再进行处理或废弃。

二、HIV常用物理消毒方法 1、高压蒸汽消毒 2、干燥空气烘箱消毒（干烤消毒）

三、 HIV常用的化学消毒方法 HIV最常用的化学消毒剂是含氯消毒剂（次氯酸钠，含有效氯2000-5000mg/L） 75%乙醇和2%戊二醇，保持10-30min。

实验室质量管理 1、行政支持 2、实验室规范化建设 3、人员培训 4、标本采集、运送和处理 5、检验方法和试剂的选择 6、设备维护和校准

7、文件和文件管理： ①实验室安全保障制度 ②实验室紧急事故处理制度 ③实验室消毒制度 ④HIV初筛试验检测流程 ⑤实验室结果报告制度

谢谢！