第二节 苯乙胺类药物 Phenethylamine.

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1 第二节 苯乙胺类药物 Phenethylamine

2 结构 (Structure) 拟肾上腺素类药物，分子结构中具有苯乙胺基本结构 R1 R2 R3 HX 肾上腺素 (adrenaline)
盐酸克伦特罗 (clenbuterol hydrochloride) 硫酸沙丁胺醇 (salbutamol sulfate) 盐酸麻黄碱 (ephedrine hydrochloride) 拟肾上腺素类药物，分子结构中具有苯乙胺基本结构

3 化学性质 (feature) 弱 碱 性： 烃胺基侧链，仲胺氮－弱碱性，游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水 酚羟基特性：
邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色；在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；在碱性溶液中更易变色。 光学活性：手性碳原子，具有旋光性。 苯环取代基特性：如盐酸克伦特罗芳伯氨基； 紫外、红外吸收特性进行定性、定量分析。

4 鉴别试验 (identification)
与三氯化铁反应、与甲醛－硫酸反应 药物 三氯化铁 甲醛－硫酸 肾上腺素 Adrenaline 0.1mol/L盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫红色 红色 重酒石酸去甲肾上腺素 Noradrenaline bitartrate 翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，红色 淡红色 盐酸去氧肾上腺素 Phenylephrine hydrochloride 紫色 玫瑰红，橙红，深棕红 盐酸异丙肾上腺素 Isoprenaline hydrochloride 深绿色，滴加新制5%碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色 棕色，暗紫色 盐酸多巴胺 Dopamine hydrochloride 墨绿色，滴加1%氨溶液，显紫红色

5 鉴别试验 (identification)
氧化反应（酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色） 碘或过氧化氢 放置 肾上腺素 肾上腺素红 棕红色多聚体 中性或酸性 碘 硫代硫酸钠 盐酸异丙肾上腺素 异丙肾上腺素红 淡红色溶液 偏酸性条件 酒石酸氢钾饱和液 碘试液 硫代硫酸钠 溶液为无色或仅显微红色或淡紫色 重酒石酸 去甲肾上腺素 pH 3.56 放置5min 肾上腺素 或盐酸异丙肾上腺素 明显的红棕色 或紫色

6 鉴别试验 (identification)
紫外特征吸收 药物 溶剂 浓度(mg/ml) λnm (nm) 吸收度 (A) 重酒石酸间羟胺 水 0.10 272 盐酸异丙肾上腺素 0.05 280 0.50 盐酸多巴胺 0.5%硫酸 0.03 盐酸芬氟拉明 0.1mol/L盐酸 0.25 263, 270 盐酸苯乙双胍 0.01 234 0.60 盐酸克伦特罗 243, 296 硫酸沙丁胺醇 0.08 274 盐酸伪麻黄碱 251, 257, 263 红外特征吸收：上述药物还可采用红外吸收光谱进行鉴别。

7 鉴别试验 (identification)
与亚硝基铁氰化钠反应(Rimini试验) 重酒石酸间羟胺的脂肪伯氨基 水 亚硝基铁氰化钠试液 重酒石酸间羟胺 红紫色 溶解 丙酮数滴，碳酸氢钠少量 △ 脂肪伯氨基的专属反应 丙酮不含有甲醛

8 鉴别试验 (identification)
双缩脲反应 盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱，芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲特征反应。 例：Chp2000，鉴别盐酸麻黄碱 方法：取本品1%水溶液1ml，加硫酸铜试液2滴与20%氢氧化钠液1ml，即显蓝紫色，加乙醚1ml振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。

9 特殊杂质检查 (Detection of specific impurities)
酮体检查 生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。 紫外分光光度法检查酮体的条件及要求 药物 检查的杂质 溶剂 样品浓度(mg/ml) 测定波长(nm) A 肾上腺素 肾上腺酮 HCl(9→2000) 2.0 310 不得过0.05 盐酸去氧肾上腺素 酮体 水 不得大于0.20 重酒石酸去甲肾上腺素 去甲肾上腺酮 不得大于0.05 盐酸异丙肾上腺素 不得大于0.15 盐酸甲氧明 酮胺 1.5 347 不得大于0.06

10 特殊杂质检查 (Detection of specific impurities)
TLC法检查有关物质 例：盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇 检查方法：避光操作。取本品，加甲醇制成每1ml含20mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取上述溶液适量，加甲醇稀释成每1ml中含0.10mg的溶液，作为对照溶液。吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇－氯仿－浓氨溶液(80:5:15)为展开剂，展开后，晾干，喷以重氮苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。

11 特殊杂质检查 (Detection of specific impurities)
盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查（Chp2000版） 有关双胍 取本品1.00g ，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，照纸色谱法（附录Ⅴ A）试验，精密吸取上述溶液0.2ml ，分别点于两张色谱滤纸条(7.5cm ×50cm) 上，并以甲醇作空白点于另一色谱滤纸条，样点直径均为0.5 ～1cm ；照下行法，将上述色谱滤纸条同置展开室内，以醋酸乙酯－乙醇－水(6:3:1) 为展开剂，展开至前沿距下端约7cm 处，取出，晾干，用显色剂（取10％铁氰化钾溶液1ml ，加10％ 亚硝基铁氰化钠溶液与10％氢氧化钠溶液各1ml ，摇匀，放置15min，加水10ml与丙酮 12ml，混匀）喷其中一张点样纸条（有关双胍显红色带，Rf值约为0.1 ），参照此色谱带，在另一张点样及空白纸条上，剪取其相应部分并向外延伸1cm ，并分剪成碎条，精 密吸取甲醇各20ml分别进行萃取后，照分光光度法（附录Ⅳ A），在232nm 的波长处测定吸收度，不得过0.48。

12 含量测定 (Assay) 原 料：非水溶液滴定法、溴量法 制 剂： 比色法 提取容量法 高效液相色谱法 紫外分光光度法

13 含量测定 (Assay) 冰醋酸为溶剂 1、非水溶液滴定法－弱碱性 醋酸汞消除氢卤酸的干扰
结晶紫为指示剂 （盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲醇，也可电位法指示终点） 若碱性较弱则加醋酐使突跃明显 例：重酒石酸去甲肾上腺素－－直接滴定 盐酸克伦特罗－－加醋酸汞消除氢卤酸干扰； 由于碱性较弱，电位法指示终点 硫酸沙丁胺醇－－加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指示剂 注：加入醋酐注意防止氨基被乙酰化，所以在冰醋酸溶解样品后应放冷后再加醋酐。

14 含量测定 (Assay) 2、溴量法 基本原理：
测定方法：取本品约0.1g，精密称定，置碘瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴 滴定液(0.1mol/L)50ml，再加盐酸5ml,立即密塞，放置15分钟并时时振摇，注意微开瓶 塞，加碘化钾试液10ml ，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至 近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每 1ml溴滴定液(0.1mol/L)相当于3.395mg 的C9H13NO2·HCl。

15 含量测定 (Assay) 3、比色法 测定原理：
注意：由于偶合剂（N-(1-萘基)-乙二胺）与亚硝酸也能显色干扰测定，所以在重氮化后，应加入氨基磺酸铵分解剩余的亚硝酸。

16 比色法含量测定 例：盐酸克伦特罗栓（Chp2005）
【含量测定】 对照品溶液的制备 精密称取盐酸克仑特罗对照品适量，加盐酸溶液 (9→100)制成每1ml 中含7.2μg的溶液。 供试品溶液的制备 取本品20粒，精密称定，切成小片，精密称取适量（约相当于 盐酸克仑特罗0.36mg），置分液漏斗中，加温热的氯仿20ml使溶解，用盐酸溶液(9→ 100)振摇提取3 次(20ml、15ml、10ml) ，分取酸提取液，置50ml量瓶中，用盐酸溶液(9→ 100)稀释至刻度，摇匀，滤过，收集续滤液，即得。 测定法 精密量取对照品溶液与供试品溶液各15ml，分置25ml量瓶中，各加盐酸溶 液(9→100)5ml 与0.1 ％亚硝酸钠溶液1ml ，摇匀，放置3 分钟，各加0.5 ％氨基磺酸 铵溶液1ml ，混匀，时时振摇10分钟，再各加0.1 ％盐酸萘乙二胺溶液1ml,混匀，放置 10分钟，用盐酸溶液(9→100)稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录Ⅳ B），在 500 nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。

17 含量测定 (Assay) 4、提取酸碱滴定法 原理：溶解性－盐酸盐或硫酸盐可溶于水，游离碱不溶于水，溶于有机溶剂。 方法：供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药物游离，用适当的有机溶剂提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定（或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定）。 例：硫酸苯丙胺→加水溶解→加氢氧化钠试液8ml →加氯化钠使饱和→乙醚多次提取→合并乙醚液→精密加硫酸滴定液（0.05mol/L）25ml振摇→低温蒸去乙醚→放冷至室温→加甲基红指示液2滴→用氢氧化钠（0.1mol/L）滴定。每1ml硫酸滴定液（0.05mol/L）相当于18.42mg的C18H26N2·H2SO4。

18 含量测定 (Assay) 5、荧光分光光度法 本法还可用于测定微量儿茶酚胺类药物。
基本原理：肾上腺素含有的邻苯二酚结构，被弱氧化剂氧化， 生成肾上腺素红，发生转位为N-甲基-3,5,6-三羟基吲哚 （THI）。(Tri- Hydroxyl- Indole-) 本法还可用于测定微量儿茶酚胺类药物。

19 含量测定 (Assay) 6、高效液相色谱法 例1：重酒石酸去甲肾上腺素注射液分析
高效分离，高灵敏度和高选择性－可用于制剂常规分析，临床药物监测和体内药物动力学研究。 例1：重酒石酸去甲肾上腺素注射液分析 色谱条件：色谱柱：ODS 流动相：0.14%庚烷基磺酸钠溶液－甲醇(65:35)，用磷酸调pH至3.0±0.1，流速：1.0ml/min 检测波长：280nm 测定方法：精密量取本品适量（约相当于重酒石酸去甲肾上腺素4mg），置25ml量瓶中， 加醋酸溶液（1→25）稀释至刻度，摇匀，取2μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取重酒石 酸去甲肾腺素对照品适量，精密称定，加醋酸溶液（1→25）制成每1ml中含0.16mg的溶液， 同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。

20 含量测定 (Assay) 6、高效液相色谱法 例1：HPLC-EChD法测定血浆中儿茶酚胺类药物 色谱条件：色谱柱：ODS型键合相
流动相：离子对试剂 检测器：电化学检测器 供试品溶液的制备：氧化铝吸附－洗脱

21 含量测定 (Assay) 7、衍生化气相色谱法 例：盐酸芬氟拉明 (fenfluramine hydrochloride)
由于结构中的仲胺基极性极强，使得气相色谱法测定值波动较大，因此将样品溶解后经碱化乙酸乙酯提取，加入内标，提取液用三氟乙酸酐进行酰化衍生化，将衍生化产物在5%SE-30的色谱柱上分析，用FID检测器检测。

22 第三节 芳氧丙醇胺类药物 典型药物： 氧烯洛尔 (Oxprenolol, 别名烯丙氧心胺，心得平，Tracosal, Trasacor, Trasieor ) －β肾上腺素受体阻滞药 盐酸卡替洛尔 (Carteolol hydrochloride) －β受体阻滞药

23 鉴别反应 (identification)
紫外吸收峰特征 氧烯洛尔水溶液 (40μg/ml): 在275nm 的波长处有最大吸收。 盐酸卡替洛尔 (8μg/ml): 在215nm 与252nm的波长处有最大吸收。 化学鉴别 氧烯洛尔：取本品0.1g，加乙醇2ml溶解后，滴加0.1mol/L高锰酸钾溶液1ml，振 摇数分钟，高锰酸钾颜色消褪，并产生棕色沉淀。 盐酸卡替洛尔：取本品约0.1g，加水5ml使溶解，加硫氰酸铬铵试液5滴，即生成淡红色沉淀。

24 盐酸卡替洛尔的有关物质检查 TLC法，自身对照法
检查方法：取本品0.20g，加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液；精密量取2ml，置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照薄层色谱法 (附录Ⅴ B)试验，吸取上述两种溶液备10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨溶液 (50:20:1)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的 主斑点比较，不得更深。

25 含量测定 盐酸卡替洛尔原料 取本品约0.5g，精密称定，加冰醋酸30ml，在水浴上加热溶解，放冷，加醋酐70ml，照电位 滴定法(附录Ⅶ A)，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定 液(0.1mol/L)相当于32.88mg的C16H24N2O3·HCl。

26 含量测定 盐酸卡替洛尔滴眼液 精密量取本品适量，用水定量稀释制成每1ml中约含盐酸卡替洛尔16μg的溶液，照分光光度法(附录Ⅳ A)，在252nm的波长处测定吸收度；另取盐酸卡替洛尔对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含盐酸卡替洛尔16μg的溶液，同法测定，计算，即得。

27 含量测定 人血浆中氧烯洛尔及其异构体的分析 色谱条件：预柱：ODS填料，分析柱：手性OD-R柱（手性选择剂为3,5-二甲苯氨基甲酸酯纤维素）
流动相：NaClO4(0.45mol/L)-乙腈(70:30)的磷酸盐缓冲溶液(pH6.0) 检测波长：273nm 血浆处理方法：醋酸纤维膜透析→用预柱纯化、富集→手性柱分离分析。

28 Thank You !