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实 验 六 （原虫 2 、昆虫） 疟原虫、 弓形虫、 阴道毛滴虫、节肢动物
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掌握： 各种常见原虫各期形态； 各种常见原虫实验诊断方法； 蠕形螨、疥螨成虫形态 熟悉： 常见原虫和昆虫的病原学诊断方法； 了解： 不同昆虫的疾病传播。 实验目的和要求
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示教标本： 大体标本： 蚊蝇口器，按蚊、库蚊、伊蚊成虫针插标本 镜下标本： 疟原虫（ Pv 、 Pf ）红内期各期形态（薄血膜片、吉氏染色）； 刚地弓形虫（改良抗酸染色）；阴道滴虫滋养体（吉氏染色）；蠕形螨，疥 螨； 观察标本： 间日疟原虫、恶性疟原虫红内期；；弓形虫滋养体； 阴道滴虫滋养体。 技术操作： 鼠疟薄血片瑞士染色；透明胶纸法自查皮肤蠕形螨。 弓形虫感染动物腹腔液图片 电教： 《疟原虫》 、《蠕形螨》 作业： 1 、绘制间日疟原虫各期形态；阴道毛滴虫滋养体；弓形虫滋养体。 2 、疟原虫检查方法，记录蠕形螨检查结果 实验内容
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疟原虫 Plasmodium
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三期六种形态 1 、滋养体期：早期、晚期滋养体 2 、裂殖体期：未成熟、成熟裂殖体 3 、配子体期：雌、雄配子体 （一）间日疟原虫在 RBC 内的形 态 一、形态
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1 、滋养体期
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胞质较少呈环状，约为红细胞直径的 1/3 ，中间为大空泡 核小， 1 个，位于虫体一侧，颇似戒指的红宝石。 一个红细胞内多只含一个原虫 （ 1 ）早期滋养体 -- 环状体
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经 8 ～ 10 小时，虫体增大，伸出伪足，胞质增多，出现疟 色素（ malarial pigment ） 红细胞胀大，颜色变淡，并出现能染成淡红色的小点， 称薛氏小点（ Schüffner's dots) 。 （ 2 ）晚期滋养体 - 大滋养体
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2 、裂殖体期
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分裂成 2-12 个细胞 核。 受染 RBC 变大、颜 色苍白、形态不规则， 有薛氏小点。 （ 1 ）未成熟裂殖体
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裂殖子 12 ～ 24 个，平均 16 个，排列不规则 虫体占满胀大了的红细胞 疟色素集中成堆 疟色素疟色素 （ 2 ）成熟裂殖体
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虫体较大，占满胀大的红细胞，大配子体 胞质致密，色深蓝 核小致密，深红色，多位于虫体一侧 疟色素分散 3 、配子体 （ 1 ） 间日疟原虫雌配子体
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虫体较小，小配子体 胞质浅蓝，核大疏松，淡红 色，多位于虫体的中央。 核 （ 2 ）间日疟原虫雄配子体
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环纤细, 约为 RBC 直径的 1/5 核 1 个，但 2 个常见 红细胞常含 2 个以上原虫 虫体常位于红细胞的边缘 ，呈 “ 鸟飞状 ” （二）恶性疟原虫在外周血 RBC 中的形 态 1 、小滋养体（环状体）
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2 、配子体 （ 1 ）恶性疟原虫雌配子体 新月形，两端较尖 核致密，深红色，常 位于中央 疟色素黑褐色，分布 于核周围
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腊肠形，两端钝圆 胞质色蓝而略带红 核疏松，淡红色，位于中 央 疟色素黄棕色，小杆状， 在核周围较多 （ 2 ）恶性疟原虫雄配子体
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（三）二种疟原虫血图片中形态的比较 1 、环状体： 恶性疟原虫 环较小，核 1 ～ 2 个， RBC 含 2 个以上虫体 间日疟原虫 环较大，核 1 个 RBC 含 1 个虫体
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间日疟原虫 恶性疟原虫 虫体圆形或卵圆形 虫体新月形 2 、雌配子体：
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间日疟原虫 恶性疟原虫 虫体圆形 虫体腊肠形 2 、雄配子体：
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1 、病原检查 取外周血制成厚、薄血膜，经姬氏或瑞氏染色后检查。 采血时间： 恶性疟：发作开始时查环状体，发作数小时后因晚期滋 养体寄生的红细胞滞留皮下脂肪及内脏微血管中，不易查 见。 间日疟和三日疟：发作后 10 小时内，太久后原虫数量要 下降。 二、实验诊断
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（ 1 ）查抗原 可诊断现症病人和带虫者。血中有疟原虫时才能 查出其抗原，一旦治愈，抗原在短期内即行消失。 （ 2 ）查抗体 适用于多次寒热发作又未查明原因者。原虫血症 后 1 周可查出抗体，故早期无诊断价值。 2 、免疫诊断
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简称弓形虫，该虫呈世界性分布， 寄生在人和多种动物的有核细胞内， 引起人兽共患病，尤其在宿主免疫 功能低下时，可造成严重后果，属 于机会性致病原虫。 刚地弓形虫
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弓形虫发育的全过程，可有 5 种不同形态的 阶段： 1 、滋养体 4 、裂殖体 2 、包囊、假包囊 5 、配子体 3 、卵囊（囊合子） 一、形态
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分为速殖子和缓殖子。 二者形态相似，呈新月 形或香蕉形，一端较尖， 一端钝圆。长 4-7um ， 宽 2-4um ，姬氏染色后 胞质呈蓝色，胞核呈紫 红色，核位于虫体中央。 1 、滋养体：
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速殖子见于急性 弓形虫病时期，可散 在腹腔液、血液、胸 腔渗出液等体液中， 也可在宿主细胞内形 成数个至十余个速殖 子的集合体。 2 、假包囊：
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呈圆形或椭圆形， 直径为 5-100um ， 具有一层富有弹 性囊壁。囊内有 数个至数千个缓 殖子。 脑组织内弓形虫包囊 3 、包囊：
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弓形虫卵囊 圆形或椭圆形，大 小为 10 um 左右， 具有两层光滑透明 的囊壁，成熟卵囊 内含两个孢子囊， 分别含有 4 个新月 形的子孢子。 4 、卵囊：
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1 、询问病史及临床表现 2 、病原学检查 3 、免疫学检查 4 、其它 PCR 法、 DNA 探针技术等。 二、诊断
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（ 1 ）涂片染色法： 急性期患者的腹水、胸水、羊水、脑脊液或 血液，或骨髓穿刺涂片，镜检滋养体。 （ 2 ）动物接种分离法： 标本接种于小白鼠腹腔， 1 w 后查腹腔液；阴 性者盲传至少 3 代。 （ 3 ）细胞培养分离法： 标本接种于培养的细胞株，以姬氏染色法或 荧光抗体法检查 1 、病原检查
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因病原学检查困难且阳性率低，血清学试验是 广泛采用的重要诊断依据。 染色试验 (DT) ：活体速殖子美蓝染色， 60% 虫 体不被染色者为阳性； 间接血凝试验 (IHA) ； 间接荧光抗体试验 (IFAT); 其它：酶联免疫吸附试验 (ELISA) 等。 2 、免疫学检查
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阴道滴虫 该虫是一种常见的泌尿生殖道寄生虫， 主要寄生于女性阴道和尿道，以及男性 尿道和前列腺内，引起滴虫性阴道炎， 尿道炎或前列腺炎，是以性传播为主的 传染病。
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阴道毛滴虫的生活史仅 有滋养体时期。 活体无色透明，有折光 性，借其前鞭毛和体侧 的波动膜作螺旋状运动， 体态多变。 固定后呈梨形或椭圆形， 经铁苏木素或姬氏染色， 可见前 1/3 处有一长椭圆 形泡状核。 一、形态
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核的上缘有 5 颗排列成环的 毛基体，由此发出 5 根鞭毛， 其中 4 根为游离的前鞭毛， 1 根为向后伸展与虫体波动膜 外缘相连的后鞭毛。 波动膜是细胞质延伸形成的 极薄的膜状物，位于虫体一 侧前半部。 轴柱透明，纵贯虫体，从后 端伸出。
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1 、病原学检查：以阴道分泌物、尿沉 淀物或前列腺液直接涂片或涂片染色 查见滋养体为确诊依据。 2 、免疫学诊断。 二、实验诊断
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疥 螨 疥螨寄生于人和哺乳动物表皮的 角质层内的一种专性寄生螨虫，是 引起疥疮的病原体。
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疥螨微小，虫体略呈圆形或椭圆 形，背面隆起，为乳白或浅黄色。
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镜下疥螨
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虫体寄生在宿主表皮角质层内，摄食角 质组织和淋巴液，并以其螯肢和足跗节末 端的爪挖掘一条与体表平行的纡曲隧道。
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蠕形螨 蠕形螨俗称毛囊虫，是一种小型永久 性寄生螨，主要寄生于人和哺乳动物的 毛囊和皮脂腺，可引起皮炎、睑缘炎等。 寄生人体的蠕形螨有两种，即毛囊蠕 形螨和皮脂蠕形螨。
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一、形态 虫体狭长，呈蠕虫状，乳白色，半透 明。虫体分为颚体、足体和末体三部 分。颚体宽短，呈梯形，口器刺吸式， 足 4 对，粗短，套筒状。 毛囊蠕形螨的末体较狭长，末端钝圆； 皮脂蠕形螨的末体粗短，末端呈锥状， 较尖。
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足体 末体 足体 毛囊蠕形螨 皮脂蠕形螨 末体
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从毛囊或皮脂腺分泌物中检出蠕形 螨病原体即可确诊。检查蠕形螨的 方法主要有两种： 1 、挤压涂片法 2 、透明胶纸法 二、实验诊断
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作 业 绘图： 间日疟、恶性疟各期形态； 阴道滴虫滋养体； 弓形虫滋养体； 记录螨检结果。 思考题：疟原虫检查方法
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