第十四章 棒状杆菌属.

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1 第十四章 棒状杆菌属

2 概 述 棒状杆菌属是一群革兰染色阳性杆菌，菌体形态特征是在其一端或两端常呈棒状膨大，故名，归属放线菌科。

3 分类： 白喉棒状杆菌（C.diphtheriae） 假白喉棒状杆菌（C.pseudodiphtheriticum）
干燥棒状杆菌（C.xerosis） 化脓棒状杆菌（C.pyogenes） 溃疡棒状杆菌（C.ulcerans） 假结核棒状杆菌（C.pseudotuberculosis） 溶血棒状杆菌（C.haemolyticum） J-K群棒状杆菌（C.jeikeium-CDC group JK）

4 G+杆菌、一端或两端膨大成棒状 染色不均匀，两端浓染或有异染颗粒 无鞭毛、无芽胞 排列不规则，呈栅栏状 白喉棒状杆菌——致病菌 类白喉棒状杆菌——条件致病菌

5 第一节 白喉棒状杆菌 C.diphtheriae

6 一、临床意义 致病物质 (一)白喉外毒素 毒力强，130ng/kg可使人死亡 抗原性强 编码外毒素的tox基因——β-棒状杆菌噬菌体

7 A亚单位可使细胞延伸因子-2（EF-2）灭活，影响蛋白质的合成
作用机制： A亚单位可使细胞延伸因子-2（EF-2）灭活，影响蛋白质的合成 作用特点： 毒性作用大，1分子能杀一个细胞 作用于多种细胞，心肌、神经细胞均有毒素受体 肿瘤细胞对此毒素敏感

8 （二）索状因子 （三）K抗原 --细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白 细菌表面的一种糖脂，能破坏细胞的线粒体，影响细胞的呼吸与磷酸化 --抗吞噬
--有利于细菌在黏膜表面的定植

9 所致疾病：白喉--急性呼吸道传染病 传染源：患者及带菌者 传播途径：飞沫或污染 临床表现 细菌------上呼吸道粘膜， 生长繁殖，产生毒素
细菌与毒素共同作用引起局部炎症： 炎性渗出，坏死，纤维蛋白 →→假膜→→窒息 毒素→→血液→→全身中毒症状 外周N---N炎：膈肌麻痹---呼吸困难 声带麻痹---声音嘶哑 软颌麻痹---吞咽困难 心肌---心肌炎

10 白喉假膜

11 免疫性： 抗毒素免疫 感染后机体可获得牢固的免疫力 机体还可通过其它方式获得免疫力： 易感者： 六月以下婴儿---------母亲
成人 隐性感染、人工主动免疫 易感者： 1~5岁儿童 成人---也有可能

12 锡克试验（Schick test） （白喉外毒素皮内试验）
调查人群在感染或预防接种后对白喉是否产生免疫力 根据外毒素与抗毒素中和的原理，以少量白喉外毒素测定机体有无相应抗毒素 缺点—观察时间长、操作繁琐，不易进行广泛测试

13 《致敏红细胞凝集试验》 测定血清中抗毒素水平 0.1ml血清，倍比稀释+外毒素致敏红细胞37℃、1h 敏感度可达10-4单位，简便快速

14 --人工被动免疫——白喉抗毒素+白喉类毒素
防治原则： --人工主动免疫——白喉类毒素 DPT混合疫苗：白喉类毒素、百日咳菌苗、破伤风类毒素 --人工被动免疫——白喉抗毒素+白喉类毒素 --治疗：抗毒素+抗生素 早期足量注射白喉抗毒素，使毒素在与细胞结合以前被抗毒素中和

15 二、生物学特性 形态与染色: G +细长微弯的杆菌 一端或两端膨大呈棒状 常排列呈V、L、X等文字形 异染颗粒——形态上的鉴别特征
无荚膜、无芽胞、无鞭毛 白喉棒状杆菌异染颗粒 ×

16 培养特性： 需氧或兼性厌氧，最适温度35～37℃； 营养要求高，在含血液、血清、鸡蛋的培养基上生长良好；
吕氏（Loeffler)血清斜面或鸡蛋斜面： 生长最快，6h即生长，10～12h长出灰白色、湿润、有光泽的光滑型菌苔/菌落，菌体形态典型、异染颗粒明显，连续传代可保持形态和产毒性能不变

17 BAP： 菌落灰白色、光滑型、 直径1～2mm、有狭窄 β溶血环（轻型） 多次传代后菌体变为球 型 BAP中菌落

18 亚碲酸钾BAP：选择鉴别培养基 黑色菌落——鉴别依据 不同菌型还原能力不同，呈现黑色或灰黑色 菌落 根据菌落特征及生化反应特点可将本菌分为：
重型、中间型、轻型 白喉棒状杆菌 在亚碲酸钾BAP中菌落

19 液体培养基： 生长较好，但菌型不同其生长特点也不相同

20 生化反应： 分解葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、果糖产酸不产气，不分解乳糖、甘露糖，一般不分解蔗糖，吲哚 （-）、硝酸盐还原（+）、触酶（+）、氧化酶（-）、明胶液化（-）尿素（-） 重型能分解淀粉、糖原、糊精，迟缓分解蔗糖

21 抵抗力： 对干燥、寒冷和日光抵抗力较其他无芽胞细菌强，在干燥的假膜中可生存3个月
对湿热和消毒剂敏感，5%石炭酸、1：1000升汞1min，100℃1min、60℃10min均可灭菌 对青霉素、红霉素等敏感，对磺胺不敏感

22 三、微生物学检验 分离出白喉杆菌，并证明其毒力 标本采集： 分泌物 ； 取双份； 如不能及时检验，标本浸于无菌生理盐水或15%
甘油生理盐水保存

23 患者或带菌者咽喉、鼻咽拭子等 直接涂片染色镜检（单染或G 染色+异染颗粒染色） 吕氏血清斜面35℃12～18h 亚碲酸钾BAP、35℃24～48h BAP35℃16-18h 涂片染色镜检(G染色和异染颗粒染色） 观察菌落特点 吕氏血清斜面 生化反应 涂片染色镜检 检验程序 毒力试验

24 直接涂片染色镜检： -- 2～3张涂片→G染色、异染颗粒染色 镜检——初报“直接涂片检出形似白喉杆菌”——早期诊断
--用无菌棉拭子浸以动物血清，采集标本，37℃10h，涂片染色镜检——提高阳性率

25 分离培养： 吕氏血清斜面： 37℃、8～12h →→涂片染色镜检 亚碲酸钾BAP： BAP： 轻型有β溶血环，应注意与溶血性链球菌鉴别
--检出率要比直接涂片高，有助于快速诊断 亚碲酸钾BAP： 37℃、24～48h，黑色菌落 BAP： 轻型有β溶血环，应注意与溶血性链球菌鉴别

26 鉴定： 形态染色、菌落特点、生化反应 糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原 —鉴别棒状杆菌属不同的种 白喉：葡萄糖 （+）、麦芽糖 （+）
蔗糖 （-）

27 毒力试验（鉴定致病菌株的重要依据） 体外法： 琼脂平板毒力试验（Elek平板毒力测定） SPA协同凝集试验 对流电泳 对流免疫电泳

28 体内法 ： 用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验

29 第二节 类白喉棒状杆菌

30 （二）结膜干燥棒状杆菌（C. xerosis）
（三）化脓棒状杆菌（C. pyogenes） （四）溃疡棒状杆菌(C. ulcerans) （五）假结核棒状杆菌（C. pseudotuberculosis） （六）溶血棒状杆菌（C. haemolyticum） （七）杰克群棒状杆菌（C. jeikeium-CDC group JK） （一）假白喉棒状杆菌（C. pseudodiphtheriticum）

31 共同特点： --大多不产生外毒素 --菌体较粗短，着色较均匀，很少有异染颗粒 --大多寄生在人或动物的鼻腔、咽喉、外耳道、
外阴、泌尿道和皮肤等处 --条件致病菌，可引起心内膜炎、菌血症、肺 炎、泌尿生殖道感染等 --鉴别——生化反应