中级化学实验（Ⅰ） 江苏大学化学化工学院 教材：中级化学实验（雷群芳主编）.

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1 中级化学实验（Ⅰ） 江苏大学化学化工学院 教材：中级化学实验（雷群芳主编）

2 实验一 分光光度法同时测定维生素C和维生素E
一、实验目的 二、实验原理 三、仪器与试剂 四、实验步骤 五、数据记录及处理 六、思考题

3 一、实验目的 （1）掌握UT-1800紫外-可见分光度计的使用。 （2）学会在紫外光谱区同时测定双组分体系-维生素C和维生素E。

4 二、实验原理 维生素C（抗坏血酸）和维生素E（ 生育酚）起抗氧剂作用，即它们在一定时间内能防止油酯变酪。两者结合在一起比单独使用的效果更佳，因为它们在抗氧剂性能方面是“协同的”。因此，它们作为一种有用的组合试剂用于各种食品中。 抗坏血酸是水溶性的， 生育酚是酯溶性的，但它们都能溶于无水乙醇，因此，能用在同一溶液中测定双组分的原理来测定它们。

5 三、试剂和仪器 试剂：抗坏血酸：称0.0132g抗坏血酸，溶于无水乙醇中，并用无水乙醇定容于1000mL（7.50×10-5mol/L）；生育酚：称0.0488g 生育酚溶于无水乙醇中，并用无水乙醇定容于1000mL（1.13×10-4mol/L）；无水乙醇。 仪器：UT-1800紫外-可见分光光度计；石英比色皿2只；50mL容量瓶9只，；10mL吸量管2只。

6 四、实验步骤 1.配制标准溶液 （1）分别取抗坏血酸贮备液4.00、6.00、8.00、10.00mL于4只50mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。 （2）分别取生育酚贮备液4.00、6.00、8.00、10.00mL于4只50mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。 2. 绘制吸收光谱 以无水乙醇为参比，在320~220nm范围测绘出抗坏血酸和生育酚的吸收光谱，并确定λ1和λ2 。

7 3. 绘制标准曲线 以无水乙醇为参比，在波长λ1和λ2 ，分别测定步骤1配制的8个标准溶液的吸光度。 4. 未知液的测定 取未知液5.00mL于50mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。在λ1和λ2分别测其吸光度。

8 五、数据记录与处理 绘制抗坏血酸和生育酚的吸收光谱，确定λ1和λ2
分别绘制抗坏血酸和生育酚在λ1和λ2 时的4条标准曲线，求出4条直线的斜率，即 εxλ1 、εyλ1 、εxλ2 、εyλ2 。 计算未知液中抗坏血酸和生育酚的浓度。

9 Aλ1 =εxλ1bcx＋εyλ1bcy Aλ2 =εxλ2bcx＋εyλ2bcy 求解联立方程组就能得出各组分的含量. 休息 9 返回节

10 六、思考题 写出抗坏血酸和生育酚的结构式，并解释一个是“水溶性”，一个是“酯溶性”的原因。
2.使用本方法测定抗坏血酸和生育酚是否灵敏？解释其原因。

11 实验二 萃取分光光度法测定 阴离子表面活性剂的浓度
一、实验目的 二、实验原理 三、仪器与试剂 四、实验步骤 五、数据记录及处理 六、注意事项

12 一、实验目的 （1）熟悉分光光度计的使用方法和分光光度定量方法。 （2）学习萃取分光光度法测定阴离子表面活性剂的原理。
（3）了解分光光度分析中常见的干扰以及提高测定选择性的方法。

13 二、实验原理 二乙二胺合铜分子体积较小，电荷密度较大，疏水性较小，因而该阳离子配合物与水体中的小体积阴离子形成离子对化合物的能力较小，它只能将分子体积较大的长链阴离子表面活性剂定量萃取入有机相中，因而受到的干扰大大减小。但由于该配合物不含有离域π键，其与阴离子表面活性剂形成的离子对化合物摩尔吸光系数很小，测定的灵敏度较小。

14 为了克服这一缺点，本实验用二乙二胺合铜将阴离子表面活性剂萃取入有机相后，在有机相（三氯甲烷）中加入1-（2-吡啶偶氮）-2-萘酚（PAN）试剂作为显色剂，该试剂能与铜离子形成更稳定的且摩尔吸光系数较大的黄色配合物，在三氯甲烷液中该PAN-Cu配合物的ε=4.1×104，λmax= 560 nm，因而方法的灵敏度也大为提高。由于铜离子的浓度与阴离子表面活性的浓度存在定量关系，因而测得了铜的浓度也即间接测定了阴离子表面活性剂的浓度。

15 三、仪器与试剂 仪器：分光光度计；250mL分液漏斗；200mL量筒；移液管；分析天平；离心机。
试剂： 阴离子表面活性剂标准溶液（1000 mg·L-1十二烷基苯磺酸钠标准储备液）；二乙二胺合铜试剂：称取62.3 g硫酸铜晶体和49.6 g硫酸铵溶解于蒸馏水中，加入45.1 g(50 mL)乙二胺,然后用蒸馏水稀释至1L，该试剂可以稳定数个月；1-（2-吡啶偶氮）-2-萘酚（PAN，AR）。

16 四、实验步骤 （1） 被测试样溶液的配制 用量筒量取150 mL含有阴离子表面活性剂的水样，置于250 mL分液漏斗中，将水样的pH调至5~9。加入10 mL乙二胺合铜剂及20 mL三氯甲烷，振荡约1 min，在分液漏斗中静置，直至有机相与水分离。吸取约13 mL的三氯甲烷层至15mL的离心管中，盖上盖后，2500 r·min-1的转速下，离心分离5 min，用移液管吸取10 mL上层清液于20 mL比色管中（注意溶液必须澄清）。离心管中残留的水珠可用吸水纸擦干。在比色管中加入1 mLPAN试剂，盖上比色管塞子后，振荡，然后将显色后的溶液用1 cm比色皿在560 nm下测定吸光度，参比液用10：1的三氯甲烷乙醇混合液。

17 （2）标准曲线的制作 取1.00 mL1000 mg·L-1的LAS标准储备液置于100 mL容量瓶中。用蒸馏水稀释至刻度，得10 mg·L-1LAS标准溶液。分别吸取4.00 mL、8.00 mL、12.00 mL、16.00 mL、20.00 mL该标准溶液于100 mL容量瓶中，得0.4 mg·L-1、0.8 mg·L-1、1.2 mg·L-1、1.6 mg·L-1、2.0 mg·L-1LAS标准溶液。分别将上述标准溶液置于250 mL分液漏斗中，并用50 mL蒸馏水洗涤各容量瓶，与分液漏斗中的标准溶液合并，按上述水样测定同样方法进行分析测定。

18 （3）空白值的测定 用150mL蒸馏水代替水样，按步骤1~2同样方法测定空白值。空白值的吸光度值应在0.000~0.001之间。 （4）样品的测定 将样品的吸光度值减去空白值后，所得的吸光度值与标准曲线对照， 计算水样中阴离子表面活性剂的浓度。

19 五、 数据处理 测得标准溶液的吸光度后，以吸光度对LAS浓度作标准曲线。同时测定被测试样溶液的吸光度。从标准曲线上查出待测试液LAS的浓度，再计算出原试液中LAS浓度。

20 六、注意事项 注意吸量管的使用，准确吸取标准溶液和试液的体积； 启开仪器的电源开关，调波长选择钮至所需波长处； 要注意保护比色皿的光玻璃面；
用待测液将吸收池洗涤3次，然后用擦镜纸轻轻擦干 净吸 收池外表。测量时注意将盛放待测液与空白试液的吸收池须方向一致放入吸收池架，吸收池架应恰好在凹槽位置； 测量完毕，必须及时切断电源，开关放在“关”。吸收池用蒸馏水洗干净，登记使用情况，盖好防护罩。