有机芹菜与普通芹菜中槲皮素的提取与比较 2008生科三班 马利 黄宇欣 黄燕娜 指导老师:徐杰
实验目的 近年来,有机食品越来越受到消费者的亲睐,有机蔬菜也是如此。 槲皮素是一种典型的类黄酮,具有抗癌活性、降血压等功效,而在芹菜中,其含量较高,因此我们选择芹菜做材料,结合热点,研究比较有机芹菜和普通芹菜中槲皮素的含量,为市民在选购芹菜时,提供参考。
实验原理 用槲皮素标准品制作槲皮素的标准溶液曲线。将新鲜有机芹菜与普通芹菜的叶、茎分离,洗净、烘干、粉碎,用石油醚提取叶绿素6小时,用80%乙醇冲洗数次后各加入适量80%乙醇浸取12小时,将滤液稀释后在362nm的波长下,用紫外分光光度计测量吸光值,对照标准曲线,计算有机芹菜与无机芹菜茎、叶中槲皮素的含量,进行比较。
实验设备及用具 UV―2800紫外分光光度计 粉碎机 电子分析天平 容量瓶 移液管 电子分析天平 容量瓶 移液管 烧杯 试管 试管架 漏斗 纱布 锥形瓶 比色杯 玻璃棒 量筒 尖头镊子 吸水纸 滤纸 橡皮筋 标签纸 封口膜 试管塞 称量纸
实验材料及试剂 试剂的配置 实验材料 1.石油醚(分析纯2.槲皮素(分析纯) 3.80%乙醇 配置方法:无水乙醇和蒸馏水=4:1的比例配置;或用95%乙醇和蒸馏水按16:3比例配置。 实验材料 有机芹菜(购于吉之岛百货公司) 普通芹菜(购于百佳超市) 水洗干净用纱布或吸水纸吸干表面的水分,让其自然晾干或用烘干机烘干。
实验步骤 1.样液的制备 1.1去除叶绿素 分别取一根洗干净的有机芹菜与普通芹菜将茎与叶分开用粉碎机粉碎,将粉碎好的物料装入编号为Ⅰ(有机芹菜叶物料)、Ⅱ(普通芹菜叶物料)、Ⅲ(有机芹菜茎物料)、Ⅳ(普通芹菜茎物料)的四个锥形瓶(规格:250ml)中,并各加入适量的石油醚、摇匀,室温下避光静置浸取叶绿素6小时。
实验步骤 1.2提取槲皮素 将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ中的混合液分别加入加入布氏漏斗中,用真空抽气机抽滤,弃去滤液,各取滤渣4g装入编号为A(有机芹菜叶滤渣)、B(普通芹菜叶滤渣)、C(有机芹菜茎滤渣)、D(普通芹菜茎滤渣)的四个锥形瓶(规格:100ml)中,并向每个锥形瓶加入80%乙醇40ml,充分混合均匀,常温下避光静置12小时,提取槲皮素。
实验步骤 1.3收集样液 普通漏斗过滤A、B、C、D四个锥形瓶中的混合液,各取滤液30ml装入编号为A(有机芹菜叶滤液)、B(普通芹菜叶滤液)、C(有机芹菜茎滤液)、D(普通芹菜茎滤液)的四个大试管中,用试管塞密封,滤液备用。
实验步骤 2、槲皮素标准曲线的绘制 2.1标准溶液配制 2.1.1精确称取槲皮素10mg于100ml容量瓶中,并以80%乙醇溶液定容至刻度,摇匀,作为槲皮素标准溶液(浓度为0.1mg/ml)。
实验步骤 2.2绘制标准曲线 取9支干净的试管,分别编号,按下表加入试剂: 编号 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 1 2 3 4 5 6 7 8 槲皮素标准液/ml 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 80%乙醇/ml 3.9 3.8 3.7 3.6 3.5 3.4 3.3 3.2 吸光值 以0号试管作为空白对照,在波长362nm处测其吸光值。以吸光值为纵坐标,槲皮素标准液的浓度为横坐标,绘制标准曲线。
实验步骤 3.芹菜槲皮素的测定 取12支小试管分别标注从A1、A2、A3;B1、B2、B3;C1、C2、C3;D1、D2、D3;按下表加入试剂(单位:ml),以加入4ml 80%乙醇的E号小试管作为空白对照,在波长362nm处测各样液的吸光值。
实验步骤 A1 A2 A3 A(有机芹菜叶滤液) B(普通芹菜叶滤液) 0.2 0.5 0.8 3.8 3.5 3.2 编号 80%乙醇 吸光值
实验步骤 C1 C2 C3 C(有机芹菜茎滤液) D(普通芹菜茎滤液) 0.2 0.5 0.8 3.8 3.5 3.2 编号 80%乙醇 吸光值
实验结果及讨论
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