HPVL 1蛋白 ____宫颈上皮内HPV感染结果的预测标志物 HPV L1 Protein _The Outcome Predict Marker for Cervical Intraepithelial HPV Infection 宁夏医科大学附属医院 于黎明教授

在美国细胞学检测情况简介 在美国每年有5~6千万妇女 接受细胞涂片检查。 其中3~5百万得出异常结果。 美国每年新诊断宫颈癌病例12，200个，只占异常涂片结果的 0.25%~0.41%

由HPV感染引发的癌症的发生率及分布 宫颈 口咽癌 肛门癌 口腔癌 喉癌 外阴癌 阴茎癌 HPV例数 总例数 （年病例数）

HPV感染后的自然转归 Spontaneous Regression After HPV Infection 美国的病例数 Cancer 癌 高级别不典型增生 High-grade dysplasia 低级别不典型增生 Low-grade dysplasia 亚临床感染 Subclinical HPV infection 300,000 11,000 1,400,000 10,000,000 HPV感染 自然转归 自然转归 自然转归 很多年以后 （20+年）

高危HPV感染发展为宫颈癌的自然历程 瞬时感染 HPV感染 持续感染 低级别不 典型增生 高级别不 典型增生 浸润癌 小于1年 2年以上 2-5年以上 4-5年以上 9-15年 持续感染 低级别不 典型增生 高级别不 典型增生 浸润癌

HPV感染的自限性 Self-Limited HPV Infection 大多数生殖道HPV感染是亚临床、良性和自限性的，并且很大比例的感染后的 宫 颈不典型增生是可以自然转归的。大部分感染是瞬时感染，可以被机体的免疫系统自然清除。持续HPV感染或深部微损伤感染以及存在免疫缺陷的妇女可能发展成癌，例如： 使用类固醇激素 Steroid medications 接受器官移植 Transplanted organs 化疗 Chemotherapy 艾滋病患者 HIV

异常细胞涂片结果患者的处理指南 Management Guideline for Patients with Abnormal Cytology 目前对异常细胞学检查结果和HPV阳性患者的处理是即时行可疑病变区的阴道镜检查加活检。 美国每年大约有六千五百万妇女接受细胞学涂片筛查，其中约一千四百万涂片结果异常或HPV（+）的人接受阴道镜检查。 结果显示只有约25%为CIN-1，不到10%的患者进展为CIN-2和不足3%的妇女最终患宫颈癌。

宫颈不典型增生的过度诊断和过度治疗 The Over-Diagnostic & Over-Treatment for Cervical Dysplasia 不论是细胞学检测还是HPV-DNA分型都不能提示被检测者能够缓解以致康复或是发展成癌，不典型增生使医师和患者都感到困惑从而导致不必要的或者是过度的治疗。 目前对不典型增生最激进的处理就是给所有有可疑病变的妇女进行阴道镜检查加活 检。全世界每年有数千万患者因异常细胞涂片结果而被实施阴道镜检查。 由于这些困惑和担心，数百万计的妇女接受过度治疗，例如：组织活检、冷冻外科技术、电外科技术、激光技术、手术切除甚至免疫反应调节剂和细胞毒药物的应用。

我们需要可靠的宫颈HPV感染结果的预测指标 We Need a Reliable Predictor of Cervical Infection Outcome 尽管许多不典型增生病变无需治疗就可以自然转归，但因为我们不能预测哪些不典型增生可以自然转归，所以有不典型增生的妇女通常还是接受了治疗。 因此，不典型增生结局的预测标志物的建立是全球最当务之急的课题，它可以避免不必要的治疗以及由此而带来的相关并发症。

HPVL1病毒蛋白壳体 —— 一个有前途的宫颈细胞检测风险评估的生物学标志物 HPV L1 Capsid Protein ——A Promising Risk Assessment Biomarker in Cervical Cytology

方法 METHODS 用抗体结合宫颈局部LBC细胞L1壳体蛋白的免疫组化方法检测321例存在宫颈病变的细胞学材料。这些材料来自国立癌症研究所3年筛查随访计划系统的2065个亚临床感染门诊患者的细胞学刮片。 其中低级别鳞状上皮内病变LSILs247例（n=247），高级别鳞状上皮内病变LSILs62例（n=62），鳞状细胞癌SCCs12例（n=12）。比较随访2年的免疫化学分析结果。

结果 RESULTS 局部L1壳体蛋白在LSILs中阳性率为35%（n=87）， HSILs中阳性率为17%（n=11），但SCCs中阳性率为0 L1壳体蛋白阳性与2年不典型增生结果在LSIL中的关系为94%自然转归或无进展（n=82）；HSIL中87%转归或无进展（n=9）。） L1壳体蛋白阴性与2年不典型增生结果在LSIL中的关系为82%进展（n=131），HSIL中96%进展（n=49）。 2065例刮片中1982例HPVL1阳性（95.5%）；83例阴性（4.01%）。1982例阳性涂片中没有患者进展；4例HPVL1阴性涂片结果患者3年后被发现存在LSIL/HSIL病变（4.7%

讨 论 Discussion

编码2个结构蛋白后的成熟乳头瘤病毒 Mature Papillomaviruses After Encode Two Structural Proteins “裸体”HPV病毒通过形成其L1/L2结构蛋白完成其成熟过程（成为有活性的病毒）。 L1:主要的结构蛋白。每个病毒颗粒含有72个五壳粒病毒的360个复制体。 L1 L1 L2 L1 L1 L1

15-24岁美国常见性传播感染的年发生率（每10万人中） 性传播疾病发生率 淋病 梅毒 乙肝 滴虫病 衣原体 生殖器疱疹

全球HPV统计数据 加拿大 法国 中国 - 山西省 墨西哥 津巴布韦 阿根廷 全球流行的HPV感染估计约有六亿三千万 流行的感染地区如下： （9%—13%） 流行的感染地区如下： 加拿大 法国 中国 - 山西省 墨西哥 津巴布韦 阿根廷

2008年医学诺贝尔奖获得者 The Nobel Prize in Medicine 2008 因为他对HPV感染引起宫颈癌的发现； 因为他对HIV的发现。 Dr. Harald zur Hausen German Cancer Research Centre Heidelberg 德国癌症研究中心——Heidelberg

良性和恶性HPV感染 Benign HPV Infection and Malignant HPV Infection 良性HPV感染：HPV基因组作为一个循环游离体能够从宿主的细胞核中分离出来；被感染的细胞表现类似HPV6或11感染(-生殖道疣）的良性复制活动。 恶性HPV感染：HPV基因组被典型地整合到宿主的宫颈细胞DNA中。被感染的细胞表现类似HPV16或18感染(宫颈不典型增生）的高度恶性复制活动。

HPV基因组游离体和亚种间杂交繁殖 HPV Genome Episomal & Intergratation Genital warts 生殖器疣 High-grade Precursor 高级别先质 （前体） Invasive Cancer 浸润性癌 From Beutner, KR et al, "Human Papillomavirus and Human Disease." Am J Med 1997; 102(5A):9-15.

HPV感染途径 Papillomavirus Infection Passway 病毒【粒】体 （指成熟病毒） 微损伤 表皮 病毒蛋白 （壳体和 非壳体） 基底上层 基底层 （非壳体 只 低度表达） From Lowy & Schiller, J Clin Invest 116:1167-73, 2006

HPVL1技术的临床应用 Clinical Application of HPV-L1 Technology

宫颈癌中HPV类型的全球地区分布 Distribution of HPV Types in Cervical Cancer by Geographical Region 非洲 欧洲 拉丁美洲 东南亚 北美洲

HPV引发的多种增生性疾病 （粘膜相关癌） （手疣） HPVs Cause A Variety of Proliferative Diseases foot warts EV cutaneous, mostly asymptomatic （足疣） （皮肤疣状表皮发育不良） （大多数无症状） mucosal, cancer- associated HPV16 hand warts （粘膜相关癌） （手疣） HPV18 （生殖器疣） HPV6 HPV11 genital warts

HPVL1抗原只在细胞核中表达 HPV L1 Antigen only Express in the Nucleus CytoReact® -TissueTM CytoReact® -CellTM

HPVL1在高危评估中的作用 Role of HPV L1 in Risk Assessment HPVL1阳性在发展中的CIN2病变中的阴性预测值为100% HPVL1阴性在发展中的CIN2病变中的阳性预测值如下 未明确意义的非典型鳞状细胞 ASC 15% 低度鳞状上皮内病变 LSIL 31% 高度可疑未明确意义的非典型鳞状细胞 ASC-H 34% 高度鳞状上皮内病变 HSIL 85% 。

HPVL1蛋白检测的意义 Significance of Detection of HPV L1 Protein 检测出HPVL1表明瞬时HPV感染的阶段 检测出HPVL1与异常细胞学转归有很好的相关性 HPV阳性患者若丢失HPVL1将表现为持续的HPV感染并且进展为有临床意义的CIN病变

临床意义 Clinical Cytology HPV L1 Clinical Significance 细胞学检测 HPVL1检测 临床意义 正常 阴性 没有HPV感染或无意义 正常 HPV感染阶段，但无疾病 阳性 异常 阴性 处在发展为CIN2病变的高危状态 异常 阳性 处在发展为CIN2病变的低危状态

结论 Conclusion 检测细胞或组织刮片中的HPVL1壳体蛋白，联合细胞学评估提供了一种相对高特异性的预测，存在HPV阳性或异常细胞学结果的妇女其疾病转归或进展的生物学指标。 涂片上进行的HPVL1递减杂交/免疫细胞化学/免疫组织化学染色容易实施并且容易解释。

—新的筛查组合 （细胞学检测 + HPVL1检测） 预防宫颈癌的策略 —新的筛查组合 （细胞学检测 + HPVL1检测） Cervical Cancer Prevention Strategy by New Combo Screening System (Cytology Test + HPV L1 Test) No more confuse, No more worry and no more over treatment! 再也没有困惑，没有担心，也没有过度治疗。 (癌前) HPV (癌) Precancer Cancer Cytology Test + HPV L1 Test (细胞学检测 + HPVL1检测) HPV DNA Test (option) HPV-DNA检测（可选或不选） Currently: Cytology Test 当前 (细胞学检测) HPV L1 Test 1 HPV L1 Test 2 Future?: L1 HPV Vaccinate HPV L1 Test 3 未来？ (L1-HPV疫苗) Thanks to Mark Schiffman and Phil Castle, NCI

谢谢