中山大学附属第三医院 血液内科 何易主治医师

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1 中山大学附属第三医院 血液内科 何易主治医师
细胞遗传学在血液病 中的应用 中山大学附属第三医院 血液内科 何易主治医师

2 白血病染色体改变基本特征 获得性 克隆性 异常克隆：至 少两个细胞有同样的染色体增加或结构重排，或者至少三个细胞有同一染色体丢失
克隆性 异常克隆：至 少两个细胞有同样的染色体增加或结构重排，或者至少三个细胞有同一染色体丢失 原发性 见于病程早期；和发病相关；常为单一异常 继发性 见于病程中；与疾病恶化有关；多为复杂异常 平衡型 染色体结构重排（易位或倒位） 不平衡型 染色体整条或部分的增加或丢失

3 四、各型白血病的核型异常 （一）CML （二）CLL （三）AML （四）ALL 其他

4 （一）慢性粒细胞白血病的染色体改变 1. Ph染色体的发现及其性质 1960年 Nowell在美国Philadelphia所发现
1973年 Rowley用Q/G带证实t(9;22)(q34;q11) 1984年 Prakash用高分辩定在9q34.1和22q11.21 分子学研究发现该易位导致bcr/abl融合 → 8.5Kb bcr/abl融合mRNA→ P210 Ph染色体系获得性畸变 Ph染色体见于粒、红、巨核系细胞以及B细胞，提示CML为起源于多能干细胞的克隆性疾病。

5 CML t(9;22)(q34;q11)

6 慢粒慢性期的染色体改变 t(9;22), -Y;+8;+Ph 46,t(9;22)

7 慢粒急变期的染色体改变及其意义 20%保持46,t(9;22)不变
80%除t(9;22)外出现额外异常，依次为2Ph、+8、i(17q)、+19、+21等 少数病例Ph染色体可和t(8;21)、t(15;17)、inv(16)或inv(3)同时存在 额外异常比临床血液学急变征象早出现2-4个月 无额外异常组 80%对治疗有反应，MS 5.7个月 部分细胞有额外异常组 50%对治疗有反应，MS 4.9个月 全部细胞有额外异常组成 30%对治疗有反应,MS 2.5个月

8 （二）慢淋的染色体变化 +12 1/3染色体异常CLL 数目异常 +3（6%） +18（5%） B细胞慢淋 14q+ 25%染色体异常CLL
数目异常 （6%） +18（5%） B细胞慢淋 q+ 25%染色体异常CLL t(11;14)(q13;q32) t(14;19)(q32;q13) 结构异常 del(13q) 20%染色体异常CLL i(17q) 6q- T细胞慢淋 inv(14)(q11q32)

9 （三）急非淋白血病的染色体改变 染色体异常检出率50%-80%，最高达93%，检出率高低主要与方法学有关，其次与地理环境及种族的差异有关
原发性核型异常分两大类 和FAB亚型相关，特异性染色体重排 和FAB亚型 不相关，大多为数目异常 初诊时核型异常CR时消失，复发时再现 部分病例由于核型演化产生继发性异常

10 AML的WHO分型 伴再现性遗传学异常的AML 伴多系发育异常的AML 治疗相关性白血病 不另做分型的AML

11 伴再现性遗传学异常的AML （见于30％的AML）
伴t(8;21)(q22;q22)(AML1/ETO)的AML 伴t(15;17)(q22;q21)(PML/RAR)的APL 伴inv(16)(p13q22)(CBF /MYH11)和骨髓嗜酸粒细胞异常的AML 伴11q23(MLL)重排的AML

12 一、ANLL和FAB亚型相关的特异性染色体重排
畸变类型 频率 FAB 伴随的主要特征 t(8;21)(q22;q22) 额外异常:性染色体丢失(73%), 9q-(11%), 7q-或易位(10%), +8 (7.5%)分子水平上有AML/ ETO融合基因 15% M2 (M4, M1) 1.MPO强阳性; 2.显著Auer小体; 3.成熟粒细胞胞浆中有橙红 色颗粒; 4.白细胞胞浆中有空泡 5.骨髓嗜酸细胞增多; 6.CD34、HLA-DR、CD13、CD33、CD19和CD56阳性；7.CR率90%，MS 52个月。

13 AML-M2 t(8;21)(q22;q22),-Y

14 异常早幼粒细胞增生，Auer小体柴捆状，DIC，分子水平上PML/RAR融合基因，ATRA有效
畸变类型 频率 FAB 伴随的主要特征 t(15;17)(q22;q21) 10% M3(90-100%) 异常早幼粒细胞增生，Auer小体柴捆状，DIC，分子水平上PML/RAR融合基因，ATRA有效 t(11;17)(q23;q21) t(11;17)(q13;q21) t(5;17)(q32;q21) t(17;17)(q11;q21) PLZF/RAR ATRA无效 NuMA/ RAR NPM/ RAR STAT5b/RAR 额外异常 +8最常见

15 AML-M3 t(15;17)

16 畸变类型 频率 FAB 伴随的主要特征 inv(16)(p13q22) t(16;16)(p13;q22) del(16)(q22)
ins(16)(q22p13.1 p13.3) 额外异常:+8, +22 8% ANLL(25%M4) M4Eo(100%) 骨髓嗜酸细胞异常，数目增加（>5%)或形态异常（嗜酸细胞中混杂有大而不规则颗粒，PAS和NCE均强阳性，CR率接近100%，MS>5年，治疗不强时可发生脑白,分子水平上有CBFB/MYH11融合基因

17 畸变类型 频率 FAB 伴随的主要特征 t/del(11q23) t(6;11)(q27;q23) t(9;11)(p22;q23)
t(11;19)(q23;p13.1) 6%成人AML M5 (M4) 特殊的年龄分布：儿童AL50%，婴儿AL70% 高白细胞计数、髓外浸润（肝脾肿大）和皮肤受累多见，预后不良 分子水平上MLL基因和来自伙伴染色体的基因融合如t(9;11)形成MLL/AF9融合基因

18 畸变类型 频率 FAB 伴随的主要特征 t(7;11)(p15;p15) <1% M2(M4、M5)
Auer小体易见，NAP，CR率72.7%,MS 13个月，主要见于东方人种 分子水平上有NUP98/HOXA9融合基因

19 畸变类型 频率 FAB 伴随的主要特征 t(16;21) (p11;q22) <1% M4 或M5 病情进展快，CR率低，复发率高，分子水平上有FUS/ERG融合基因

20 二、ANLL中和FAB亚型不相关的核型异常
+8(8%)、-7/7q-(7%)、+21(1-2%)、+11(1%)、+13(<1%) +11显示干/祖细胞表型（HLA-DR和CD34阳性），分子水平上可见MLL外显子2-8的串联重复，治疗效果差，仅获短暂首次CR +13者白血病细胞常同时表达髓系和T系抗原，特别多见于M0和M1型，原始细胞呈手镜样或小原淋样细胞，CR率低，MS9.5个月

21 （四）急淋的染色体变化 染色体异常检出率70%-90% 66%的异常为特异性染色体重排

22 一、染色体数目异常 1 2 3 4 5 6 7 近四倍体 L2型、T细胞表型、年龄较大、预后差 异常类型 发生率 伴随特征
>50的超二倍体 20-30%儿童ALL 年龄2-10，WBC不高，SLDH, FAB分型：L1或L2, CD10（+）早前B表型, 化疗效果好, MS>2-3 年 2 47-50的超二倍体(+21.+X ) 10-15%ALL FAB分型：L1或L2型，早前B表型 3 假二倍体 40%ALL 4 正常二倍体 FAB分型：L1或L2型T-ALL中正常核型者达30% 5 亚二倍体 7-8%ALL FAB分型：L1或L2型 6 近单倍体 <1%ALL FAB分型：L1或L2型，早前B表型，预后差 7 近四倍体 L2型、T细胞表型、年龄较大、预后差

23 二、WHO的ALL分型 （1）前体B淋巴细胞白血病 （2）前体T淋巴细胞白血病 （3）伯基特淋巴细胞白血病

24 （1）前体B淋巴细胞白血病 ① t(9;22)(q34;q11) BCR/ABL ② t(4;11)(q21;q23) MLL/AF4
　③　t(1;19)(q23;p13) E2A/PBX1 　④　t(12;21)(p13;q11) TEL/AML1

25 畸变类型 频率 FAB分型 免疫表型 伴随特征 t(9;22) (q34;q11) 2-5%儿童ALL 25-33%成人ALL L1或L2型
前B、早前B或双标记 WBC,化疗效果差，CR率低，复发率高，分子水平上有BCR/ABL融合基因，P190和P210各50%（成人）P190 82%（儿童）

26 畸变类型 频率 FAB分型 免疫表型 伴随特征 B系列ALL t(4;11)(q21;q23) 2% L1或L2 前B或早前B 63%同时表达CD15 婴儿和新生儿尤多见，肝脾肿大，WBC、脑白，预后恶劣，分子水平有MLL/ AF4融合基因

27 畸变类型 频率 FAB分型 免疫表型 伴随特征 t(1;19) (q23;p13) 5-6%儿童ALL 25%前BALL L1或L2型
前B细胞表型(CIg+、CALLA+) WBC,SLDH ,化疗不佳，分子水平上有E2A/PBX1融合基因

28 畸变类型 频率 FAB分型 免疫 表型 伴随特征 t(12;21) (p13;q22) 12-27%儿童B-ALL L1或L2型
CR率高，临床很少复发，分子水平上有TEL/AML1融合基因，常规核型分析不能发现，只有用FISH和RT－PCR才能检测。

29 前体T淋巴细胞白血病 （1）t(11;14)(p13;q11) LMO2/ TCRα/δ
（2）t(10;14)(q22;q11) HOX11/TCR α/δ （3）t(8;14)(q24;q11) MYC/TCR α/δ

30 伯基特淋巴细胞白血病（L3型） ① t(8;14)(q24;q32) MYC/IGH ② t(2;8)(p12;q24) IGK/MYC
③　t(8;22)(q24;q11) 　MYC/IGL

31 畸变类型 频率 FAB 免疫表型 伴随特征 t(8;14)(q24;q32) 变异型： t(2;8) (p12;q24)
3% L3型 成熟B细胞ALL (sIg+) WBC 10×109/l，MS<1年，腹部肿块和脑白多见，分子水平上MYC(8q24) 和IgH(14q32)或IgK(2p12)、Igλ(22q11)并置而高表达

32 治疗相关性白血病的染色体改变 种类 Ⅰ烷化剂所致TRL Ⅱ拓扑异构酶Ⅱ抑制剂所致TRL 1.鬼臼素 2.蒽环类 3.二氧哌嗪 年龄 染色体
潜伏期 白前 病态造血 FAB分型 对化疗的反应 生存期 Ⅰ烷化剂所致TRL 老年 5q-/-5和或7q-/-7 5-7年 常有 M3以外各亚型 差 短 Ⅱ拓扑异构酶Ⅱ抑制剂所致TRL 1.鬼臼素  年轻 11q23/MLL 2-3年 常无 M5(M4) 好 长 2.蒽环类 同上 t(8;21);inv(16) M2、M4Eo 3.二氧哌嗪 t(15;17) M3

33 五、白血病染色体分析的 临床和生物学意义 异常克隆有助于白血病的诊断和鉴别诊断 特异性染色体重排有助于急白分型
五、白血病染色体分析的 临床和生物学意义 异常克隆有助于白血病的诊断和鉴别诊断 特异性染色体重排有助于急白分型 监测急白缓解或复发和慢粒急变的重要指标 性染色体标志验证BMT是否成功 染色体为独立的预后指标 协助选择适当的治疗方案 为分子学研究提供重要线索

34 急白核型的预后分级 预后等级 核型类型 AML ALL 好 t(8;21)、 t(15;17)、 inv(16)
t(12;21)、染色体数目>50条的超二倍体、dic(9;12)(p11;p12) 中 正常、+8、+21、+22、 11q23异常、del(9q)、del(7q) 正常、47-50的超二倍体、t(11;14) 差 -5、del(5q)、-7、3q异常、 复杂异常 亚二倍体、近单倍体、t(9;22)、t(4;11)、t(1;19)、t(8;14)

35 （五）MDS 的染色体变化 染色体异常检出率40%-70% 以染色体缺失常见，晚期MDS：RAEB，RAEB-t检出率高且核型复杂

36 ●病程中可出现核型演变，提示正向白血病转化

37 MDS 核型常见类型 核型类型 伴随特征 5q－综合症 多见于老年女性，2/3为RA或RAS， 常有大红细胞性白血病，血小板正常或增多和巨核细胞不分叶的特点。临床上感染和出血少见，转白风险小，MS较长。

38 MDS 核型常见类型 核型类型 伴随特征 17p-综合症 与烷化剂和羟基脲治疗相关 1q三体
主要见于RA，发病年龄轻，通常呈良性经过，贫血持续时间较长和骨髓增生低下 20q- RAS多见，贫血程度轻，病情经过平稳，骨髓中原始细胞百分率低，常有显著的红系病态造血，转白率低，MS较长

39 MM 核型常见类型 数目异常：＋6，＋9，＋17提示预 后较好；＋8提示病情进展 结构异常：14q+ del(13q14)预后不良
del(17p13)

40 MM 核型常见类型 数目异常：＋6，＋9，＋17提示预 后较好；＋8提示病情进展 结构异常：14q+ del(13q14)预后不良
del(17p13)

41 淋巴瘤核型常见类型 90%有克隆性染色体异常，多与组织学和免疫学亚型相关。
70％以上B细胞淋巴瘤涉及14q32的IgH重排，大多数T B细胞淋巴瘤涉及TCR位点重排。 t(14;18)，BCL6重排和较好的预后相关，不良预后因素包括复杂核型，重排染色体的数目和特异染色体异常如t(8;14)，＋7等。

42 骨髓增殖性疾病核型常见类型 PV:+8,+9 20q- dup(1q) ET:未发现一致性异常类型 MF:+8,-7 del(7q)