LD50的测定 MBL.

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LD50的测定 MBL

为节约时间,可同时做几个浓度,剂间比设为2 实验方案: 1、动物 一般为健康小鼠,体重18-22 g,雌雄各半 2、给药途径和给药容量 两种给药途径,其中一种须是临床给药途径。多含灌胃给药途径。小鼠灌胃给药容量:0.2-0.4 mL/10 g体重;腹腔注射给药容量:0.1-0.2 mL/10 g体重。 3、实验方法: 3.1 预实验 取4只小鼠,称重,按0.2-0.4 mL/10 g体重灌胃给予药液,观察动物反应。如全部死亡,将溶液稀释2-3倍后,再取4只小鼠,称重,按0.2-0.4 mL/10 g体重灌胃给予药液,观察动物反应。直到确定动物全部死亡的最小剂量及动物全部不死亡的最大剂量。 保证药物充分溶解 为节约时间,可同时做几个浓度,剂间比设为2 动物以及实验环境应与正式实验严格一致 SHUTCM _MBL

3.2 正式实验: 在预试试验所获得的0%到100%死亡率剂量的范围,按等比级数(如1:0.8),选择5个剂量组,每组取适量(大于10只,可20只)小鼠,雌雄各半。给药,观察7~14天内各组动物反应情况,记录中毒症状、外观体征和死亡只数、死亡时间等。动物死亡,应解剖检查。 附:分组与剂间比参考 剂量比值 (最高/最低) 组间剂量比值(低剂量/高剂量) 0.6 0.65 0.7 0.75 0.8 0.85 0.9 2 - 4组 5-6组 3 4-5组 5组 6-8组 4 4-5组 5 4-5 6组 10 SHUTCM _MBL

4、结果与计算 LD50=log-1[Xm-i(Σp-0.5)] LD50的95%可信限=lg-1(X50± 1.96 SX50) SX50= i× [(Σp-Σp2)/(n-1 ) ]½ 其中: Xm:最大剂量组剂量的对数值 i: 相邻两组剂量对数值之差 P:各组动物死亡率,用小数表示,如0.8 ∑P:各组动物死亡率之和 n:各组动物数 X50:LD50的对数值 注意: 本公式应用前提: 最大剂量组死亡率 >80%,最低剂量组 死亡率<20%。

实验:士的宁半数致死量测定 目的: 掌握药物半数致死量(LD50)测定的基本步骤,掌握改良寇氏法的计算方法 原理:将一定浓度和一定体积的药物,按一定剂间比灌胃给与小鼠,观察一定时间,记录不 同剂量小鼠的死亡情况,计算半数致死量,以确定药物的急性毒性。 动物:昆明种小鼠,18-22 g,雌雄各半 药物:0.0125%士的宁溶液 仪器:烧杯,量筒,注射器及针头,苦味酸溶液 方法: 1、预实验: 找出引起0%到100%死亡率剂量的所在范围。 (参考剂量:最大0.0125%,给药量0.1 mL/10 g) 2、正式实验: 在预试试验所获得的0%到100%死亡率剂量的范围,按等比级数(1:0.8),选择5个剂量组,每剂量组取适量(大于10只)小鼠,雌雄各半。腹腔注射,容量为0.1 mL/10 g,给药后观察30分钟,观察动物反应并记录各剂量组死亡只数。

4、结果与计算 LD50=log-1[Xm-i(Σp-0.5)] LD50的95%可信限=lg-1(X50± 1.96 SX50) SX50= i× [(Σp-Σp2)/(n-1 ) ]½ 其中: Xm:最大剂量组剂量的对数值 i: 相邻两组剂量对数值之差 P:各组动物死亡率,用小数表示,如0.8 ∑P:各组动物死亡率之和 n:各组动物数 X50:LD50的对数值 注意: 本公式应用前提: 最大剂量组死亡率 >80%,最低剂量组 死亡率<20%。