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血小板检查 检验系临检教研室 陈丽华
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目的要求 掌握：血小板计数的原理、、方法、质量 控制、参考值、方法学平价及临床意义。 重点 : 血小板计数 难点 : 血小板形态
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一、概述
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（一）血小板的生成 造血多能干细胞 TPO 调控 分化 原巨核细胞 促进巨核细胞祖细胞增 殖、分化、成熟与释放 plt 进入血液 Plt 2/3 在循环血，其余贮存于脾。
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（二）血小板的破坏 血小板的平均寿命为 7~14 天，具有止血功 能仅开始 2 天。衰老的血小板在单核巨噬细 胞破坏，主要在脾破坏。 脾池化：全身约有 1/3 的血小板滞留于脾窦 和脾髓的细胞间，血小板在脾内的这种滞 留现象即 “ 脾池化 ” ，脾池中的血小板和循环 池中的血小板可以互换。
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（三）血小板检测常用项目 1 、血小板计数 （ PLT ） : 手工单项或血液 分析仪多项检测 2 、血小板平均体积（ MPV ） 3 、血小板分布宽度 (PDW) 4 、血小板比积 (PCT) 血液分析仪测
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二、血小板计数 （手工法）
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（一）原理 将血液稀释一定倍数，充入计数池内计数， 计算出每一升血中血小板数。稀释液破坏 RBC, 固定 Pt 并防止聚集。
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（二）器材 光学显微镜；血球计数板、 Hb 吸管、试管、采血针 等。 （三）试剂：下列试剂任选一种 1. 草酸铵稀释液：草酸铵 1.0g,EDTA-Na 2 0.012g ，蒸 馏水加至 100mL. 首选试剂。 2. 许汝和稀释液（复方尿素稀释液）：尿素 10g ，枸 橼酸钠 0.5g ， 40% 甲醛 0.1mL 蒸馏水加至 100mL 。 过滤冰箱保存。
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（四）操作 1. 在小试管中加入 plt 稀释液 0.38mL 。 2. 取末梢血 20μL 加入试管中，迅速摇匀。 室温放置 >10 分钟。 3. 充池，静置 10~15 分钟。 4. 高倍镜下计数中央大方格中四角及正中共 5 个中方格内的 plt 数。
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（五）计算 血小板数 /L=5 个中方格内血小板数（ N ） ×5×10×20×10 6 /L =5 个中方格内血小板总数 ×10 9 /L （六）结果报告 PLT: △△△ ×10 9 /L
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（七）注意事项 1. 全部用具和稀释液要特别清洁，防尘、防 菌，以免计数时误认。 2. 针刺要深，吸血及稀释动作要快，防聚集。 3. 同时做多项检查时，优先采 plt 计数之血。 4. 充池前应充分摇匀，充池后需静置 10 分钟 以上待 plt 全部下沉后再计数。 1h 内完成。
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（八）方法学平价 1. 草酸铵法对 RBC 破坏力强，使视野清晰， plt 形态清楚，是全国临床检验操作规程推 荐方法。由于 Plt 体积小，易粘附、聚集及 破坏等，结果不甚理想。 2. 复方尿素法优点是 plt 胀大易辨认，但不能 完全溶解 RBC ，且尿素易分解，试剂保存 时间短。
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3. 血液分析仪法可同时测 MPV 、 PDW 等多 个指标，快速，临床适用。但不能鉴别红 细胞碎片、灰尘等与 plt 大小相似之物，故 计数误差大。当直方图出现变化时，应用 显微镜计数法校准之。
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4. 流式细胞仪法：用血小板单克隆抗体染色 标记血小板，根据荧光强度和散射光强度， 用独立的流式细胞仪检测可得到准确性极 高的血小板数。流式细胞仪法式目前血小 板计数参考方法。
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5. 相差显微镜法：相差显微镜下，血小板立 体感增强，有助于识别血小板，还可照相 后核对计数结果，作为手工法血小板计数 的参考方法。 （九）参考值：（ 100~300 ） ×10 9 /L
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（十）质量保证 原则是：避免血小板被激活、破坏，避免 杂物污染。 1. 检测前：采血要顺畅，抗凝剂选用合适， 储存时间适当； 2. 检测中：手工法计数要定期检查稀释液质 量，仪器法要质控合格；
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3. 检测后： （ 1 ）用同一份标本制备学血涂片染色精简 观察血小板数量、大小、分布情况，并注 意有无异常增多的红、白细胞碎片。 （ 2 ）用参考方法核对。 （ 3 ）同一份标本 2 次计数误差要 <10% 。
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（十一）临床意义 生理变化： ①新生儿 < 婴儿，出生后 3 个月达成人水平。 ②晨间 < 午后，春季 < 冬季，毛细血管 < 静脉 ③运动、饱餐后上升，休息后恢复。 ④月经期低，经期后上升。 ⑤妊娠中晚期 ，分娩后 1~2 天
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病理变化 1.plt 减少： ①生成障碍：急性白血病，再障，巨幼贫等 ②破坏过多： ITP 、脾亢、 SLE 等； ③消耗过多： DIC 、血栓性血小板减少性紫癜 ④分布异常：脾肿大、血液被稀释等； ⑤先天性：新生儿 plt 减少症、巨大 plt 综合征
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2.plt 增多： ①原发性：慢粒、原发性 plt 增多症、真性红 细胞增多症等； ②反应性：急性化脓性感染、大出血、急性 溶血、肿瘤等； ③其他：外科手术后、脾切除等。
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三、 plt 平均体积（ MPV ）的 临床意义
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MPV 参考值： 6.8~13.6fL 分析 MPV 临床意义需结合 plt 数量变化。 1. 鉴别 plt 减少症的原因 ① plt ，而 MPV ，骨髓自身正常，外周血 plt 破坏 。 ② plt ，而 MPV, 骨髓抑制损伤而造成 plt
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2. 血小板增高性疾病 ① plt ，而 MPV : 脾切除，慢粒等； ② plt ，而 MPV ：严重感染。 3. 血栓前状态或血栓性疾病时 MPV 常增高
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4. MPV↑ 可作为判断骨髓功能恢复的较早指 标： ①骨髓功能衰退时， MPV 、 PLT 同时 ，抑 制越重， MPV 越 。 ②当骨髓功能恢复时， MPV 先于 PLT ，是 功能恢复的第一指标。
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5. 作为出血程度的监护指标 : 有出血倾向者 MPV 显著低于无出血倾向者， 即使严重的 PLT 者，如 MPV>6.4fL ，出血 发生率也低。
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四、血小板分布宽度 (PDW) 和血小板比积 (PCT ）
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1 PDW ：是血液分析仪对血小板分布情况 进行数据处理得到的血小板体积的变异系 数。 2 PCT ：是血小板计数值和 MPV 经过计算 得到的，其值的大小与 PLT 和 MPV 值有关。 PCT = PLT×MPV
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3 、参考值： PDW ： 15.5% ～ 18.1% PCT: 成人： 0.108% ～ 0.282% 1 ～ 15 岁儿 童： 0.221% ～ 0.406% 4 、临床意义： 暂未用于临床，须与其他参数联合应用
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五、血小板形态检查
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形态检查内容 ①血小板大小：有无巨大血小板或小型血 小板； ②形态：胞质的颜色，颗粒有无、分布、 粗细，空泡； ③ PLT 分布。
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( 一 ) 正常形态 1.5~3μm ，呈圆形、椭 圆形、逗点形或不规则 形；胞质呈淡蓝或粉红， 中心有若干细小紫红色 颗粒，无细胞核，血片 上 3~5 成群。
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血小板 （血涂片）
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( 二 ) 异常形态 1 、大小异常 （ 1 ）大血小板：直径 4~7μm ，巨型血小板直 径 >7.5μm 。见于 ITP 、巨大血小板综合征、 脾切除等。 （ 2 ）小血小板：直径 <1.5μm ，主要见于缺铁 贫、再障等。
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巨大血小板
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2. 形态异常 （ 1 ）幼稚形：颗粒少。 （ 2 ）老年形 : 边缘不规则，颗粒粗，呈离心 分布，有空泡。 （ 3 ）病理幼稚形：体积大，胞质淡蓝，几 乎无颗粒。
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（ 4 ）病理刺激形：体积增大，形态不一， 胞质呈淡蓝 / 紫红，颗粒多而大小一致。 （ 5 ）退化形：大小、形态不一，有大空泡， 无颗粒或颗粒聚集。 正常人异常 plt 10% 才有意 义。
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（ 6 ）血小板卫星现象：血小板粘附、围绕 于中性粒细胞（或偶尔粘附于单核细胞） 的现象。偶见于 EDTA 抗凝血血涂片中，导 致血液分析仪 PLT 减少。 （ 7 ）血小板 “ 粘附 ” 红细胞：
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3. 分布异常 （ 1 ） plt 单个散在，不聚集：见于血小板无 力症、再障、 ITP 等。 （ 2 ） plt 过度聚集：见于原发性 plt 增多症， 骨髓纤维化等。
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