欢迎各位老师指导！ 授课:卜驭 2014.12.2.

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1 欢迎各位老师指导！ 授课:卜驭

2 是空调吹霉的吗？ 新京报的实验让人震惊 >>> 空调72小时吹霉一碗米饭 实验1：盖好的米饭，只是略有变色。
实验2：没加盖的米饭，长毛发黑，出现霉变。 是空调吹霉的吗？

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4 “微生物” 关于 你知多少？

5 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养

6 一. 基础知识 (一)、微生物 1、微生物的定义： 微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物，个体微小，结构简单，通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物，统称为微生物。

7 2.微生物的基本分类： 原核类: 原生动物： 微生物 真核类： 真 菌： 酵母菌、霉菌、食用菌等 非细胞类： 病毒、类病毒、朊病毒
细菌、蓝藻、放线菌、支原体、衣原体、立克次氏体。 原生动物： 如：草履虫、变形虫等 微生物 真核类： 真 菌： 酵母菌、霉菌、食用菌等 如衣藻等小于1mm的单细胞及多细胞藻类 显微藻类： 非细胞类： 病毒、类病毒、朊病毒 ◆微生物的共同特点： 个体微小、结构简单

8 菌落

9 3、菌落 ⑴.定义： 单个细菌（或其他微生物）或一堆同种细胞在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态、构造的子细胞群体，叫做菌落。 ⑵.特征： 大小、形状、边缘、光泽、颜色、质地、透明度等。 ⑶.不同的菌所形成的菌落特征各不相同，因此，菌落可以作为菌种鉴定的重要依据。

10 一. 基础知识 (二)、培养基 1.概念： 2、培养基的种类： 液体培养基 长有菌落的固体培养基

11 培养基的种类、特点、举例 划分 标准 培养基种类 特点 举例 物理 性质 化学 成分 用途 液体培养基 不加凝固剂 固体培养基
酵母菌种群数量变化 固体培养基 加凝固剂（如琼脂） 大肠杆菌的纯化 半固体培养基 加少量凝固剂 观察细菌的运动 含化学成分不明确的天然物质,如 天然培养基 工业生产发酵液 合成培养基 培养基成分明确，如 实验室分类、鉴定 加入青霉素的培养基，抑制细菌生长。 不加氮源的无氮培养基，分离固氮菌。 加入或不加某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长, 选择培养基 加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物 伊红美兰培养基鉴别大肠杆菌 鉴别培养基

12 3.培养基的营养成分： 一般都含有： 碳源、氮源、水、无机盐等 为什么大多数培养基都含有这四类物质？

13 4.培养基的其他要求： 培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质（生长因子）以及氧气等的要求。 生长因子 ⑴.概念： 微生物生长不可缺少的微量有机物。 ⑵.作用： 酶和核酸的组成成分。 ⑶.常见的生长因子： 维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。

14 练习: 1.不能作为异养微生物碳源的是（ ） D A 牛肉膏 B 含碳有机物 C 石油 D 含碳无机物
1.不能作为异养微生物碳源的是（ ） A 牛肉膏　B 含碳有机物 C 石油　D 含碳无机物 D 2.自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是（ ） 　A．碳源　B．氮源 C．无机盐　D．生长因子 A 3.下列关于生长因子的说法中，不正确的是（ ） 　A．是微生物生长不可缺少的微量有机物 　B．是微生物生长不可缺少的微量矿质元素 　C．主要包括维生素、氨基酸和碱基等 　D．一般是酶和核酸的组成成分 B

15 一.基础知识 （三）、无菌技术 阅读P15-16《无菌技术》思考： 1. 获得纯净培养物的关键？ 2. 无菌技术主要包括哪几方面？ 3. 消毒和灭菌有何不同？ 4. 实验室常用的消毒和灭菌方法有哪些？

16 3、消毒与灭菌的比较 比较项 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 灭菌 部分生活状态的微生物 不能 较为温和 能 强烈 全部微生物

17 4.常用的消毒与灭菌的方法 ⑴.消毒： 名称 方法 温度/浓度 时间 对象 / 煮沸消毒法 煮沸 100℃ 5-6min 耐高温液体
70-75℃ 30min 巴氏消毒法 加热 . 不耐高温液体 80℃ 15min 酒精擦拭 75% 皮肤 氯气 水源 化学药剂消毒法 . 室内、接种箱、操作台的表面和空气 喷洒石炭酸 或煤酚皂 室内、接种箱、操作台的表面和空气 . 紫外线消毒 紫外灯照射 30min

18 4.常用的消毒与灭菌的方法 ⑴.灭菌 名称 适用范围 要求 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌
接种工具 (接种环、接种针)或其他金属用具。接种过程中试管口或瓶口易被污染部位。 直接在火焰的充分燃烧层（外焰）灼烧 灼烧灭菌 . 能耐高温的需要保持干燥的物品( 玻璃器皿) 160－170℃、 1－2h 干热灭菌 . 通常用于培养基的灭菌 100kPa、121℃、 15-30min 高压蒸汽灭菌 .

19 采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位杂菌（ ）
　A．接种环、吸管、培养基、接种室 　B．吸管、接种环、培养基、接种箱 　C．培养基、吸管、接种环、接种箱 　D．培养皿、吸管、培养基、双手 B

20 谢 谢 指 导