第一章 组织学绪论 一 、组织学的研究内容和意义 组织学: 是研究机体微细结构和 相关功能的科学。其研 究内容包括细 胞、组织 和器官系统三部分, 又称 显微解剖学。
细胞: 是人体结构和功能的最小 单位, 由细胞膜、细胞质和 细胞核构成。在电子显微 镜下还可以观察到细胞内 部更细微的结构, 即超微 结构。
在电子显微镜下细胞膜的结构表现“两暗夹一明”的单位膜结构
组织: 结构相同或相似的细胞群及 细胞外基质构成组织, 人体 的组织可分为四大类型, 即 上皮组织, 结缔组织, 肌组织 和神经组织。 器官: 不同的组织按一定的比例、 数量及方式组合成器官。 系统: 若干功能相关的器官构成系统。
二. 组织学的发展简史和 当代组织学 1. 光学显微镜(简称光镜)的发明与细胞、 组织概念的提出 裸眼分辨率: 0.2mm 2. 细胞学说的提出和组织学的建立 3. 电子显微镜(简称电镜)的发明和超微 结构的发现 电镜分辨率: 0.2nm 即 2×10-10 m 4. 当代组织学
三.组织学的学习方法 1. 对组织学内容的审视角度 2. 注意形态与功能的统一 3. 注意培养观察与空间思维 的能力
四.组织学技术简介 (一) 光学显微镜技术 1. 石蜡切片术 ①取材和固定; ②脱水和包埋; ③切片和染色; ④封片。 HE染色: 为组织学最常用的染色 法, 即苏木精-伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining), 其中,苏木精为碱性染料主要使
细胞核内的染色质及细胞质内的核糖 体染成紫蓝色;伊红为酸性染料主要 使细胞质和细胞外基质中的成分染成 红色。 嗜碱性:组织结构对于碱性染料亲和 力强的性质。嗜碱性结构可被苏木精 染成紫蓝色。 嗜酸性:组织结构对于酸性染料亲和 力强的性质。嗜酸性结构可被伊红染 成红色。
中性: 组织结构对于两种染料亲和 力都不强的性质, HE染色着 色淡。 其他切片技术: 火棉胶包埋, 冰冻 切片,涂片,铺片,磨片。 其他染色法: 硝酸银→神经细胞(黑), 醛复红→弹性纤维(紫), 甲苯胺蓝→肥大细胞(紫 红色)
(二)电子显微镜技术 1. 透射电镜术 电子密度高: 当电子束投射到密 度大吸附重金属多的结构时, 电 子被散射的多, 因此, 射落到荧 光屏上的电子少而呈暗像, 电镜 照片呈黑或深灰色, 称为电子密 度高。反之称为电子密度低。 2. 扫描电镜术
(三)组织化学术 组织化学术: 为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学原理和技术, 与组织学技术相结合而产生的技术, 能在组织切片定性、定位、定量地显示某种物质的存在与否以及分布状态。 细胞化学术:前述技术用于游离细胞样品 则称为～(cytochemistry)。
1. 一般组织化学术 基本原理是在切片上添加某种试剂, 和组织 中待测反应物发生反应, 其终产物或为有色 沉淀, 以用光镜观察, 或为重金属沉淀以用电 镜观察。 (1) 糖类:PAS反应, pariodic acid Schiff reaction (2) 脂类: 油红、尼罗蓝及苏丹类染料 (3) 核酸: 福而根反应→DNA; 甲基绿- 派若宁反映→DNA绿色,RNA红色。
(4) 酶类: 酶组织化学术。通过显示酶的 催化活性以表示酶的存在。 2. 免疫组织化学术immunohistochemistry:是根据抗原与抗体特异性结合的原理,检 测组织中肽和蛋白质的技术。肽和蛋白质均具有抗原性, 当把人或动物的某种蛋白质作为抗原注入另一种动物, 其体内则会产生针对该抗原的特异性抗体。将抗体从动物血清中提出后, 与标记物相结合, 即成为标记抗体。
用标记抗体与组织切片孵育, 抗体 则与组织中相应抗原特异性结合在 显微镜下通过观察标记物而获知肽 或蛋白质的分布部位。常用的标记 物有荧光素, 辣根过氧化物酶、胶 体金。 3. 原位杂交技术即核酸分子杂交组 织化学术。
其原理为用带有标记物的已知碱基序列的核酸探针，与细胞内待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性原位结合，即杂交。然后，通过对标记物的显示和检测而获得待测核酸的有无及相对量。常用的标记物有放射性核素（35S，32P，3H等）和地高辛。
(四) 放射自显影技术 (五) 图象分析术 (六) 细胞培养术和组织 工程