第3章 酶 Enzyme 生化与分子生物学系 蔡文秀

酶的概念 目前将生物催化剂分为两类: 酶 、 核酶（脱氧核酶） 酶是一类对其特异底物具有高效催化作用的蛋白质。 E + S ES E + P

酶学研究简史 公元前两千多年，我国已有酿酒记载。 一百余年前，Pasteur认为发酵是酵母细胞生命活动的结果。 1878年，Kühne首次提出Enzyme一词。 1897年，Eduard Buchner用不含细胞的酵母提取液，实现了发酵。 1926年，Sumner首次从刀豆中提纯出脲酶结晶 (deoxyribozyme)。

1982年，Cech首次发现RNA也具有酶的催化活性，提出核酶(ribozyme)的概念。 1995年，Jack W.Szostak研究室首先报道了具有DNA连接酶活性DNA片段，称为脱氧核酶(deoxyribozyme)。

第一节 酶的分子结构与功能 The Molecular Structure and Function of Enzyme

酶的不同形式: 单体酶(monomeric enzyme)：仅具有三级结构的酶。 寡聚酶(oligomeric enzyme)：由多个相同或不同亚基以非共价键连接组成的酶。 多酶体系(multienzyme system)：由几种不同功能的酶彼此聚合形成的多酶复合物。 多功能酶(multifunctional enzyme)或串联酶(tandem enzyme)：一些多酶体系在进化过程中由于基因的融合，多种不同催化功能存在于一条多肽链中，这类酶称为多功能酶。

一、酶的分子组成 单纯酶 (simple enzyme) 结合酶 (conjugated enzyme) 蛋白质部分：酶蛋白 (apoenzyme) 辅助因子 (cofactor) 金属离子 小分子有机化合物 全酶 (holoenzyme)

全酶分子中各部分在催化反应中的作用: 酶蛋白决定反应的特异性 辅助因子决定反应的种类与性质

金属离子是最多见的辅助因子 金属酶(metalloenzyme) 金属离子与酶结合紧密，提取过程中不易丢失。 金属激活酶(metal-activated enzyme) 金属离子为酶的活性所必需，但与酶的结合不甚紧密。

金属离子的作用： 参与催化反应，传递电子； 在酶与底物间起桥梁作用； 稳定酶的构象； 中和阴离子，降低反应中的静电斥力等。

小分子有机化合物是一些化学稳定的小分子物质，称为辅酶 (coenzyme)。 其主要作用是参与酶的催化过程，在反应中传递电子、质子或一些基团。 辅酶的种类不多，且分子结构中常含有维生素或维生素类物质。

某些辅酶（辅基）在催化中的作用 转移的基团 小分子有机化合物（辅酶或辅基） 名 称 所含的维生素 氢原子（质子） 名　称 所含的维生素 氢原子（质子） NAD＋（尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸，辅酶I 尼克酰胺（维生素PP）之一 NADP＋（尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，辅酶II FMN（黄素单核苷酸） 维生素B2（核黄素） FAD（黄素腺嘌呤二核苷酸） 醛基 TPP（焦磷酸硫胺素） 维生素B1（硫胺素） 酰基 辅酶A（CoA） 泛酸 硫辛酸 烷基 钴胺素辅酶类 维生素B12 二氧化碳 生物素 氨基 磷酸吡哆醛 吡哆醛（维生素B6之一） 甲基、甲烯基、甲炔基、甲酰基等一碳单位 四氢叶酸 叶酸

辅酶与辅基 （1）辅基：与酶蛋白结合较牢固，甚至通过共价键结合，用透析或超滤的方法不能将其与酶蛋白分开。在反应中辅基不能离开酶蛋白。 （2）辅酶：与酶蛋白结合疏松，可以用透析或超滤的方法除去。在反应中辅酶作为底物接受质子或基团离开酶蛋白，参加另一酶促反应并将所携带的质子或基团转移出去。

维生素与辅酶 （一）维生素（ vitamin）定义： 维生素是机体维持正常功能所必需，但在体内不能合成，或合成量很少，必须由食物供给的一组低分子量有机物质。 维生素的每日需要量甚少，它们既不是构成机体组织的成分，也不是体内供能物质，然而在调节物质代谢和维持生理功能等方面却发挥着重要作用。

（二）维生素的分类 （1）脂溶性维生素： 不溶于水，而溶于脂类及脂肪溶剂。 维生素A、D、E、K （2）水溶性维生素： 易溶于水，在体内不易储存，容易从尿中排出。 B族维生素和维生素C。

（三）参与组成辅酶的B族维生素 维生素B1、B2、PP、B6、B12、泛酸、硫辛酸、叶酸、生物素等。

1、维生素B1 （硫胺素） 分子中含噻唑环和嘧啶环。在体内可转变为硫胺素焦磷酸（TPP）；

丙酮酸脱羧酶

2、维生素B2（核黄素） 分子中含异咯嗪环，在体内可转变为黄素单核苷酸（FMN）和黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）。

3、维生素PP（尼克酸和尼克酰胺） 属吡啶衍生物，在体内可转变为两种辅酶：尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+，辅酶Ⅰ）和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+，辅酶Ⅱ）。 NAD+和NADP+的尼克酰胺部分在供氢体和受氢体之间传递氢原子，二者均可作为脱氢酶的辅酶。

（2H++2e） + H+

4、维生素B6 包括吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺三种化合物，在体内可磷酸化为磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺，可作为氨基酸转氨酶和氨基酸脱羧酶的辅酶。

氨基转移酶（转氨酶）

5、泛酸（遍多酸） 由2，4-二羟基3，3-二甲基丁酸和β-丙氨酸组成。 进入人体后，经磷酸化并获得巯基乙胺而生成4-磷酸泛酰巯基乙胺。4-磷酸泛酰巯基乙胺是辅酶A(CoA)及酰基载体蛋白(ACP)的组成部分，所以CoA及ACP为泛酸在体内的活性型，可作为各种酰基转移酶的辅酶，起转运乙酰基和脂酰基的作用。

β-丙氨酸 2，4-二羟基 3，3-二甲基丁酸 巯基乙胺 辅酶A

6、生物素 是一个由噻吩和尿素相结合的骈环并且有戊酸侧链的化合物。通过其戊酸侧链的羧基与酶蛋白共价相连，作为多种羧化酶的辅酶。生物素可与CO2结合，起着CO2载体的作用。 -OOC

7、叶 酸 由蝶啶、对氨基苯甲酸和谷氨酸三部分组成，在体内可被还原生成四氢叶酸（FH4），FH4是一碳单位转移酶的辅酶，分子中N5，N10位是结合一碳单位的部位。

8、维生素B12（钴胺素） 是体内唯一含金属元素的维生素，在体内有多种辅酶形式，其中甲基钴胺素是转甲基酶的辅酶，它与四氢叶酸的作用相联系。5’-脱氧腺苷钴胺素是一些变位酶的辅酶

9、 α-硫辛酸 α硫辛酸的结构是6，8二硫辛酸，能还原为二氢硫辛酸，为硫辛酸乙酰转移酶的辅酶。

（TPP） （HSCoA） （FH4）

二、酶的活性中心是酶分子中执行其催化功能的部位 必需基团(essential group) 酶分子中氨基酸残基侧链的化学基团中，一些与酶活性密切相关的化学基团。

酶的活性中心 (active center) 指必需基团在空间结构上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，能与底物特异结合并将底物转化为产物。 任何酶至少有一个活性中心，如果没有活性中心或活性中心被掩盖，酶则没有催化作用；酶活性中心的空间结构决定了酶对底物的专一性。

活性中心内的必需基团 结合基团 (binding group) 与底物相结合 催化基团 (catalytic group) 催化底物转变成产物 活性中心外的必需基团 位于活性中心以外，维持酶活性中心应有的空间构象和（或）作为调节剂的结合部位所必需。

底 物 活性中心以外的必需基团 催化基团 活性中心 结合基团

溶菌酶的活性中心 溶菌酶的活性中心是一裂隙，可以容纳肽多糖的6个单糖基（A，B，C，D，E，F），并与之形成氢键和van derwaals力。 催化基团是35位Glu，52位Asp； 101位Asp和108位Trp是结合基团。

三、同工酶 定义 同工酶 (isoenzyme)是指催化相同的化学反应，而酶蛋白的分子结构理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。

根据国际生化学会的建议，同工酶是由不同基因编码的多肽链，或由同一基因转录生成的不同mRNA所翻译的不同多肽链组成的蛋白质。 同工酶存在于同一种属或同一个体的不同组织或同一细胞的不同亚细胞结构中，它使不同的组织、器官和不同的亚细胞结构具有不同的代谢特征。这为同工酶用来诊断不同器官的疾病提供了理论依据。

举例 1 乳酸脱氢酶的同工酶 H M LDH1 (H4) LDH2 (H3M) LDH3 (H2M2) LDH4 (HM3) LDH5

肌酸激酶 (creatine kinase, CK) 同工酶 举例 2 B B M B M M CK1(BB) CK2(MB) CK3(MM) 脑 心肌 骨骼肌 肌酸激酶 (creatine kinase, CK) 同工酶

第二节 酶的工作原理 The Mechanism of Enzyme Action

酶与一般催化剂的共同点： 在反应前后没有质和量的变化； 只能催化热力学允许的化学反应； 只能加速可逆反应的进程，而不改变反应的平衡点。

一、酶促反应的特点 （一）酶促反应具有极高的效率 （二）酶促反应具有高度的特异性 （三）酶促反应的可调节性 （四）酶促反应的高度不稳定性

（一）酶促反应具有极高的效率 酶的催化效率通常比非催化反应高108～1020倍，比一般催化剂高107～1013倍。 酶的催化不需要较高的反应温度。 酶和一般催化剂加速反应的机理都是降低反应的活化能(activation energy)。酶比一般催化剂更有效地降低反应的活化能。

根据酶对其底物结构选择的严格程度不同，酶的特异性可大致分为以下3种类型： 绝对特异性(absolute specificity)：只能作用于特定结构的底物，进行一种专一的反应，生成一种特定结构的产物 。 相对特异性(relative specificity)：作用于一类化合物或一种化学键。 立体结构特异性(stereospecificity)：作用于立体异构体中的一种。

绝对专一性 酶只能催化一种物质进行一种化学反应的性质。

相对专一性 酶催化同一类化合物或同一种化学键进行同一类型化学反应的性质。 内肽酶

立体异构专一性 酶只对一种立体异构体起催化作用，对其他的异构体则没有催化能力的性质。

—H H— —COO- 顺丁烯二酸

（三）酶促反应的可调节性 酶促反应受多种因素的调控，以适应机体对不断变化的内外环境和生命活动的需要。

（四）高度的不稳定性 酶发挥催化效力一般都要求比较温和的条件，如常温、常压、接近中性的酸碱度等。 强酸、强碱、重金属盐、有机溶剂、高温、紫外线剧烈震荡等使蛋白质变性的理化因素都可以使酶失去催化活性。

核糖核酸酶的变性

二、酶通过促进底物形成过渡态而提高反应速率 （一）酶比一般催化剂更有效地降低反应活化能 酶和一般催化剂一样，加速反应的作用都是通过降低反应的活化能 (activation energy) 实现的。 活化能：底物分子从初态转变到活化态所需的能量。

反应总能量改变 非催化反应活化能 酶促反应 活化能 一般催化剂催 化反应的活化能 能 量 反 应 过 程 底物 产物 酶促反应活化能的改变

（二）酶-底物复合物的形成有利于底物转变成过渡态 酶底物复合物 E + S E + P ES (过渡态)

诱导契合作用使酶与底物密切结合 酶与底物相互接近时，其结构相互诱导、相互变形和相互适应，进而相互结合。这一过程称为酶-底物结合的诱导契合(induced-fit) 。

羧肽酶的诱导契合模式 底物

2.邻近效应与定向排列使诸底物正确定位于酶的活性中心 酶在反应中将诸底物结合到酶的活性中心，使它们相互接近并形成有利于反应的正确定向关系。 这种邻近效应(proximity effect)与定向排列(orientation arrange)实际上是将分子间的反应变成类似于分子内的反应，从而提高反应速率。

邻近效应与定向排列：

3.表面效应使底物分子去溶剂化 酶的活性中心多是酶分子内部的疏水“口袋”，酶反应在此疏水环境中进行，使底物分子脱溶剂化 (desolvation)，排除周围大量水分子对酶和底物分子中功能基团的干扰性吸引和排斥，防止水化膜的形成，利于底物与酶分子的密切接触和结合。这种现象称为表面效应(surface effect)。

（三）酶的催化机制呈多元催化作用 一般酸-碱催化作用(general acid-base catalysis) 共价催化作用(covalent catalysis) 亲核催化作用(nucleophilic catalysis)

Kinetics of Enzyme-Catalyzed Reaction 第三节 酶促反应动力学 Kinetics of Enzyme-Catalyzed Reaction

酶促反应动力学：研究各种因素对酶促反应速率的影响，并加以定量的阐述。 影响因素包括：酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。

一、底物浓度对反应速率影响的作图呈矩形双曲线 [S] V 在其他因素不变的情况下，底物浓度对反应速率的影响呈矩形双曲线关系。

研究前提： 单底物、单产物反应； 酶促反应速率一般在规定的反应条件下，用单位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示； 反应速率取其初速率，即底物的消耗量很小（一般在5﹪以内）时的反应速率 底物浓度远远大于酶浓度。

[S] V Vmax 当底物浓度较低时： 反应速率与底物浓度成正比；反应为一级反应。

[S] V Vmax 随着底物浓度的增高： 反应速率不再成正比例加速；反应为混合级反应。

[S] V Vmax 当底物浓度高达一定程度： 反应速率不再增加，达最大速率；反应为零级反应

（一）米－曼氏方程式揭示单底物反应的动力学特性 解释酶促反应中底物浓度和反应速率关系的最合理学说是中间产物学说： E + S k1 k2 k3 ES E + P 中间产物

── Ｖ Vmax[S] Km + [S] Ｋm：米氏常数(Michaelis constant) 1913年Michaelis和Menten提出反应速率与底物浓度关系的数学方程式，即米－曼氏方程式，简称米氏方程式 (Michaelis equation)。 Ｖ Vmax[S] Km + [S] ＝ ── [S]：底物浓度 V：不同[S]时的反应速率 Vmax：最大反应速率(maximum velocity) Ｋm：米氏常数(Michaelis constant)

米－曼氏方程式推导基于两个假设： E与S形成ES复合物的反应是快速平衡反应，而ES分解为E及P的反应为慢反应，反应速率取决于慢反应即 V = k3[ES]。 (1) S的总浓度远远大于E的总浓度，因此在反应的初始阶段，S的浓度可认为不变即[S] =[St]。

米－曼氏方程式推导过程： 当反应处于稳态时： ES的生成速率 = ES的分解速率 k1 ([E]－[ES]) [S] = k2 [ES] + k3 [ES] (2) = ([E]－[ES])[S] k2+k3 [ES] k1 整理得： k2+k3 = Km （米氏常数） k1 令： 则(2)变为: ([E]－[ES]) [S] = Km [ES]

[ES] = ─── [E][S] Km + [S] (3) 整理得: 将(3)代入(1) 得 k3[E][S] Km + [S] (4) V = ──── 当底物浓度很高，将酶的活性中心全部饱和时，即[E] =[ES]，反应达最大速率 Vmax = k3[ES] = k3[E] (5) Vmax [S] Km + [S] V = ──── 将(5)代入(4)得米氏方程式：

（二）Km与Vm是有意义的酶促反应动力学参数 Km与Vmax的意义

Km值的推导 当反应速率为最大反应速率一半时： Vmax V [S] Km Vmax/2 2 = Km + [S] Vmax Vmax[S] Km = [S] Km值等于酶促反应速率为最大反应速率一半时的底物浓度，单位是mol/L。

Km与Vmax的意义 Km值 定义：Km等于酶促反应速率为最大反应速率一半时的底物浓度。 意义： Km是酶的特征性常数之一，只与酶的结构、底物和反应环境（如，温度、pH、离子强度）有关，与酶的浓度无关。 Km可近似表示酶对底物的亲和力； 同一酶对于不同底物有不同的Km值。

Vmax 定义：Vm是酶完全被底物饱和时的反应速率，与酶浓度成正比。 意义：Vmax=k3 [E] 如果酶的总浓度已知，可从Vmax计算酶的转换数(turnover number)，即动力学常数k3。

酶的转换数 (turnover number) 定义: 当酶被底物充分饱和时，单位时间内每个酶分子催化底物转变为产物的分子数。 意义: 可用来比较每单位酶的催化能力。

（三）Ｋm值与Ｖmax值可以通过作图法求取 1. 双倒数作图法(double reciprocal plot)，又称为 林-贝氏(Lineweaver- Burk)作图法 Vmax[S] Km+[S] V = （林－贝氏方程） + 1/V= Km Vmax 1/Vmax 1/[S] 两边同取倒数 -1/Km 1/Vmax 1/[S] 1/V

[S]/V=Km/Vmax + [S]/Vmax 2. Hanes作图法 在林－贝氏方程基础上，两边同乘[S] [S] [S]/V -Km Km/Vm 1/Vmax [S]/V=Km/Vmax + [S]/Vmax

二、底物足够时酶浓度对反应速率的影响呈直线关系 在酶促反应系统中，当底物浓度大大超过酶的浓度，酶被底物饱和时，反应速率达最大速率。此时，反应速率和酶浓度变化呈正比关系。

当[S]>>[E]时，Vmax = k3 [E] V [E] 当[S]＞＞[E]，酶可被底物饱和的情况下，反应速率与酶浓度成正比。 关系式为：V = k3 [E] 当[S]>>[E]时，Vmax = k3 [E] 酶浓度对反应速率的影响

三、温度对反应速率的影响具有双重性 温度对酶促反应速率具有双重影响。 低温酶活性降低 （但未失活），温度回升，酶可恢复活性； 中温0-40℃，随 温度升高，V↑ 高温＞60℃ 酶开始变性，80℃变性不可逆，失去活性 在一定条件下，酶促反应速率最快时反应体系的温度称为酶促反应的最适温度(optimum temperature)。

温度对淀粉酶活性的影响

酶的最适温度不是酶的特征性常数，它与反应进行的时间有关。 酶的活性虽然随温度的下降而降低，但低温一般不使酶破坏。温度回升后，酶又恢复其活性。

四、pH通过改变酶和底物分子解离状态影响反应速率 酶催化活性最高时反应体系的pH称为酶促反应的最适pH (optimum pH)。 pH对某些酶活性的影响

最适pH不是酶的特征性常数，它受底物浓度、缓冲液种类与浓度、以及酶纯度等因素的影响。

五、抑制剂可逆地或不可逆地降低酶促反应速率 酶的抑制剂(inhibitor) 凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白 变性的物质称为酶的抑制剂。 酶的抑制区别于酶的变性： 抑制剂对酶有一定选择性 引起变性的因素对酶没有选择性

抑制作用的类型 根据抑制剂和酶结合的紧密程度不同，酶的抑制作用分为： 不可逆性抑制 (irreversible inhibition) 可逆性抑制 (reversible inhibition) 竞争性抑制 (competitive inhibition) 非竞争性抑制 (non-competitive inhibition) 反竞争性抑制 (uncompetitive inhibition)

（一）不可逆性抑制剂主要与酶共价结合 概念 抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活。 举例 有机磷化合物  羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物  巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL)

有机磷化合物 羟基酶 失活的酶 酸 路易士气 巯基酶 失活的酶 酸 失活的酶 BAL 巯基酶 BAL与砷剂结合物

（二） 可逆性抑制作用 概念 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 类型 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制

竞争性抑制作用的抑制剂与底物竞争结合酶的活性中心 定义 抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶－底物复合物的形成。这种抑制作用称为竞争性抑制作用。

+ I EI E + S E + P ES S 反应模式 + E S I ES EI P

特点 I与S结构类似，竞争酶的活性中心； 抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力及底物浓度； 抑制剂↑ 无抑制剂 1/V 1/[S] 动力学特点：Vmax不变，表观Km增大。

举例 丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 延胡索酸

磺胺类药物的抑菌机制 ——与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶 二氢蝶呤啶 ＋ 对氨基苯甲酸 ＋ 谷氨酸 二氢叶酸 合成酶

非竞争性抑制作用的抑制剂不改变酶对底物的亲和力 定义 抑制剂与酶活性中心外的必需基团相结合，不影响酶与底物的结合，酶和底物的结合也不影响酶与抑制剂的结合。底物和抑制剂之间无竞争关系。但酶-底物-抑制剂复合物(ESI)不能进一步释放出产物。这种抑制作用称作非竞争性抑制作用。

E+S ES E+P + I EI+S EIS 反应模式 + S － S + ESI EI E ES P

特点 抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系； 抑制剂↑ 1 / V 1/[S] 无抑制剂 抑制程度取决于抑制剂的浓度； 动力学特点：Vmax降低，表观Km不变。

反竞争性抑制作用的抑制剂仅与酶-底物复合物结合 定义 抑制剂仅与酶和底物形成的中间产物(ES)结合，使中间产物ES的量下降。这样，既减少从中间产物转化为产物的量，也同时减少从中间产物解离出游离酶和底物的量。这种抑制作用称为反竞争性抑制作用。

反应模式 E+S E+P ES + I ESI + E S ES ESI P

特点： 抑制剂只与酶－底物复合物结合； • 抑制程度取决与抑制剂的浓度及底物的浓度； 抑制剂↑ 1/V 1/[S] 无抑制剂 动力学特点：Vmax降低，表观Km降低。

各种可逆性抑制作用的比较  

六、激活剂可加快酶促反应速率 定义 使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质称为激活剂(activator)。 种类 必需激活剂 (essential activator) 非必需激活剂 (non-essential activator)

第四节 酶的调节 The Regulation of Enzyme

调节对象：关键酶 调节方式 酶活性的调节（快速调节） 酶含量的调节（缓慢调节）

一、酶促反应速率的快速调节 （一）变构酶通过变构调节酶的活性 变构调节 (allosteric regulation) 一些代谢物可与某些酶分子活性中心外的某部分可逆地结合，使酶构象改变，从而改变酶的催化活性，此种调节方式称变构调节。 变构酶 (allosteric enzyme) 变构部位 (allosteric site) 变构激活剂 变构抑制剂 变构效应剂 (allosteric effector)

变构酶常为多个亚基构成的寡聚体，具有协同效应。 变构激活 变构抑制 变构酶的Ｓ形曲线 [S] V 无变构效应剂 酶的变构调节是体内代谢途径的重要快速调节方式之一。

（二）酶的化学修饰调节是通过某些化学基团与酶的共价结合与分离实现的 共价修饰(covalent modification) 在其他酶的催化作用下，某些酶蛋白肽链上的一些基团可与某种化学基团发生可逆的共价结合，从而改变酶的活性，此过程称为共价修饰。

常见类型 磷酸化与脱磷酸化（最常见） 乙酰化和脱乙酰化 甲基化和脱甲基化 腺苷化和脱腺苷化 －SH与－S－S互变 酶的化学修饰是体内快速调节的另一种重要方式。

蛋白激酶 磷蛋白磷酸酶 酶蛋白 酶蛋白 酶的磷酸化与脱磷酸化 ATP ADP Thr Ser Tyr -O-PO32- -OH Thr H2O Pi 磷蛋白磷酸酶 酶的磷酸化与脱磷酸化

（三）酶原的激活使无活性的酶原转变成有催化活性的酶 酶原 (zymogen) 有些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体，此前体物质称为酶原。 酶原的激活 在一定条件下，酶原向有活性酶转化的过程。

一个或几个特定的肽键断裂，水解掉一个或几个短肽 酶原激活的机理 酶 原 分子构象发生改变 形成或暴露出酶的活性中心 一个或几个特定的肽键断裂，水解掉一个或几个短肽 在特定条件下

甘 异 赖 缬 天 组 丝 甘 异 缬 组 丝 赖 缬 天 胰蛋白酶原的激活过程 肠激酶 胰蛋白酶 甘 异 赖 缬 天 组 丝 S 46 183 活性中心 甘 异 缬 组 丝 S 赖 缬 天 胰蛋白酶原的激活过程

酶原激活的生理意义 避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化，并使酶在特定的部位和环境中发挥作用，保证体内代谢正常进行。如消化道蛋白酶以酶原形式分泌，避免了胰腺细胞和细胞外间质的蛋白质被蛋白酶水解。 有的酶原可以视为酶的储存形式。在需要时，酶原适时地转变成有活性的酶，发挥其催化作用。如凝血和纤维蛋白溶解酶类以酶原形式在血液循环中运行，一旦需要便不失时机转化为有活性的酶，发挥其对机体的保护作用。

二、 酶含量的调节 （一）酶蛋白合成可被诱导或阻遏 诱导作用(induction) 阻遏作用(repression)

（二）酶降解的调控与一般蛋白质降解途径相同 溶酶体蛋白酶降解途径（不依赖ATP的降解途径） 非溶酶体蛋白酶降解途径（又称依赖ATP和泛素的降解途径）

第五节 酶的命名与分类 The Naming and Classification of Enzyme

一、酶可根据其催化的反应类型予以分类 根据酶反应的类型，酶可分为六大类，其排序如下: 氧化还原酶类 (oxidoreductases) 转移酶类 (transferases ) 水解酶类 (hydrolases) 裂解酶类 (lyases) 异构酶类 (isomerases) 合成酶类 (synthetases, ligases)

二、每一种酶均有其系统名称和推荐名称 系统名称 (systematic name) 推荐名称 (recommended name)

一些酶的分类与命名 酶的分类 催化的化学反应举例 系统名称 EC编号 推荐名称 氧化还原酶类 乙醛 + NADH + H+ 乙醇脱氢酶 转移酶类 草酰乙酸 +L-谷氨酸 L-天冬氨酸：-酮戊二酸 氨基转移酶 EC 2.6.1.1 天冬氨酸转氨酶 水解酶类 D-葡萄糖 + H3PO4 D-葡糖-6-磷酸水解酶 EC 3.1.3.9 葡糖6-磷酸酶 裂解酶类 磷酸二羟丙酮 + 醛 酮糖-1-磷酸裂解酶 EC 4.1.2.7 醛缩酶 异构酶类 D-果糖-6-磷酸 D-葡糖-6-磷酸 酮-醇异构酶 EC 5.3.1.9 磷酸果糖异构酶 连接酶类 L-谷氨酰胺 + ADP + 磷酸 L-谷氨酸：氨连接酶 EC 6.3.1.2 谷氨酰胺合成酶

第六节 酶与医学的关系 The Relation of Enzyme and Medicine

一、酶和疾病密切相关 （一）酶的质、量与活性的异常均可引起某些疾病 有些疾病的发病机理直接或间接和酶的异常或酶活性受到抑制相关。 许多疾病也可引起酶的异常，这种异常又使病情加重。 激素代谢障碍或维生素缺乏可引起某些酶的异常。 酶活性受到抑制多见于中毒性疾病。

（二）酶的测定有助于对许多疾病的诊断 1．酶活性测定和酶活性单位是定量酶的基础 酶的活性是指酶催化化学反应的能力，其衡量的标准是酶促反应速率。 酶促反应速率可在适宜的反应条件下，用单位时间内底物的消耗或产物的生成量来表示。 酶的活性单位是衡量酶活力大小的尺度，它反映在规定条件下，酶促反应在单位时间（s、min或h）内生成一定量（mg、μg、μmol等）的产物或消耗一定数量的底物所需的酶量。

国际单位(IU) 在特定的条件下，每分钟催化1μmol底物转化为产物所需的酶量为一个国际单位。 催量单位(katal) １催量(kat)是指在特定条件下，每秒钟使１mol底物转化为产物所需的酶量。 kat与IU的换算： 1 IU=16.67×10-9 kat

2．血清酶对某些疾病的诊断具有更重要的价值 酶水平的改变 病毒性肝炎 胆管阻塞 肌营养不良 急性心肌梗死 急性胰腺炎 肿瘤转移到 其他 肝 骨 胆碱酶酯  或  有机磷化合物中毒 丙氨酸转氨酶   或 天冬氨酸转氨酶  碱性磷酸酶 骨疾病，骨折 酸性磷酸酶 前列腺癌 乳酸脱氢酶 巨幼红细胞性贫血 肌酸激酶 脂酶 小肠穿孔小肠穿孔 淀粉酶 -谷氨酰转移酶

（三）酶和某些疾病的治疗关系密切 许多药物可通过抑制生物体内的某些酶来达到治疗目的。 通过阻断相应的酶活性，以达到遏制肿瘤生长的目的。 酶还可以直接用于治疗目的。

二、酶在医学上的应用领域广泛 （一）酶作为试剂用于临床检验和科学研究 1．酶法分析是以酶作为工具对化合物和酶活性进行定量分析的一种方法 酶法分析即酶偶联测定法(enzyme coupled assays)，是利用酶作为分析试剂，对一些酶的活性、底物浓度、激活剂、抑制剂等进行定量分析的一种方法。

2．酶标记测定法是酶学与免疫学相结合的一种测定方法 酶标记测定法是利用酶检测的敏感性对无催化活性的蛋白质进行检测的一种方法。酶可以代替同位素与某些物质相结合，从而使该物质被酶所标记。通过测定酶的活性来判断被其定量结合的物质的存在和含量。 当前应用最多的是酶联免疫测定法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）。

3．工具酶广泛地应用于分子克隆领域 除上述酶偶联测定法外，人们利用酶具有高度特异性的特点，将酶做为工具，在分子水平上对某些生物大分子进行定向的分割与连接。

（二）酶的分子工程是方兴未艾的酶工程学 酶分子工程主要是利用物理、化学或分子生物学方法对酶分子进行改造，包括对酶分子中功能基团进行化学修饰、酶的固定化、抗体酶等等，以适应医药业、工业、农业等的某种需要。

1．固定化酶是固相酶 固定化酶（immobilized enzyme）是将水溶性酶经物理或化学方法处理后，成为不溶于水但仍具有酶活性的酶衍生物。 固定化酶在催化反应中以固相状态作用于底物，并保持酶的高度特异性和催化的高效率。

2．抗体酶是具有酶活性的抗体 将底物的过渡态类似物作为抗原，注入动物体内产生抗体，则抗体在结构上与过渡态类似物互相适应并可相互结合。该抗体便具有能催化该过渡态反应的酶活性。当抗体和底物结合时，就可使底物转变为过渡态进而发生催化反应。 这种具有催化功能的抗体分子称为抗体酶(abzyme)。