第一章:原核微生物形态结构 第一节细菌(bacteria) 第二节放线菌(actinomycetes)

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第一章:原核微生物形态结构 第一节细菌(bacteria) 第二节放线菌(actinomycetes) Cncnc-micro 第一节细菌(bacteria) 第二节放线菌(actinomycetes) 第三节蓝细菌(cyanobacteria) 第四节其他几种原核微生物(others)

一、细菌(Bacteria) 细菌的形态构造及其功能 1.细菌的形态 2.观察细菌的方法 3.细菌细胞的大小 4.细菌的细胞构造 Cncnc-micro 一、细菌(Bacteria) 细菌的形态构造及其功能 1.细菌的形态 2.观察细菌的方法 3.细菌细胞的大小 4.细菌的细胞构造 5.细菌的繁殖方式 6.细菌的群体形态

Cncnc-micro 1.细菌细胞形态 球菌(Coccus) 杆菌(Bacillus) 螺旋菌(Spirlla) 其他形状的细菌

Cncnc-micro a.球菌(coccus) 单球菌 双球菌 四联球菌 八叠球菌 葡萄球菌 链球菌

单球菌(single coccus) . 单球菌(显微镜下示意图)

双球菌(double coccus) . 双球菌(显微镜下示意图)

四联球菌(Micrococcus lactis) 上:显微镜效 下:电镜照片

八叠球菌(Sarcina ureae) 八叠球菌(显微镜下示意图)

葡萄球菌(Staphylococcus aureus) 左:电镜照片 右:显微镜下的金黄色葡萄球菌

链球菌 链球菌(显微镜下示意图)

链球菌(电镜照片)

b.杆菌(bacillus) 显微镜下的杆菌

c.螺旋菌(Spirlla) 弧菌 (vibrio) 螺菌(spirllum) 螺旋体(spirochaeta)

显微镜下的螺旋菌

d.幽门螺旋菌 左:显微数码摄像 右:结构示意图

2.观察细菌的方法 (1) 观察工具 (2) 观察方法

(1)观察工具(tools) 普通光学显微镜 暗视野显微镜 相差显微镜 荧光显微镜 电子显微镜

(2)观察方法 压滴法 悬滴法 菌丝埋片法 活体观察 染色观察

染色观察 简单染色法 正染色 鉴别染色法 芽孢染色法 死菌 姬姆萨染色法 细菌染色法 负染色: 荚膜染色法等 革兰氏染色法 抗酸性染色法 活菌: 用美蓝或TTC(氯化三苯基四唑)等作活菌染色

3.细菌细胞的大小 细胞的大小是细菌分类特征 不同细菌细胞大小不同 同一细菌的不同菌龄细胞大小不同 细菌细胞大小还与营养等因素相关 细胞大小的测量结果只是近似值或平均值

4.细菌细胞的结构

Cncnc-micro 细菌细胞的结构 细胞壁 细胞壁以内的构造—原生质体 细胞壁以外的构造

①细胞壁(cell wall) a.细胞壁的结构 b.细胞壁的功能 c.细胞壁的化学组成 d.细胞壁与革兰氏染色 e.无壁细胞与原生质体 Cncnc-micro ①细胞壁(cell wall) a.细胞壁的结构 b.细胞壁的功能 c.细胞壁的化学组成 d.细胞壁与革兰氏染色 e.无壁细胞与原生质体

a.细菌细胞壁(cell wall)的结构

b.细胞壁的功能 固定细胞外形 协助鞭毛运动 保护细胞免受外力的损伤 为正常细胞分裂所必需 阻拦有害物质进入细胞 与细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的敏感性密切相关

c.细胞壁化学组成 细菌 高等植物 纤维素 霉菌 几丁质 酵母 甘露聚糖,葡聚糖 N-乙酰葡萄糖胺 N-乙酰胞壁酸 短肽 肽聚糖 磷壁酸 Cncnc-micro 高等植物 纤维素 霉菌 几丁质 酵母 甘露聚糖,葡聚糖 N-乙酰葡萄糖胺 N-乙酰胞壁酸 短肽 肽聚糖 磷壁酸 细菌 脂多糖

G+` G-细胞壁成分的区别 占细胞壁干重的% 成 分 G- 肽聚糖 磷壁酸 类脂质 蛋白质 G+ 含量很高(30-95) 成 分 G+ G- 肽聚糖 含量很高(30-95) 含量很低(5-20) 磷壁酸 含量较高(<50) 类脂质 一般无(<2) 含量较高(-20) 蛋白质 含量较高 Cncnc-micro

d.细胞壁与革兰氏染色 初染 结晶紫 甲菌 乙菌 媒染 碘液 脱色 乙醇 复染 沙黄 紫色(G+) 红色(G-)

e.无壁细胞与原生质体 原生质体(左侧为大肠杆菌的原生质体,右侧为杆状的大肠菌)

自发缺壁突变:L型细菌 实验室中形成 彻底除尽:原生质体 人工方法去壁 缺壁 细菌 部分去除:球状体 自然界长期进化中形成:支原体

细胞壁以内的构造—原生质体 1.细胞膜(cell membrane) 2.细胞质和内含物(cytoplasm andinclusion body) 3.核区(nuclear region or area) 4.特殊的休眠构造—芽孢(endospore,spore)

1.细胞膜 a b c d e f f a:内嵌蛋白;b、c:内嵌蛋白或整合蛋白 d:外周蛋白;e:多酶复合体;f:脂双分子层

Structure of Cytoplasmic Membrane 细菌染色体DNA的复制模式

细胞膜的功能 控制细胞内、外的物质的运送、交换 维持细胞内正常渗透压以保证屏障作用; 合成细胞壁各种组分和荚膜等大分子的场所; 进行氧化磷酸化或光合磷酸化的产能基地; 许多酶和电子传递链组分的所在部位; 鞭毛着生点和提供其运动所需的能量等。

间体(Mesosome)的功能 相当于真核细胞的线粒体 相当于真核细胞的内质网 与细胞壁合成有关 可能与核分裂有关 有学者认为间体是一种赝象

2.细胞质(cytoplasm )和内含物( inclusion body) 贮藏物(reserve granule 磁小体(megnetosome) 羧酶体(carboxysome) 气泡(gas vocuoles) 核糖体(ribosome) 质粒(circular covalently closed DNA)

Reserve granule / Reserve materials 糖原:大肠杆菌、克雷伯氏菌、 蓝细菌芽孢杆菌等 碳源及能源类 聚-ß-羟丁酸: 固氮菌、产碱菌、肠杆菌 硫源:迂回螺菌菌、白喉棒杆菌、结核分枝杆菌 藻青素:蓝细菌含有 氮源类 藻青蛋白:蓝细菌含有 磷源(异染粒):迂回螺菌、白喉棒杆菌和分枝杆菌含有

磁小体(megnetosome) 1975年由R P Blakemore 在趋磁细菌中发现 主要成分是Fe3O4外被一层磷脂、蛋白或糖蛋白膜,是单磁畴晶体,无毒,大小20-100nm,每个细胞有2-20颗 形状为平截八面体、平行六面体或六棱柱体等 实用前景:生产磁性定向药物或抗体,以及制造生物传感器

羧酶体(carboxysome) 存在于一些自养细菌内的多角形或六角形内含物 大小约10nm(与噬菌体相仿) 内含1,5—二磷酸核酮糖羧化酶 在自养细菌的CO2固定中起关键作用

气泡(gas vocuoles) 大小为0.2—1.0um×75nm 内由数排柱形小空泡组成,外有2nm厚的蛋白膜包裹 是许多光合型、无鞭毛水生菌中充满气体的泡囊状内含物 大小为0.2—1.0um×75nm 内由数排柱形小空泡组成,外有2nm厚的蛋白膜包裹 每个细胞中含几个或数百个气泡 功能:调节细胞比重以使细菌漂浮在最适水层中获取光能、O2和营养物质

核糖体(Ribosome) 核糖体

核糖体(Ribosome) 核糖体亚基 释 放 、 核糖体亚基连在 多聚核糖体

质粒(circular covalently closed DNA ) 染色体

质粒功能 R因子:与抗药性有关 F因子:与有性接合有关 其他质粒:与抗生素,色素合成有关 基因工程中作为目的基因载体

3.核区(nuclear region or area) 又称核质体、原核、拟核、核基因组(genome) 是一个大型环状DNA分子,长度为0.25-3.00mm 每个细胞所含的核区数一般1—4个 细菌除在染色体复制时间内呈双倍体外,一般均为单倍体

4.芽孢(endospore/spore) 某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体 由于一个营养细胞内仅生成一个芽孢,无繁殖功能 芽孢是生物界中抗性最强的生命体。 芽孢在普通条件下可保持几年至几十年的生活力。 细菌芽孢在光学显微镜下的形态及其在胞内的位置

芽孢 产芽孢细菌的种类 芽孢的构造 芽孢形成 芽孢萌发 芽孢的耐热机制 研究芽孢的意义 伴孢晶体 细菌的其他休眠构造 spores 枯草芽孢杆菌

产芽孢细菌的种类 芽孢 菌体 (营养细胞)

芽孢 孢外壁 芽孢衣 皮层 芽孢质 芽孢核区 核心 芽孢膜 芽孢壁 细菌芽孢构造的模式图

芽孢的形成过程 DNA浓缩 形成束状 芽孢 裂解 质膜内陷 前芽孢双 层膜形成 皮层 合成 合成DPA 孢衣 合成

芽孢萌发 萌发过程中的芽孢 Life cycle of an endospore -forming bacterium vegetative cell sporulating cell spore outgrowth spore germination 芽孢萌发 萌发过程中的芽孢

芽孢的耐热机制 1.是由芽孢化学组成的特点决定的 2.含有吡啶-2,6 -二羧酸(DPA-Ca) 3.含有芽孢特有的芽孢肽聚糖 4.芽孢平均含水40%,皮层含水70% 5.芽孢中酶的分子量较营养细胞小

研究芽孢的意义 细菌分类、鉴定中的重要形态学指标 指导菌种保藏 制定灭菌参数

苏云金芽孢杆菌和伴孢晶体 实用意义: 细菌杀虫剂—生物农药 少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体—δ内毒素,称为伴孢晶体。

细菌的其他休眠构造 细菌的休眠构造除上述芽孢外,还有孢囊(cyst,由固氮菌产生)等。 孢囊也是在逆境中产生的。 Cncnc-micro 细菌的休眠构造除上述芽孢外,还有孢囊(cyst,由固氮菌产生)等。 孢囊也是在逆境中产生的。 孢囊也是在逆境中产生的休眠体。 和芽孢一样没有繁殖功能。

芽孢与孢囊的比较 孢囊 项目 芽孢 形成方式 外壁层次 外壁成分 抗 性 贮 藏 物 代 表 菌 细胞内浓缩并外包 抗 性 贮 藏 物 代 表 菌 细胞内浓缩并外包 多(4~10余层)蛋白质、肽聚糖(近G+菌) 抗热、辐射及药物等 无特殊贮藏物 芽孢杆菌属、梭菌属 细胞壁外层加厚 少(3层左右) 磷脂、脂多糖(近G-菌) 抗干旱为主,不抗热 聚―ß―羟丁酸 固氮菌属

细胞壁以外的构造 鞭毛 菌毛 性毛 糖被 糖被(glycocalyx) 鞭毛 (flage,复flaglla) 菌毛(fimbria,复fimbriae ) 性毛(pili,单数pilus)

糖被(glycocalyx) 细菌负染后相差显微镜图片(示荚膜)

葡聚糖 纤维素 纯多糖 果聚糖 海藻酸 多糖 杂多糖 透明质酸 多肽 荚膜成分 聚-D-谷氨酸 多肽和多糖 …… 蛋白质

荚膜功能 保护细菌免受干旱损坏 防止噬菌体的吸附和裂解 保护作用 使致病菌免受突破主白细胞吞噬 贮藏养料 作为透性屏障或离子交换系介质 附着作用 细菌间的信息识别作用 堆积代谢废物

细菌糖被实用意义 鉴定菌种 提取葡聚糖—“代血浆” 胞外多糖:黄原胶用于石油开采 菌胶团用于处理污水

鞭毛(Flagellum) 细菌鞭毛显微镜照片 生长在某些细菌体表的长丝状蛋白质附属物,称为鞭毛,其数目为一至数条,具有运动功能。 鞭毛一般长度为15—20um直径为0.01 —0.02um 观察鞭毛的方法:染料沉积使之加粗后用显微镜观察:常用电镜观察 判断鞭毛有无的方法:半固体培养基 平板培养菌落边缘 鞭毛的类型 细菌鞭毛显微镜照片 鞭毛的结构

电镜下的大肠杆菌(示鞭毛)

单端单生 两端单生 单端从生 两端丛生 周生 细菌鞭毛的类型

鞭毛丝由直径 4.5nm 的鞭毛蛋白亚基沿央孔 道(直径为20nm)螺旋状缭绕而成。 每周为8-10个亚基 鞭毛蛋白亚基是一种球状蛋白,分子量3-6万 鞭毛丝结构图解 :鞭毛蛋白亚基

菌毛(Pilus) 鞭毛 菌毛 性毛 糖被 (伞毛、纤毛、线毛) 功能: 作为噬菌体的吸附位点 作为附着到哺乳动物细胞或其他物体的工具

细菌的鞭毛和菌毛的比较 项目 菌毛 鞭毛 成 分 大 小 结 构 数 目 功 能 着生处 菌 种 鞭毛蛋白 0.01~0.02×2~70um 一般由3股鞭毛蛋白链紧密绞成绳状 1-数百根 运动 通过钩形鞘与细胞壁内的鞭毛基体连接 许多杆菌和少数球菌 菌毛蛋白 0.007-0.009×0.5-20um 由菌毛蛋白亚基卷成中 1-数百根 空螺旋 附着,接合细胞质 许多G-杆菌和球菌

性毛(pili,单数pilus) 鞭毛 菌毛 性毛 糖被 构造和成分与菌毛相同, 但比菌毛长。 数量仅一至少数几根。 性毛一般见于革兰氏阴性细菌的雄性菌珠中。 其功能是向雌性菌珠(受体菌)传递遗传物质。

细菌繁殖方式 DNA结合位点

细菌群体的形态(细菌的培养特征) 细菌的菌落特征 细菌的其它培养特征

细菌的菌落特征

固体培养基表面细菌菌落(照片) 细菌菌落 细菌细胞的电子显微镜图片

细菌菌落特征正面图 返回鞭毛 细菌菌落特征

细菌在半固体培养上的培养特征 细菌在琼脂培养基中穿刺培养的生长特征

细菌在肉汤培养基中的表面生长特征 絮状 环状 浮膜状 膜状

放线菌(actinomyces) 什么是放线菌 放线菌的形态构造 放线菌的菌落特征 放线菌的繁殖 放线菌的生理 放线菌与人类生活

放线菌是一类具有丝状与枝细胞的细菌 有原核 细胞壁的主要成分是肽聚糖 有的放线菌产生有鞭毛的孢子,其鞭毛类型与细菌相同,菌丝直径与细菌相仿 放线菌噬菌体的形状与细菌的相似 最适生长PH相近,一般呈微碱性 DNA重组的方式与细菌的相同,核糖体同为70S 对溶菌酶敏感;凡细菌所敏感的抗生素,放线菌也同样敏感

放线菌的分布与生活方式 放线菌一般分布在含量较低;有机物丰富和呈 微生物碱性的土壤中。107个/g左右 能看到:北方春季深层黑土地的白丝 能闻到:泥土特有的“泥腥味”

放线菌的形态结构(模式图)

基内菌丝(Substrate mycelium) 又称营养菌丝,功能是吸收营养,直径 0.2-1.2um长度100-600um,色素可有可无。 基内 菌丝

气生菌丝(Aerial mycelium) Cncnc-micro

孢子丝(Reproductive mycelium) 当气生菌丝生长发育到一定阶段,气生菌丝上分化出的可形成孢子的菌丝。 Cncnc-micro 孢子丝(Reproductive mycelium) 当气生菌丝生长发育到一定阶段,气生菌丝上分化出的可形成孢子的菌丝。 孢子的形状及在气生菌丝上排列的方式随种而异。

放线菌孢子丝类型 直形 弯曲丛生 成束 开环钩形 原始螺旋形 单轮生无螺旋 松螺旋 紧螺旋 螺旋单轮生 无螺旋两级轮生 螺旋两级轮生

放线菌的菌落形态 菌落质地硬而且致密,菌落小而不广泛延伸 菌落表面呈紧密的绒状或坚实、干燥多皱。 接种针难以挑取,有时可挑碎,有时可将整 个菌落挑起。 Cncnc-micro

老龄菌:幼龄菌菌落与细菌难以区分。 菌落周围具放射状菌丝。 由于菌丝和孢子常具不同色素,使菌落 正面,背面呈不同色泽。 Cncnc-micro

放线菌的繁殖 5 孢子丝分化形成的孢子 2.2.3放线菌的生活史: 孢子丝 气生 菌丝菌丝 孢子 萌发 基内 菌丝

放线菌的繁殖方式 分生孢子 孢子囊孢子 菌丝断裂 其他方式

分生孢子繁殖 (3)成熟孢子 (1)孢子丝中形成横隔 (2)沿横隔断裂形成孢子 横隔断裂形成孢子的过程

放线菌生理 绝大多数为异养型,能利用不同的碳水化合物。 氮源以Pr,蛋白胨,以及某些氨基酸最合适, 硝酸盐、铵盐和尿素次之. 一般都需要金属离子。 大多放线菌是好气性的。 最适温度23-370C

放线菌与人类 绝大多数抗生素由放线菌产生 用来生产纤维素、酶、维生素 具固氮作用,用于生产生物菌肥 少数寄生型放线菌可引起动植物病害 有的放线菌能破坏棉毛织品和纸张

蓝细菌的形态 链杆状 球状(正在分裂) 丝状聚合体

蓝细菌生理 是光能自养型生物:只需空气、阳光、水分、少量无机盐 没有有性生殖,以裂殖为之,也可芽殖,极少数有孢子 已知蓝细菌有20多种具固氮作用。 赤潮

其他几种原核微生物 立克次氏体 支原体 衣原体

立克次氏体(Rickettsia) 是落基山斑疹伤寒的病源体 原核,G - 只能寄生于真核细胞体内(多用鸡胚培养) 无滤过性(0.3-0.6×0.8-2um) 细胞形态多变 有不够完整的产能代谢途径 基因组1.1Mb,834个基因(98年11月公布)

支原体(Mycoplasma) 支原体的直径约为150-300nm 缺乏细胞壁 “油煎蛋”状菌落(0.1-1.0mm) 二等分裂 基因组很小,0.6-1.1Mb 能在人工培养基上独立生长 具有氧化型或发酵型的产能代谢,在好氧或厌氧条件下生长 对能与核糖体、细胞膜结合的表面活性剂、抗生素敏感

衣原体 正分裂的网状体 寄主细胞膜 始体 包涵体 中间体 衣原体(Chlamydia psittaci)在寄主细胞质中的形态

衣原体(Chlamydia) 1.有细胞构造, 有核糖体 2.细胞内同时含有DNA和RNA两种核酸 3.有革兰氏阴性菌特征的含肽聚糖的细胞壁 4.有不完整的酶系统,尤其缺乏产能代谢的酶系统 5.二等分裂繁殖; 6.对抑制细菌的抗生素如青霉素和磺胺等都很敏感 7.鸡胚卵黄囊膜、小白鼠腹腔、或HeLa细胞培养 8.三珠衣原体基因组为别为1.05Mb,1.07Mb,1.23Mb.