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1 华中科技大学同济医学院

2 母儿血浆NO、ET、NO/ET及胎盘NO、cGMP的变化 在妊高征分类中的意义
硕士研究生 导 师

3 前 言 妊娠高血压综合征是产科最常见最严重的妊娠并发症之一，直接威胁母儿安全 据统计，发病率高达7-10%，致死率占第二位
前 言 妊娠高血压综合征是产科最常见最严重的妊娠并发症之一，直接威胁母儿安全 据统计，发病率高达7-10%，致死率占第二位 其病因至今仍不清楚，近年来国内外对其发病机制，临床表现及妊娠结局作了大量研究，并逐渐完善其分类标准

4 国际妊娠高血压疾病分类标准 我国妊高征分类标准
(Hypertensive disorder complicating pregnency, HDCP) 我国妊高征分类标准 (pregnancy-induced hypertension syndrome, PIH)

5 HDCP分类：妊娠期高血压、先兆子痫（包括轻度、重度）、子痫、妊娠合并
慢性高血压、慢性高血压合并先兆子痫 PIH分类： 轻度妊高征、中度妊高征、 重度妊高征、未分类

6 目 的 通过研究妊高征患者母儿血浆NO、ET及NO/ET比值的变化和胎盘NO、cGMP变化，探讨NO/ET比值在妊高征分类中的意义，并比较两种分类的合理性

7 材料与方法

8 研究对象 实验组： 50例妊高征患者（按两种方法分类：分类1为我国分类法，分类2为国际分类法） 对照组： 30例正常晚孕妇女
两组孕妇既往均无其他妊娠并发症和合并症，均为单胎初产未临产且均以剖宫产手术结束分娩

9 主要试剂及设备 NO 测试盒购自南京建成生物工程研究所 721型分光光度计为上海分析仪器厂生产 ET测试盒购自北京北方生物技术研究所
     主要试剂及设备 NO 测试盒购自南京建成生物工程研究所 721型分光光度计为上海分析仪器厂生产 ET测试盒购自北京北方生物技术研究所 SN-69513型智能防免r测量仪由上海原子核研究所日还仪器所一厂生产 cGMP试剂盒购自上海中医学院同位素室 电动匀浆机为上海可乐仪器厂生产

10 标本制备 孕妇急诊入院时（未用药前)或麻醉前抽取肘静脉血5ml 剖宫产新生儿娩出后立即取脐静脉血5ml

11 两者处理方法相同：3ml放于干净干燥试管中，室温下凝固后，2000r/min离心15分钟，取血清置-70℃冻存待测NO值；剩余2ml注入含10%EDTA二钠30ul和抑肽酶20 ul的抗凝试管中，混均后在4℃下离心10分钟，分离血浆后置-70℃冻存待测ET值

12 胎盘娩出后，即刻取胎盘中央带母面外观正常处组织两块，分别为1cm×1cm×1cm 大小，再制备胎盘绒毛组织匀浆待测NO及cGMP，置于-70℃冰箱中保存待用。

13 实验方法 均严格按照试剂说明书步骤操作 NO的测定：采用硝酸还原酶法（NO2－/NO3－） ET、cGMP的测定：采用放射免疫分析法

14 统计学分析 本研究中所有数据用均数±标准差(x±s)表示，统计学处理应用SPSS for Windows10.0软件包进行
统计分析方法包括方差分析，t检验，及直线相关分析。P<0.05视为两组差异具有统计学显著性

15 结 果

16 两组母血、脐血NO、ET、NO/ET水平比较
组别 例数 NO(umol/L) ET(ng/L) NO/ET 母血 脐血 母血 脐血 母血 脐血 对照组 30 实验组 50 P 40.21± ± ± ± ± ±0.18 35.21± ± ± ± ± ±0.18 < < < < < <0.01 < < （实验组）<0.05

17 分类1母血、脐血NO、ET、NO/ET水平比较
组别 例数 母 血 NO(umol/L) ET(ng/L) NO/ET 脐 血 ①轻度组 15 ②中度组 15 ③重度组 20 P ①②③ P ①与②/③ P ②/③ 38.92± ± ±0.13 34.96± ± ±0.15 33.52± ± ±0.15 > >0.05 <0.01 >0.05 33.25± ± ±0.12 29.26± ± ±0.17 28.36± ± ±0.15 > >0.05

18 分类2母血NO、ET、NO/ET水平比较 组别 例数 母 血 NO(umol/L) ET(ng/L) NO/ET 脐 血
组别 例数 母 血 NO(umol/L) ET(ng/L) NO/ET 脐 血 ①妊娠高血压组 13 ②先兆子痫轻度 14 ③先兆子痫重度 21 ④子痫组 P ① ② ③④ P ①/④与②③ P ②/③ P ① ④ 39.22± ± ±0.12 35.25± ± ±0.17 33.22± ± ±0.17 32.81± ± ±0.12 > >0.05 <0.05 >0.05 <0.01 32.74± ± ±0.11 28.64± ± ±0.15 27.95± ± ± ± ± ±0.17 > >0.05

19 两组NO、ET在母血与脐血中含量的相关性分析
组别 例数 r p r p 对照组 < <0.01 实验组 < <0.01

20 两组母血与脐血中NO与ET 含量相关性分析
母血NO与ET 脐血NO与ET 组别 例数 r p r p 对照组 < <0.01 实验组 > >0.05

21 两组胎盘绒毛组织匀浆NO、cGMP水平比较
组别 例数 NO(umol/g) cGMP(nmol/g) 对照组 ± ±0.69 实验组 ± ±0.69 P < <0.01

22 分类1胎盘绒毛组织匀浆NO、cGMP水平比较
①轻度组 ± ±0.50 ②中度组 ± ±0.47 ③重度组 ± ±0.61 P ①与③ < <0.01 P ①与② < <0.05 P ②与③ > >0.05 组别 例数 NO(umol/g) cGMP(nmol/g)

23 分类2胎盘绒毛组织匀浆NO、cGMP水平比较
组别 例数 NO(umol/g) cGMP(nmol/g) ①妊娠高血压组 ± ±0.52 ②子痫前期轻度组 ± ±0.42 ③子痫前期重度组 ± ±0.58 ④子痫组 ± ±0.45 P ①与④ < <0.01 P ①/④与②/③ < <0.05 P ②与③ > >0.05

24 两组胎盘绒毛组织匀浆NO、cGMP含量相关性分析
组别 例数 r p 对照组 <0.01 实验组 <0.01

25 两组中胎盘NO、脐血母血NO/ET含量相关性分析
胎盘NO与脐血NO/ET 胎盘NO与母血NO/ET组别 例数 r p r p 对照组 < <0.01 实验组 < <0.01

26 散点图 r＝0.480，P<0.05 r＝-0.679，P<0.01

27 散点图 r＝-0.514，P<0.01 r＝0.751，P<0.01

28 讨 论

29 血管活性物质NO、ET在生理妊娠中的作用
NO和ET是一对作用相拮抗的血管活性物质，NO是目前所知的体内最强的血管舒张物质，ET是已知的体内最强的缩血管物质之一 生理妊娠期间，NO和ET相互影响、相互制约，共同参与孕妇血流动力学变化的调节

30 妊高征患者血浆母儿NO、ET、NO/ET比值的变化胎盘NO、cGMP的变化在妊高征分类诊断中的意义
NO的多种生物效应是通过cGMP介导的，cGMP是NO发挥作用的第二信使，组织cGMP水平可作为反映组织NO浓度的一个指标 前面结果已经证实，胎盘NO与cGMP间变化有一致性

31 实验组患者母血NO、ET、NO/ET的变化均与脐血中相应的指标变化有一致性，NO/ET比值与胎盘NO、cGMP水平变化有一致性，与新生儿出生体重呈正相关

32 分类1中：NO/ET及胎盘NO各组值比较结果均显示：中重度妊高征与轻度妊高征、对照组比较有显著性差异，中重度妊高征之间比较无显著性差异。
分类2中显示：子痫与子痫前期比较有显著性差异，子痫前期轻重度间无显著性差异。 分类2较分类1更合理，更符合疾病的发展过程

33 小 结 母血NO/ET比值可全面准确反应妊高征病情程度，反应母儿状况，可作为妊高征分类诊断的敏感实验室指标
小 结 母血NO/ET比值可全面准确反应妊高征病情程度，反应母儿状况，可作为妊高征分类诊断的敏感实验室指标 在妊高征分类诊断中，加入母血NO/ET指标有一定价值 国际分类更科学、更合理

34 待续问题 目前有关NO与妊高征关系的研究结果不一，相互矛盾，主要存在两种观点： 1. NO水平降低，认为是妊高征的病因
本文例数尚少，需临床大量研究后才能确定NO/ET标准诊断值

35 谢谢 感谢我的导师邹丽教授 感谢协和医院妇产科全体老师 感谢我的师兄、师姐妹及朋友们 感谢答辩主席、答辩委员 感谢大家