紫外与荧光实验 Agilent8453仪器 PE公司LS55仪器 实验内容 实验内容 数据处理与实验报告 数据处理与实验报告 2 荧光 1 紫外 Agilent8453仪器 PE公司LS55仪器 实验内容 实验内容 数据处理与实验报告 数据处理与实验报告

1 紫外 Agilent8453仪器 同时全波长扫描 Agilent8453 722 光二极管阵列 透镜 光栅

Agilent 8453 过比色皿 仪器特点 分光 全波长检测 传统仪器 分光 过比色皿 单波长检测

仪器特点 每次测量均获得全谱 波长范围：190-1100nm 但190-220nm干扰大 标准差sA：<0.001 可靠线性范围:A<2.5 上限A=4

吸光度A读数范围的选择 适当范围： A: 0.2～0.8 T: 15% ～65% A=0.434 光分析法 http://analchem.tongji. edu.cn A的适当范围 吸光度A读数范围的选择 ΔT为常数时 ΔT通常0.002 ～0.01 适当范围： A: 0.2～0.8 T: 15% ～65% A=0.434 Δc/c与ΔT的关系图

吸光度A读数范围的选择 好多教材没提及 但却是更有用的概念 新世纪，新仪器。 热噪声降低，ΔT主要受散粒效应噪声影响 下式 光分析法 http://analchem.tongji. edu.cn A的适当范围 吸光度A读数范围的选择 新世纪，新仪器。 热噪声降低，ΔT主要受散粒效应噪声影响 下式 适当A: 0.1～2.0 最佳T=0.135 A=0.86 好多教材没提及 但却是更有用的概念 Δc/c与ΔT的关系图

分光光度计 仪器操作 Turn on 放比色皿 以下：全电脑操作！ 比色皿不要装太满 顶端差1cm较合适 光面对光路, 敞开式 向下压紧

Standard 模式操作步骤 Blank 打开电脑及仪器开关 运行Instrument 1 online Mode中选Standard 按需取/使用数据 Mode中选Standard 保存文件 放入参比溶液 Blank 放入样品溶液 Sample 全部样品测完

Kinetics模式不常用 Start 打开电脑及仪器开关 运行Instrument 1 online 自动结束 Mode中选Kinetics t=0 Start 设置动力学参数 F7 设定路径文件名

chemcenter.tongji.edu.cn/analchem 实验内容 讲义下载 绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系数 紫外实验内容 我们网站 chemcenter.tongji.edu.cn/analchem IP：192.168.17.5 BBS 课件下载 本科实验教学 仪器分析实验 实验安排及讲义专题帖

熟悉仪器的操作 选波长范围、模式等 绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系数 纯水参比blank 自动扫描2种氨基酸的吸收曲线 找出λmax及相应A 紫外实验内容 纯水参比blank 自动扫描2种氨基酸的吸收曲线 找出λmax及相应A 转换成n阶导数光谱

数据处理与实验报告 绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系数 数据转换成*.dat文件 计算λmax处的ε 计算一阶导数光谱 作原图及导数光谱图 紫外实验内容 数据转换成*.dat文件 计算λmax处的ε 计算一阶导数光谱 作原图及导数光谱图 结果与讨论

4 . 文件保存，用学号(03去掉), CSV格式 (每组4文件) 例：1236Sd.csv/1236B.csv 注意事项 紫外实验内容 实验专区数据下载 稀释2份溶液 苯丙氨酸 色氨酸 或直接 ftp://192.168.17.5/ 2. 扫描光谱，看导数光谱 2005本科仪器分析实验 3. 测一次荧光 分类UV/Fluor/IR /HPLC/TOC 4 . 文件保存，用学号(03去掉), CSV格式 (每组4文件) 例：1236Sd.csv/1236B.csv 自己的文件名 5 . 数据网上下载

网上预约开放实验(说明内容/仪器/时间1:30-4:30间) 荧光实验仪器 2003环科实验安排 日期 实验6/7 实验8 实验9 11月16日 轮空 28-33(1:30) 11月23日 15-27(1:30) 1-7(1:00)/ 22-27(3:00) 28~33(1:00)／ 8-14(2:30)／1-7(3:40) 11月30日 1-7&28-33(1:00)／8-14(3:00) 8-14(1:00)/ 15-21(3:00) 15~21(1:30)／ 21-27(3:00) 12月7日 网上预约开放实验(说明内容/仪器/时间1:30-4:30间)

2 荧光 光致发光 荧光的产生 吸收激发 S1最低 S0各振动能级 荧光的产生 UV-Vis属于吸收 荧光属于发光 荧光 辐射 振动驰豫 内部转换 S1最低 荧光 辐射 S0各振动能级 UV-Vis属于吸收 荧光属于发光 光致发光 e e e e

荧光实验仪器 2 荧光 PE公司LS55仪器 四面光比色皿

Luminescence Spectrometer 荧光/磷光/发光 分光光度计 下图超级连接 LS -55 Luminescence Spectrometer 荧光/磷光/发光 分光光度计 下图超级连接

熟悉仪器的操作 2种氨基酸预扫描 以水为空白测量激发、发射和同步荧光光谱 测量2种氨基酸的激发、发射和同步荧光光谱 找出λmax处的荧光强度 氨基酸的荧光激发、发射及同步荧光光谱的测量 紫外实验内容 2种氨基酸预扫描 以水为空白测量激发、发射和同步荧光光谱 测量2种氨基酸的激发、发射和同步荧光光谱 找出λmax处的荧光强度

数据处理与实验报告 数据为txt格式, 可直接处理 作ex/em/syn三种光谱图 找λmax及相应荧光强度 结果与讨论 氨基酸的荧光激发、发射及同步荧光光谱的测量 紫外实验内容 数据为txt格式, 可直接处理 作ex/em/syn三种光谱图 找λmax及相应荧光强度 结果与讨论 一天后有效 报告在BBS上跟帖上传用学号注册 如书面请在2周内交到老师处

4 . 文件保存，用学号(03去掉), sp格式 (每组3文件) 例：1236Sex.sp/1236Bem.sp 1236Ssy.sp 注意事项 紫外实验内容 实验专区数据下载 稀释2份氨基酸溶液 浓度低多了！ 或直接 ftp://192.168.17.5/ 2. 软件使用 2005本科仪器分析实验 3. 测一次UV 分类Fluor 4 . 文件保存，用学号(03去掉), sp格式 (每组3文件) 例：1236Sex.sp/1236Bem.sp 1236Ssy.sp 自己的文件名