From Gene to Recombinant DNA Technology
1-1 基因的組成 (Composition of Gene) DNA(deoxyribonucleic acid, 去氧核糖核酸) 基因是染色體上具特殊序列的DNA區段,由Adenine(腺嘌呤, A)、Guanine(鳥糞嘌呤, G)、Thymine(胸腺嘧啶, T)、Cytosine(胞嘧啶, C)等四種鹼基(base)與去氧核糖(deoxyribose)及磷酸根(phosphate group)所形成的〝去氧核糖核苷酸〞(deoxyribonucleotide)的聚合體(polymer)。
DNA 腺嘌呤去氧核糖核苷酸(A, adenine deoxyribonucleotide) 鳥糞嘌呤去氧核糖核苷酸(G, guanine deoxyribonucleotide) 胞嘧啶去氧核糖核苷酸(C, cytosine deoxyribonucleotide 胸腺嘧啶去氧核糖核苷酸(T, thymine deoxyribonucleotide)
DNA雙股螺旋結構
1-2 基因構造與基因密碼 (Gene Structure and Genetic Code) 完整的基因構造:起動子(promoter)、exon(表現子)與intron(隱藏子)等區域。 遺傳訊息由DNA傳遞至mRNA的過程,稱之為〝轉錄〞(transcription),這個過程是發生在細胞核中。 所形成的mRNA接著就被運送到細胞質中的內質網,開始蛋白質的合成,這個步驟稱為〝轉譯〞(translation)。
RNA(ribonucleic acid, 核糖核酸) RNA則是由Adenine(腺嘌呤,A)、Guanine(鳥糞嘌呤,G)、Uracil (脲嘧啶,U)、Cytosine(胞嘧啶,C)等四種鹼基(base)與核糖(ribose)及磷酸根(phosphate group)所形成的〝核糖核苷酸〞(ribonucleotide)的聚合體。
RNA 腺嘌呤核糖核苷酸(A, adenine ribonucleotide) 鳥糞嘌呤核糖核苷酸(G, guanine ribonucleotide) 胞嘧啶核糖核苷酸(C, cytosine ribonucleotide) 脲嘧啶核糖核苷酸(U, uracil ribonucleotide)
基因密碼對照表 胺基酸種類 基因密碼對照表 (縮寫) 相對應的基因密碼 丙胺酸 Alanine (Ala/A) GCU, GCC, GCA, GCG 白胺酸 Leucine (Leu/L) UUA, UUG, CUU, CUC, CUA, CUG 精胺酸 Arginine (Arg/R) CGU, CGC, CGA, CGG, AGA, AGG 離胺酸 Lysine (Lys/K) AAA, AAG 天門冬醯胺酸Asparagine (Asn/N) AAU, AAC 甲硫胺酸Methionine (Met/M) AUG 天門冬胺酸Aspartic acid (Asp/D) GAU, GAC 苯丙胺酸Phenylalanine(Phe/F) UUU, UUC 半胱胺酸 cysteine Cys/C UGU, UGC 脯胺酸 Proline (Pro/P) CCU, CCC, CCA, CCG 谷胺酸鹽 Glutamine (Gln/Q) CAA, CAG 絲胺酸 Serine Ser/S UCU, UCC, UCA, UCG, AGU, AGC 麩胺酸 Glutamic acid (Glu/E) GAA, GAG 蘇胺酸Threonine (Thr/T) ACU, ACC, ACA, ACG 甘胺酸 Glycine (Gly/G) GGU, GGC, GGA, GGG 色胺酸 Tryptophan (Trp/W) UGG 組織胺酸 Histidine (His/H) CAU, CAC 酪胺酸 Tyrosine (Tyr/Y) UAU, UAC 異白胺酸 Isoleucine (Ile/I) AUU, AUC, AUA 纈胺酸 Valine (Val/V) GUU, GUC, GUA, GUG 起始密碼 (START) 終止密碼 (STOP) UAG, UGA, UAA 基因密碼對照表
圖1.4 Somatostatin (體制素)形成的圖示。(圖中的號碼代表胺基酸的相對位置。) 圖1.5 Somatostatin SS-14的基因密碼與轉譯後之胺基酸序列。
1-3 重組DNA技術與蛋白質的表現(Recombinant DNA Technology and Protein Expression) 以RNA當作模版的DNA聚合酶來合成與此mRNA相對應的DNA,稱為〝complementary DNA〞(cDNA, 互補DNA)。 用限制酶與接合酶將此特定的cDNA接入〝質體〞(plasmid)中。 質體最初是在細菌中被發現的,屬於細菌染色體外的遺傳物質具有雙股螺旋的環狀結構。
圖1.6 細菌的染色體與質體。
圖1.7 細菌的質體可複製並轉移至子代細菌中。
圖1.8 載體的圖示範例(Invitrogen公司所銷售的載體)。
圖1.9 重組DNA技術的簡單圖示。
重組DNA技術Recombinant DNA Technology
圖1.10 以含有外來基因的質體表現出此基因的蛋白質產物。
1-4 重組DNA技術在商業化方面的應用 (The Applications of Recombinant DNA Technology on Product Commercialization) Genentech公司利用重組DNA技術(Recombinant DNA technology),成功研發出第一個重組人類胰島素(recombinant human insulin, rHI; 商業名稱:Humulin),在西元1982年獲得FDA核准銷售並且由Eli Lily藥廠量產。
重組DNA技術商業化的應用 研發新藥和更安全的疫苗。 治療某些遺傳性疾病、控制病毒傳染的疾病、抑制發炎。 發展生物性農藥、增加農產量並降低成本。 延緩食物腐敗的速度、降低某些食品的致敏性並且增加食物的營養成份。 研發可生物分解的塑膠(biodegradable plastic)、減少水及空氣的污染。