猪 瘟 hog cholera(HC) classical swine fever(CSF)
一、概况 二、病原学 三、猪瘟临床症状和病理变化 四、我国猪瘟免疫效果检测情况 五、猪瘟诊断方法 六、猪瘟疫苗的研究 七、猪瘟防制策略 (一)集约化猪场当今主要疫病 (二)猪瘟流行动态 二、病原学 三、猪瘟临床症状和病理变化 四、我国猪瘟免疫效果检测情况 五、猪瘟诊断方法 六、猪瘟疫苗的研究 七、猪瘟防制策略 八、对猪瘟一些问题的探讨
一、概况 (一)集约化猪场当今主要疫病 猪繁殖与呼吸障碍综合症(蓝耳病,PRRS) 断奶仔猪多系统衰弱症(圆环病毒、PCV2、 PMWS) 猪瘟(HC) 猪繁殖与呼吸障碍综合症(蓝耳病,PRRS) 断奶仔猪多系统衰弱症(圆环病毒、PCV2、 PMWS) 附红细胞体病(EPE) HC+PRRS,PRRS+PCV2,PRRS+EPE等
(二)猪瘟流行动态 猪瘟(Hog Cholera,HC),又称古典猪瘟(Classical Swine Fever,CSF),猪的一种烈性传染病。已有170多年的历史,关于猪瘟流行起源,国际上尚无统一认识。 该病主要在南美和亚洲地区流行,西方一些国家(如捷克、爱沙尼亚、波兰、匈牙利、加拿大、美国、百里斯、巴拿马等)已宣布消灭了猪瘟,欧洲中部和东部绝大多数国家也靠疫苗控制猪瘟。
The OIE defines the requirements for CSF-free status as follows (OIE, 1998): _ Absence of CSF for at least two years _ One year after slaughter of the last affected animal following a stamping out campaign with vaccination. _ Six months after slaughter of the last affected animal following a stamping out campaign without vaccination.
二、病原学 猪瘟病毒抗原性猪瘟病毒只有一个血清型。 经典猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus.CSFV)以往被列入披膜病毒科(Togaviridae)瘟病毒属(Pestivirus)。1991年被列入黄病毒科,瘟病毒属。同属的还有牛病毒性腹泻病毒(BVDV)及边地病病毒。 猪瘟病毒抗原性猪瘟病毒只有一个血清型。
我国CSFV基因分型 我国目前流行着2个基因群共4个基因亚群, 即基因2群中的Subgroup2.1、Subgroup2.2 Subgroup2.3亚群和基因1群中的Subgroup1.1亚群。 长江以北地区的CSFV流行毒株主要集中在Subgroup2.1 Subgroup2.2中,长江以南地区的CSFV,多集中在Subgroup2.1和Subgroup2.3中。
三、猪瘟临床症状和病理变化 典型猪瘟 非典型或温和型猪瘟 近些年急性型和亚急性型典型猪瘟很少见。 持续感染(亚临床隐性感染) 母猪繁殖障碍(妊娠母猪带毒综合征) 仔猪先天性感染(胎盘垂直感染) 免疫耐受(免疫力低下)
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四、我国猪瘟免疫效果检测情况 猪瘟实际免疫效果检测 四、我国猪瘟免疫效果检测情况 猪瘟实际免疫效果检测 作者 年份 省区 检测 方法 免疫合格率(%) 备注 王在时 2003 全国 ELISA 74.7%(5486/7347) 全国送检1# 何启盖 2000 6省 IHA 55.84%(421/754) 44个猪场 2# 卢建红 2002 湖南 65.8%(2102/3190) 田间样品 陆文俊 广西 76.9%(819/1065) 28个种猪场 母安雄 浙江 83.64%(722/845) 24个猪场 李勇 97.2% 种猪场 3# 王泽洲 四川 82.56%(895/1084) 13个种猪场 乔宏兴 河南 34.67%(147/424) 51个种猪场
注解 猪瘟免疫效果总体而言不理想,近年略有改善 1# HC双抗体阴性猪13.8%(1017/7347) 2# 农业部重点课题 2# 农业部重点课题 母猪合格66.70% 肥猪合格37.06% 仔猪合格22.02% 滴度为0:母猪7.26%,肥猪15.32%,仔猪 33.03% 3# 母猪配种前免疫4头份 猪瘟免疫效果总体而言不理想,近年略有改善
免疫猪群猪瘟强毒抗体检测结果 作者 年份 省区 检测 方法 强毒感染率(%) 备注 王在时 2003 全国 ELISA 11.5%(844/7347) 全国送检1# 吴美洲 2000 湖北 10.1%(70/695) 28个猪场 王生祥 青海 9.26%(334/3605) 黄雨田 2002 新疆 27.98%(334/1194) 2# 郑世军 1997 北京 86.6%(26/30) 3# 王泽洲 四川 21.86%(237/1084) 13个种猪场
注解 1# 全国范围内可能为3%-30% 2# 全系种母猪,无临床表现但仔猪10日 龄左右大规模死亡,采取正确免疫程序 后疫病控制。 1# 全国范围内可能为3%-30% 2# 全系种母猪,无临床表现但仔猪10日 龄左右大规模死亡,采取正确免疫程序 后疫病控制。 3# 出现严重繁殖障碍母猪,猪群中猪瘟 强毒(野毒)感染十分普遍。
五、猪瘟诊断 病毒分离 动物接种试验 荧光抗体试验 鸡新城疫病毒强化实验 血清中和试验 猪瘟间接血凝试验 免疫酶测定技术PPA-ELISA
抗原捕获ELISA 复合捕捉封闭ELISA 间接ELISA 竞争ELISA RT-PCR 套式PCR 鉴别 PCR 髓细胞检查法 PCR与ELISA的联合应用,即PCR -ELISA技术,
据报导RT PCR-ELISA方法敏感、特异,比琼脂糖凝胶电泳敏感100倍,能够检测到350μL1∶100(相当于3 据报导RT PCR-ELISA方法敏感、特异,比琼脂糖凝胶电泳敏感100倍,能够检测到350μL1∶100(相当于3.5mg)的典型热反应兔脾组织悬液中的C株CSFV和田间野毒样品中的CSFV。 这些样品基本包括了分布于我国的CSFV各基因亚型,适合于我国猪瘟诊断。
RT PCR-ELISA的具体方法 RT PCR-ELISA用PCR ELISA试剂盒检测地高辛标记的CSFVRT PCR产物。在20μL变性液中加入5μL地高辛标记的PCR产物,混匀,置室温(15~25℃)10min。然后加含10pmol/mL生物素标记捕获探针(P5)的杂交液至250μL,混匀后取200μL加入链亲和素包被的微孔中,45℃振荡培养3h。用250μL洗液洗3次,甩干后加200μL工作浓度的抗地高辛过氧化物酶(anti DIG POD),在37℃暗室中振荡30min。洗5次后加200μLABTS底物溶液,在37℃暗室中振荡30min。测D405nm值。每次反应均设阳性对照、阴性对照和空白对照。阴性对照的D405nm应在0.1以下,D405nm≥0.1者为阳性。
六、猪瘟疫苗的研究 HCLV(兔化弱毒株)世界公认优良毒株 基因工程亚单位疫苗 病毒活载体疫苗以无致病力或低毒力的痘苗病毒(VAC)和伪狂犬病病毒(PRV)为载体,将猪瘟病毒E2基因与之重组研制出的基因重组疫苗,免疫动物后可对2种病毒产生良好的保护力。
DNA疫苗解放军军需大学已用猪瘟DNA疫苗成功保护了猪瘟病毒对猪的攻击。 cDNA标记疫苗标记疫苗是在分子水平上,将具有选择性标记的基因,克隆到致弱病毒全长cDNA中,免疫动物经过检测,可以区分抗体来自于自然感染还是标记疫苗免疫,从而断定动物发病情况。
七 猪瘟防制要点 加大免疫剂量2-4倍,不宜任意加大 用生理盐水稀释三联苗 科学免疫程序制订 七 猪瘟防制要点 加大免疫剂量2-4倍,不宜任意加大 用生理盐水稀释三联苗 科学免疫程序制订 种猪场对出现繁殖障碍母猪必须逐头检测HC抗体或扁桃体测毒。 < > 返回 退出
无滴度或低滴度母猪及带毒母猪必须淘汰。 种猪使用组织苗后,仔猪免疫程序应慎重。 持续免疫后,能达到保护猪场仅为64% < > 返回 退出
母猪出现繁殖障碍或仔猪大规模死亡时,对猪群进行猪瘟苗紧急预防。 加强检疫、监测及贯彻综合防制措施 猪场通过综合防制完全可以有效控制HC 保持疫苗低温保存及冷链运输 < > 返回 退出
有母源抗体仔猪6周龄前免疫效果不良,应在7-9周龄免疫1次即可,两次免疫并不优于1次免疫 目前主要使用GPE-、PAV-2等弱毒苗 防止种猪及仔猪感染PRRS、PRV、PPV以免影响HCLV免疫效果。 < > 返回 退出
八 对猪瘟一些问题的探讨 种猪为什么会出现HCV带毒现象? (育肥猪有HCV带毒现象吗?) 1 免疫剂量与免疫程序 八 对猪瘟一些问题的探讨 种猪为什么会出现HCV带毒现象? (育肥猪有HCV带毒现象吗?) 1 免疫剂量与免疫程序 2 PRRS、PCV2、PRV、PPV感染对猪瘟免疫的影响 3 猪的牛病毒性腹泻(BVDV)感染。BVDV可引起猪亚临床感染甚或死亡,BVDV已遍及全国
佘永建等(2002),四川,种猪场PRRS爆发猪瘟免疫合格率的相关观察结果表明 :一切维持原状的猪场,PRRS爆发后,出现HC、PRRS、EPE、APP等。 猪瘟免疫合格率由100%下降为31.7%。再次紧急免疫后猪瘟免疫合格率提升为83.3% 类似研究宁宜宝等(2003)实验观察、杨汉春(2003)、李祥瑞(2002) 也有报导。 PRRS免疫与HCLV免疫不宜同时进行。 PRRS与MP免疫应有间隔,否则相互干扰。