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第一章 绪论 陈正炎教授.

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1 第一章 绪论 陈正炎教授

2 高科技在检验医学中的应用促进了临床检验学术水平的提高,使临床医学迅速发展新实验、新方法、新的实验参数,为临床疾病的诊断、治疗、预防及预后的分析提供了重要指标。

3 ⑴影像学诊断 临床诊断 ⑵细胞学诊断 ⑶实验室诊断——早期

4 我国综合性医院检验科检测项目分为: ⑵临床检验:三大常规检测 ⑶细菌检验 ⑷免疫学检验 ⑸血液学检验 ⑹分子诊断学检验
⑴生化检验:重要地位;①项目多、②信息多、 ③自动化程度高。 ⑵临床检验:三大常规检测 ⑶细菌检验 ⑷免疫学检验 ⑸血液学检验 ⑹分子诊断学检验

5 一、临床生物化学的含义 (Clinical Biochemistry)
生物化学+临床医学 临床生物化学 利用生物化学的 理论与技术→研究人体疾病状态下的 生化改变的机理、体液中生化组分的质与量的变化→为疾病的诊断、治疗、病情监测、药物疗效、预后及疾病的预防提供信息和决策依据的一门学科。

6 二、临床生物化学的特点 ⒈理论性、实践性强:说明疾病发生机理、 开发新的检测技术
⒉边缘性、应用性学科(交叉学科):与多种学科和技术有密切联系。 ⑴生物学、物理学、数学、生理学、药理学、病理生理学、毒理学——基础学科

7 ⑵生物化学、免疫学、血液学、输血学、遗传学、微生物学、分子生物学——专业学科。
⑶仪器学、电子技术、计算机技术、免疫学技术、生化技术、及分子生物学技术——技术应用。

8 三、临床生物化学的发展 临床生物化学——一门年轻正在发展的学科

9 ⒈1918年:“临床生物学”专著 ⒉1931年出版了“临床生物学” 教科书——标志临床生物化学的初步形成。 ⒊20世纪四十年代:蛋白质、氨基酸、营养与健康、酶学等方面——进行了研究,并取得了较大成果。 ⒋20世纪50年代——分子生物学的研究。

10 ⒌生物化学技术的发展: ⑴肉眼观察:3000年前 中国:记载“泡沫尿” →竹条搅动尿液→泡沫 出现→说明尿液有蛋白→诊断疾病。 埃及:(公元前500年) 尿液倒在干沙上→数蚂蚁数目→尿糖

11 ⑵18世纪后期——体液分析 重量法及容量法——分析体液的血糖、尿素、电解质。 缺点:耗时、耗料、方法繁琐、灵敏度低

12 ⑶20世纪50年代:比色分析技术——使生化检验发生根本性改观。 测定物+试剂 显色 比色 可见光:400nm→700nm波长
测定物+试剂 显色 比色 可见光:400nm→700nm波长 光度法:紫外分析技术 蛋白质 定性、定量 核酸 定性、定量 280nm 260nm

13 形成:光谱分析技术——发射光谱、吸收光 谱、散色光谱。 准确度:血糖、血脂、酶类、尿素、尿酸、 肌酐等等。

14 ⑷电化学分析技术:离子选择电极——分析 电解质。 ⑸电泳技术:薄层电泳、凝胶电泳、等电聚 焦电泳、转移电泳、毛细管电 泳。

15 ⑹层析技术:离子交换层析、凝胶层析、亲 和层析、高效液相层析。气相 层析。 ⑺离心技术:差速离心法、密度梯度离心法。 ⑻同位素技术——放射性:检验微量成分。

16 ⑼免疫技术:免疫电泳法、免疫扩散法、免 疫沉淀法、酶免疫法。 ⑽酶试剂法:提供了更可靠更灵敏的检测分 析技术。 ⑾分子生物学技术——基因诊断 分子杂交技术、PCR技术、RFLP技术、 DNA序列分析技术等。

17 ⒍自动化分析仪的应用 20世纪后期:计算机技术的应用→全自动生化 分析仪的产生将取样、加试剂、 去干扰物、混合、保温反应、检 测数据处理、打印、清洗等步骤 通过仪器完成。

18 特点:快速、简便、灵敏、准确、标准化、 微量化。
特点:快速、简便、灵敏、准确、标准化、 微量化。 第一代:流动式自动生化分析仪 第二代:分立式自动生化分析仪 第三代:离心式自动生化分析仪

19 例如:COBAS 800型全自动多功能生化分析 系统。
检测速度:855测试/小时 同时测定72相 标本用量:2—10微升/测试 标本类型:血清、血浆、尿、脑脊液、溶血 物、全血。 分析方法:4种

20 分光光度法——酶类、底物类 透射比浊法——特种蛋白、滥用药物 荧光偏振法——治疗药物检测、甲状腺功能 检测 离子选择电极法——钠、钾、氯、锂离子。

21 目前检验科用:目标式、一体化分析系统 将临床化学及免疫化学检测项目结合于 一个模块平台进行检测。 ①临床化学模块 样本:血清、血浆、尿、脑脊液、溶血物、 全血。 检测能力:1000~2000项次/小时 同时上机项目:60~120个

22 ②免疫模块: 检测能力:170~340项次/小时 同时上机项目:25~50个项目 检测项目:750个免疫项目

23 四、研究领域 ⒈阐述疾病的生化基础——了解疾病的发生机理。 例如:⑴糖尿病及其代谢紊乱 ⑵疾病时血浆蛋白质变化 ⑶高脂血症
⑷肝脏疾病的生化改变 化学病理学(Chemical Pathology)

24 ⒉研究基因与疾病的防治 基因突变→疾病发生 ⒈美、英、中、俄、法等6国完成的(2001年)人类基因组计划(HGP):3.5万基因的核苷酸序列测定使人类进入基因王国→对遗传与疾病的相关性研究开辟一条通道→更深入了解人类疾病的分子生物学基础→形成基因诊断技术。

25 ⑵功能基因组学——深入研究各基因的功能 ⑶蛋白质组学——基因表达产物的研究

26 ⒊探讨生化检测的临床意义、指标的选择及评价
诊断化学:(Diagnostic Clinical Chemistry)例如:血清酶学检测 心肌疾病的生化标志物检测 肿瘤标志物检测 ⑴常规生化检测: 肝功能、肾功能、血糖、血脂等。

27 ⑵急诊生化检测:检测结果需迅速回收 血糖、尿素、电解质、 酶、血气分析、心肌标 志物。 ⑶特殊生化检测:毒物检测、激素检测、 治疗药物检测、DNA分 析、羊水分析

28 ⑷床旁生化检测:急诊室、监护室、手术室、
事故现场、农村等 微量、小型仪器,现场操作——快捷、方便。

29 对各种检测方法进行评价 对检测项目进行检测 对检测结果进行分析

30 五、影响生化检测结果的生物学 因素 ⒈生理因素 ⑴年龄:新生儿:HBF(主)胎儿型 胆红素浓度↑ 青春期:ALP活性↑ 成年期:生化指标稳定
老年期:胰岛素对糖反应↓,血 尿素↑

31 ⑵性别:醇脘H酶活性:女性﹥男性 ⑶妊娠:AFP↑ ⑷运动:LDH、CK↑

32 ⒉食物 饮酒:TG↑,γ-GT↑↑,AST↑ 餐后:血G↑,钾离子↑,TG↑,ALP↑ ⒊药物: 利尿药:血钾↓ 避孕药:Ch↑,ALT↑,转氨酶↑,TG↑ 吸毒:淀粉酶↑,ALP↑,胆红素↑, 血钾↑,尿素↑

33 ⒋标本保存不妥 血清、血浆保存中:ACP失活、血氨↑、血P↑ 冰冻六个月:ALP、血G、氮含量明显改变

34 不稳定血清(血浆)成分保存法 成分 保存法 氨 採血后直接冰冻(几小时到1天) 尿素 4℃(3天),冷冻(数月)
成分 保存法 氨 採血后直接冰冻(几小时到1天) 尿素 ℃(3天),冷冻(数月) 胆红素 避光, 4℃(数月),冷冻(1月) 酮体 冷冻(数月) G NaF抗凝剂,全血4℃(2周) ChE ℃(1周),冷冻(2周) ALP 迅速分离, 4℃(1周),不可冷冻 ACP 迅速分离, 4℃(1周),隔绝空气 CK ℃(数日),冷冻(2周) LD 室温,不可冰箱保存

35 ⒌干扰物 ⑴内源性干扰物:Hb,胆红素,脂类,异物 蛋白 ①溶血: 溶血→稀释出Hb→340nm吸收峰↑→直接干 扰胆红素结果。
溶血→红细胞内成分释放→影响结果 RBC:LD,钾离子,镁离子弄故分别比血浆高 160倍、22倍、3倍。

36 RBC与血浆(血清)某些物质浓度差异 生化成分 RBC 血浆(血清) RBC/血浆
精氨酸酶(U/L 37℃) 6120± (0.8~7.9) MDH (U/L 25℃) ± (80~310) LD (U/L 37℃) ± ~ AST (U/L 25℃) ± CK (U/L 25℃) ± ﹤ 钾离子(mmol/L) (76~100) (3.5~5.5) 肌酸(μmol/L)

37 ②脂血:干扰血G、TG、P、总胆红素、尿
酸、TP、纳离子测定。 ③黄疸:干扰血G、尿酸、Ch、TG测定。

38 ⑵外源性干扰物 药物、添加剂、实验材料等 抗凝剂:草酸盐、柠檬酸盐、EDTA—钙离子 抑制淀粉酶、CK、5羟色氨

39 六、生化学检验的任务 ⒈检验人员素质的提高 ⑴对检测质量保证的认识 ⑵对检测结果分析能力的提高 ⒉信息化管理——网络化
设置实验室信息系统,进行实验数据储 存,处理及管理。

40 ⒊临床对话:与临床医师交流,参加病案讨 论,提供检测项目的选择。 ⒋研究开发:新技术新项目的开发; 配套实验正确组合,进行科研 项目的申报及研究。 ⒌人才培养:培养硕士、博士研究生,定期 进行学术交流。

41 七、参考资料 ⒈中文:①中华检验医学杂志 ②国际检验医学杂志 ③中国检验医学杂志

42 ⒉外文:①Tietz Textbook of clinical
Chemistry and Molecular. ②Clinical Chemistry (美国) ③Annuals of clinical Biochemistry(英国) ④Clinical Chemistry Acta(荷兰) ⑤Clincal Chemistry Review (加拿大)

43 谢 谢 !

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