果蝇杂交实验 学 院 学 院： 动物科技学院 课程名称 课程名称： 动物遗传学实验课 主 讲 人 主 讲 人： 蓝贤勇 博士、副教授 陈 宏 博士、教授 雷初朝 博士、教授.

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1 果蝇杂交实验 学 院 学 院： 动物科技学院 课程名称 课程名称： 动物遗传学实验课 主 讲 人 主 讲 人： 蓝贤勇 博士、副教授 陈 宏 博士、教授 雷初朝 博士、教授

2 实验目的  掌握果蝇雌雄的鉴别方法及野生型和常见突 变型果蝇的形态特征  掌握果蝇实验处理及杂交技术，实验记录及 统计分析方法。  探索果蝇性状的遗传定律。

3 实验材料及用品  材料：果蝇 e # 、 12 # 、 18 # 、 22 #  用具：显微镜，麻醉瓶，培养瓶等。  药品：乙醚等。

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5 1. 生活史短， 20-25 ℃条件下完成一个世代需 12- 15 天。 2. 繁殖率高，一对果蝇可产卵 400-500 只。 3. 饲养方便。 4. 突变率高, 且为形态突变, 容易辨认。 5. 唾腺为巨大染色体 6. 染色体数目少 一 果蝇的优点：

6 果蝇属节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇 科、果蝇属。 二 果蝇的生活史

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8 23 ℃下果蝇的生活史 : 成虫 4 天 减数 12 小时 分裂 蛹 精、卵 2.5 ～ 3 天 2 天 三龄幼虫 受精卵 1 天 1 天 二龄幼虫 一龄幼虫 1天1天

9 生活史周期

10 果蝇的寄生虫 —— 螨虫

11 三 果蝇的饲养 （一）果蝇培养基成份（ 100ml ） 水 80ml 玉米粉 8.25g 糖 6.2g 琼脂 0.6g 丙酸（苯甲酸） 0.5ml （ 0.25g ） 酵母少许

12 （二）配制方法 糖琼脂糖琼脂

13 （三） 培养瓶、棉塞灭菌

14 灭菌温度 120 ℃ 灭菌时间 20 分钟

15 四 果蝇♀♂识别 ♀♂ 个体大小 腹纹 53 腹部末端尖圆 性梳无有

16 雌雄果蝇

17 雌性果蝇

18 果蝇性梳

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20 五 果蝇的麻醉 1 、麻醉剂：乙醚

21 2 、方法 2. 操作

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23 3 、死亡果蝇的标志

24 六 果蝇性状观察 3 、眼睛的颜色 2 、翅的大小 1 、身体的颜色

25 残翅野生型 棒眼 黑檀体 白眼

26 实验材料 眼色翅形体色 18 12 e 2 红白长残灰黑 性状性状 品种品种

27 实验原理  孟德尔分离规律指出不同对的基因 ( 非同源染 色体上的基因 ) 在杂种形成配子时，各对基因 是独立分配的，自由组合的，因而由两对相 对性状杂交的杂种产生四种数目相等的配子， 自交产生四种表现型个体，其比例为 9 ： 3 ： 3 ： 1

28 实验原理  果蝇的长翅和残翅是一对相对性状，由 位与第二染色体上的基因 +/vg 所决定， 灰体和黑体是另一对相对性状，由位于 第三染色体上的基因 +/e 所决定。

29 实验原理 P1 长翅黑体 × 残翅灰体 （ ++ee ） （ vgvg++ ） F1 长翅灰体 （ +vg+e ） F2 9 长灰： 3 长黑： 3 残灰： 1 残黑 9+ ＿ + ＿ ： 3 + ＿ ee ： 3 vgvg + ＿ ： 1 vgvgee

30 实验方法  收集处女蝇：由于雌蝇生殖器官中有贮精囊，一次交配可保留大 量精子，供多次排卵受精用，因此做杂交实验前必须收集未交配 过的处女蝇。由于孵化出的幼蝇在 12 小时内（更可靠是 8 小时） 不交配，因此必须在这段时间内把雌、雄蝇分开培养，所得的雌 蝇即为处女蝇。  准备好培养基，按正、反交组合，把已麻醉的 e # ♀ 、 12 # ♂ 和 e # ♂ 、 12 # ♀ 分别放入不同管内进行杂交，贴上标签。  6 — 7 天后，见到有 F1 幼虫出现，即除去亲本果蝇（一定要除干 净）。  再过 7 天，观察 F1 成蝇的性状。  如果 F1 果蝇性状整齐一致，挑 3 — 5 对 F1 果蝇换入新的培养基继续 饲养（此处无需处女蝇，为什么？）。  6 — 7 天后除干净 F1 代亲本果蝇。  再过 7 天， F2 代成蝇出现，麻醉后倒在白瓷板上观察, 并进行统计 分析。

31 实验结果统计 统计 F 2 各种表型，进行 X 2 测定，得出果 蝇性状的遗传规律，并进行实验讨论。