一、研究背景 植物组培育细胞培养源于 19 世纪后半 叶，当时植物细胞全能性的概念还没有 完全确定。人们便对此进行研究。 目前，植物组培已经变成了一种常规 的技术，广泛应用于植物的脱毒，快繁 ，基因工程，一串研究，次生代谢物质 生产，工厂化育苗等多方面。

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2 一、研究背景 植物组培育细胞培养源于 19 世纪后半 叶，当时植物细胞全能性的概念还没有 完全确定。人们便对此进行研究。 目前，植物组培已经变成了一种常规 的技术，广泛应用于植物的脱毒，快繁 ，基因工程，一串研究，次生代谢物质 生产，工厂化育苗等多方面。

3 二、研究目的意义 【目的】 针对我校校园绿化状况，利用组培技术和现代园林绿化 理论，研究植物的快速发展，繁殖，以及在校园，教室和 办公室等的布置，美化校园环境，促进师生身心健康。 【研究意义】 快速繁殖某些稀有或经济价值较大的植物，在短时间内 培养出应有价值的植物； 为植物中带有的名都脱毒，防止其影响植物产量与品质 以及对农业带来的灾害； 用于植物种质资源的保存，挽救濒临灭绝的植物； 通过研究，掌握技术流程，对校园的植物进行组织培养 。

4 三、研究过程 首先，确定研究内容，了解植物组培 有关方面的资料，如： 1. 植物繁殖的能力； 2. 组培的培养基成分配制以及起作用； 3. 组培的技术流程； 4. 组织培养技术能够运用的方面； 5. 走访校园里的养殖园区，认识植物。

5 之后，明确研究方案： 1. 制定培养方案 2. 外植体的选择与处理 3. 接种 4. 初代培养（形成愈伤组织） 5. 继代培养（为了增加量，将愈伤组织切割后再行的培养基中增 殖） 6. 壮苗与生根培养（经过胚状体途径发育的苗数特别多，且个体 弱小，需一个低浓度会无激素培养基培养阶段，以便壮苗生根） 7. 试管苗的驯化移栽。 其次，进入动手实际操作环节，并做具体问题具体分析。

6 四、数据分析和结论 【组培实际操作步骤】 1. 将锥形瓶中接入无菌水，放入灭菌锅中灭 菌。将培养基按比例冲泡开，封口，放入灭 菌锅灭菌。灭菌后，取出，将灭好菌的培养 基溶液倒入灭菌后的锥形瓶中，等待其冷却 。 2. 将胡萝卜用水洗净，切割生殖能力最强的 一部分（为里心与外圈中间的白圈）至 5mm 左右的小块，并用无菌水洗净；

7 四、数据分析和结论 3. 用酒精将切割好的萝卜小块在培养皿中浸泡 30-40s （以保证杀尽表面细菌，又不至于破坏 植物的自身繁殖组织），取出，用无菌水清洗 3-4 次； 4. 将经过处理的胡萝卜小块，用长镊子夹进培 养基，使其大半部分在培养基中。封口。放入 培养箱培养。 （注：整个过程都要在酒精灯附近进行，严禁用手触动材料，以免细 菌的侵入，长镊子等工具均要在酒精灯上炙烤片刻，待冷却后方可接 触所接种的植物。）

8 【结论】 在整个组培的过程中，最重要的一个环节便是 “ 灭 菌 ” 凡是暴露在空气中的物体，接触自然水源的物体， 至少它的表面都是有菌的。依此观点，无菌室等未处 理的地方、超净台的表面、简单煮沸的培养基、我们 使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及 与外界相连的内表，如整个消化道、呼吸道，即我们 呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌 的。

9 植物组织培养对无菌条件的要求是非常严格的， 甚至超过微生物的培养要求，这是因为培养基含有丰 富的营养，稍不小心就引起杂菌污染。 物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或 高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、 过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使 用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白 粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方 法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选 用。

10 在培养出的各个 “ 植物 ” 中，不乏有各种各样的细菌的 身影，它们都会影响植物的组织培养，可见，灭菌是至 关重要的！可以通过以下几个方面，注意，并重视，严 格按照要求进行操作： 1. 在接种前 20 分钟，打开超净工作台的风机以及台上的 紫外线灯； 2. 接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换 穿拖鞋等； 3. 上工作台后，用酒精棉球搽拭双手，特别是指甲处。 然后搽拭工作台面；

11 4. 先用酒精棉球搽拭接种工具，再将镊子和 剪刀从头至尾过火一遍，然后反复过火尖端 处，对培养皿要过火烤干； 5. 接种时，接种员双手不能离开工作台，不 能说话、走动和咳嗽等； 6. 接种完毕后要清理干净工作台，可用紫外 线灯灭菌 30 分钟，若连续接种，每 5 天要大 强度灭菌一次。

12 【组培现状】 近年来，组织培养作为一种研究技术，已广泛地应用于 许多学科中，它不仅对理论研究有重要意义，并已展现了 十分广阔的应用前景。运用组织培养法繁殖植物，这是组 织培养应用于生产的主要的和成效最大的实例。 随着环境的不断变化，许多种类的植物面临灭绝，而且 许多植物已经灭绝，留给人类的只能是遗憾。实践证明， 通过组织培养的方法可以挽救这些植物，还有许许多多的 动物，使部分濒危植物种类得到延续和保存；如果再结合 超低温保存技术，就可以使这些植物得到较为永久性的保 存。其实对多数普通植物来说，用组培方法保存其种质材 料，也具有十分重要的意义。

13 五、研究成果 在这次的组培实验中，因为时间与技术的问 题，所得到的结果并不尽如人意，为此，我们也做 了深刻的反思。 在观看我们所做的实验成品时，锥形瓶中各 式各样的霉菌比比皆是，其原因，有一大部分可能 是由于我们在操作前，没能将超净工作台消毒的特 别彻底。而操作时，没有用酒精将双手消毒，导致 手上的细菌附着在所要接种的材料之上。或是在有 些时候，为了图方便，直接用手触摸材料，导致材 料被严重污染。

14 从凝固的未被 接种的培养基中毫 无细菌滋生来看， 在凝固培养基之前 的步骤，除菌的工 作还是做得相当到 位！

15 观察同组同学接 种出的作品（右 图），不难发现， 该作品的灭菌工作 进行的很好，基本 无霉菌的滋生，可 见，该同学在接种 环节，严格按照要 求与规格进行操作， 将手、材料进行彻 底的灭菌消毒。

16 像这样的作品， 在整个小组内可谓 是比比皆是，习以 为常，更有能够称 之为 “ 霉菌样本 ” 的 作品出现。

17 其中，我们总结了原因：消毒的力度仍然不够， 有些环节并没有像规定的那样操作，譬如没有将手用 酒精棉消毒，或是长镊子没有在火焰上炙烤，在接种 时，没有先将锥形瓶的瓶口沿着酒精灯火焰加热除菌、 灭菌等。 经过这次的实验，我们总结到了很多很好的经 验，同时也汲取到了很多很有意义的教训，不论好坏 与否，我们都是有所收获，有所作为的，相信如果有 机会，在下一次的实验中，我们一定会培养出健康、 完整的植物！

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