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高效液相色谱法测定维生素E
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一、 实验目的 1、 理解高效液相色谱法的基本结构及利用其进行物质定量定性分析的基本原理 2、熟悉液相色谱仪的操作
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二、 实验原理 被测样品与溶剂混合后在高压泵的作用下通过毛细管进入色谱柱，样品在色谱柱中作定向迁移运动并和工作物质发生互相作用，使多组份的样品逐渐分离为单个组份，再进入检测，通过对比与分析即可定性定量地鉴定样品的各个未知组份。
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三、 仪器、试剂、样品 1、主要仪器：安捷伦1100高效液相色谱仪，电子天平（0.0001g）,过滤器，0.22um滤膜
2、维生素E标准样品，色谱纯丙酮，色谱纯甲醇
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四、 实验方法 1.标准溶液的配制 精密称取维生素E工作对照品适量(约10mg)，置50ml量瓶中，加丙酮溶解并稀释至刻度，摇匀。
2 最大吸收波长的确定 取标准品溶液、供试样品溶液在波长200～600nm范围内测定吸光度(即进行全波长扫描)，在295nm处有最大吸收。故选择295nm为测定波长。
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3. 精密量取1、2、4、5ml分别置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。色谱条件为： (1)流动相:甲醇(经0.45μm滤膜过滤)
(2)流速: 1.0ml/min (3)检测波长:λ=295nm 依次精密量取10μl注入液相色谱仪.得线性回归方程:y=192.63x ，相关系数r=0.9995。
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5 VE注射液中含量测定 精密量取本品0.1ml，置250ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取1ml、置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图按外标法以峰面积计算，即得。该药品VC含量为85.94%，RSD为1.2%。
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