药理实验动物的 基本操作 机能教学中心.

Presentation on theme: "药理实验动物的 基本操作 机能教学中心."— Presentation transcript:

1 药理实验动物的 基本操作 机能教学中心

2 实验前需要说明事宜: 1. 实验教学安排 ☆ 实验：共6个；包括： ＊ 动物实验的基本操作； ＊ 有机磷酸酯类药物的中毒及解救；
＊ 药物血浆浓度半衰期测定； ＊ 药物对动物血压的影响； ＊ 处方学与实验设计； ＊ 利多卡因对氯化钡诱发心律失常的 治疗作用。

3 实验前需要说明事宜: 1. 实验教学安排 ☆ 实验：共3个；包括： ＊ 药理学实验技术基础； ＊ 钙镁对抗实验、抗凝血实验；
＊ 有机磷酸酯类农药中毒及解救。

4 实验前需要说明事宜: 1. 实验教学安排 ☆ 实验：共4个；包括： ＊ 药理学实验技术基础；
＊ 利多卡因对氯化钡诱发心律失常的预防作用、抗凝血实验； ＊ 有机磷酸酯类农药中毒及解救、钙镁对抗实验； ＊ 药物对动物血压的影响。

5 实验前需要说明事宜: 2. 实验纪律 ☆ 不得在实验室大声喧哗; ☆ 不得在实验室做与实验无关的事； ☆ 必须穿实验服进入实验室；
☆ 不得将实验废物废液倒入水池; ☆ 不得将实验仪器或试剂带出实验室； ☆ 实验结束后，每组同学都要认真整理实验台面和就近使用水池的卫生。此项工作作为实验平时成绩评定的内容之一。 ☆ 迟到、早退、旷课要扣分，迟到早退每次0.5分，旷课每次1分。

6 实验前需要说明事宜: 3. 实验仪器和试剂的使用
清点配套器材完整无误后，要求各组同学保管好自己的实验仪器，及时清洗、收放、清点，在使用过程中因各种原因造成损毁的，由分管同学负责赔偿。

7 实验前需要说明事宜: 4. 实验分组（共分6组） 5. 值日 分组一旦形成，整个学期固定，中途不准私自重新组合或调换实验位置。
☆ 公共仪器、试剂的整理； ☆ 实验室地面卫生、水电门窗等； ☆ 有个别同学自己的实验台面没有整理或整理马虎值日生负责给予补充整理。 ☆ 必须最后离开实验室，必须经过老师检查、同意以后才能离开实验室。

8 实验前需要说明事宜: 6. 实验报告书写 ☆ 每一大组写一份实验报告: ＊ 实验目的 ＊ 实验原理 ＊ 实验试剂与器材 ＊ 实验步骤
＊ 实验结果 ＊ 实验讨论 ＊ 注意事项

9 实验前需要说明事宜: 7. 实验成绩（共30分） 平时成绩10分（实验纪律、出勤、值日、操作）; 实验报告20分。

10 一、实验目的 1. 掌握实验动物的基本概念和特点，熟悉常用实验动物的生物学特性和实验常用手术器械； 2. 初步掌握药理学实验常见的基本操作。

11 二、实验动物与实验用动物 实验动物是根据科学研究的需要，定向培育而成的，供科学实验需要的对象和材料。它必须有明确的生物学特征和清楚的遗传背景，并经微生物控制和特定环境下驯化培育。 实验用动物通常指用于实验的各种动物，它包括实验动物、家禽（畜）和野生动物。其中一些实验动物可能出于某些受试动物敏感性或操作技术上的需要，但现阶段尚不可能完全达到实验动物的实验要求。

12 三、实验对象 小白鼠 成年家兔（1.8-2.5kg） ·哺乳纲、啮齿目、鼠科 ·繁殖周期短 ·适宜做大批动物实验 ·哺乳纲、啮齿目、兔科
·耳缘静脉表浅，静脉注射部位 ·止血药物研究 小白鼠 成年家兔（ kg）

13 三、实验对象 猩猩、猕猴 狗、猫 豚鼠 青蛙、蟾蜍 小鼠、大鼠、家兔 ·灵长类 ·最接近人类 ·毒理、营养、行为研究
·哺乳纲、食肉目、犬科； ·循环、神经系统复杂发达， 消化系统与人相似； ·血压调节、休克、酸碱平 衡研究 ·哺乳纲、食肉目、猫科 ·血压稳定、神经系统复杂 ·心血管、镇咳药物、反射研究 猩猩、猕猴 狗、猫 豚鼠 青蛙、蟾蜍 小鼠、大鼠、家兔 ·哺乳纲、啮齿目、豚鼠科 ·性格温和，对组胺、结核菌敏感 ·抗组胺、抗结核菌药物研究 ·两栖纲，无尾目 ·离体组织器官生存条件要求低 ·离体实验 ·哺乳纲、啮齿目、鼠科 ·实验模型稳定，价格合理 ·踝关节抗炎药物研究

14 四、实验器材和药品 器材： 哺乳类动物手术器械一套、动脉夹、 气管插管、动脉插管、注射器、小鼠灌胃器等； 药品： 20%乌拉坦、生理盐水

15 五、实验步骤 小白鼠 （一）抓取 （二）腹腔注射 （三）灌胃 （四）处死

16 （一）小鼠的捉拿方法： 右手提起鼠尾，放在鼠笼上，向右上方轻拉鼠尾，这时小鼠前肢紧紧抓住粗糙面。迅速用左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤，并用小指和手掌尺侧夹持尾根部将小鼠固定于手中。大鼠捉拿方法与小鼠相似。

17 （二）小鼠腹腔注射法： 部位：左或右侧下腹部
方法：将针头刺入皮下，沿皮下向前推进3～5 mm，然后使针头与皮肤呈45°方向穿入腹腔。针尖进入腹部有抵抗消失感，此时可轻推药物。

18 （三）小鼠灌胃法： 固定：口部朝上，颈部宜拉直，但不宜过紧，以免窒息。
方法：右手持连有胃管的注射器，小心自口角插入口腔内，将灌胃针自舌背面沿上颚轻轻进入食道。灌时如很顺畅，则表示针头进入胃内；如动物呕吐或者强烈挣扎，必须拔出后按上述方法重新操作。进针不顺不可强进入。

19 （四）小白鼠处死方法： 颈椎脱臼法：左手拇指和食指按住头部，右手用力向后拉尾巴,使脊髓与延髓脱臼，动物立即死亡。

20 五、实验步骤 家兔 （一）操作准备 （二）颈部手术操作 （三）处死

21 （一）操作准备： 抓取 称重 麻醉 固定 备皮

22 （一）操作准备： 右手抓住其颈部皮 肤轻轻提起，左手 迅速托拄其臀部 抓取 称重 麻醉 固定 备皮

23 （一）操作准备： 抓取 称重 麻醉 固定 备皮

24 （一）操作准备： 抓取 称重 麻醉 固定 备皮 20%乌拉坦 麻醉速度、剂量 5ml/kg 检查深浅反射 耳缘静脉麻醉
耳缘静脉位于耳背面外侧缘，拔去兔毛，用手轻弹或用 水湿润局部，使静脉血管充盈、扩张，便于穿刺进针。 左手拇指和无名指固定兔耳远端，食指和中指捏住近心 端，右手持注射器，以15º～20º角刺入血管（尽量从远 心端开始），当回抽有血或阻力小时，可推进注射器。 （一）操作准备： 抓取 称重 麻醉 固定 备皮 20%乌拉坦 5ml/kg 耳缘静脉麻醉 麻醉速度、剂量 检查深浅反射

25 角膜反射 夹肢反射

26 （一）操作准备： 抓取 称重 麻醉 固定 备皮 四肢夹于兔台四个兔夹上， 细线挂其门牙固定头部

27 （一）操作准备： 抓取 称重 麻醉 固定 备皮 粗剪刀压着皮肤，逆毛发生长放 向剪，兔毛放置于盛水的兔毛缸 内，剪毛区要大于手术区。

28 （二）颈部手术操作： 分离 组织 与肌肉 分离 气管 并插管 分离颈总动脉并插管 切开 皮肤 上起甲状软骨，下达 胸骨上缘，用剪刀切
开皮肤约6～7cm长

29 （二）颈部手术操作： 分离 组织 与肌肉 分离 气管 并插管 分离颈总动脉并插管 切开 皮肤 切开皮下，钝性分离 肌肉，注意避开血管，
以免造成大出血。

30 （二）颈部手术操作： 分离 组织 与肌肉 分离 气管 并插管 分离颈总动脉并插管 切开 皮肤 气管充分暴露后，穿线备用；在甲状软骨下第3、4
环状软骨之间做一横形切口（1/3-1/2气管周长）， 再向上做一纵形切口，使成倒“T”字形。 （二）颈部手术操作： 分离 组织 与肌肉 分离 气管 并插管 分离颈总动脉并插管 切开 皮肤 气管插管斜面向下，从切口处向肺脏方向 插入，用棉线结扎固定，并用线的残端扎 于气管插管分叉处，以防脱落。

31

32 气管插管

33 （二）颈部手术操作： 分离 组织 与肌肉 分离 气管 并插管 分离颈总动脉并插管 切开 皮肤 左手食指及拇指捏住切口一侧
皮肤，其余三指用力向上顶， 在气管两侧暴露血管神经鞘。 （二）颈部手术操作： a.分离足够长的颈总动脉（2－3cm）， 穿两根线备用。 b.全身血液肝素化：0.3％肝素1ml/kg。 c.结扎远心端，尽量靠头端。 d.用动脉夹夹闭近心端，尽量靠心脏端 （结扎线距动脉夹应有2cm）。 e.用眼科剪在尽可能靠近结扎线处，剪 1/3-1/2血管周长的切口。 f.将充满抗凝剂的动脉插管插向心脏， 在血管上结扎插管，并用线的残端结 扎血管外动脉插管。 g.松开动脉夹，可以放血或做其他操作。 分离 组织 与肌肉 分离 气管 并插管 分离颈总动脉并插管 切开 皮肤

34 （三）家兔处死方法： 耳缘静脉注射空气（20-40ml） 夹闭气管

35 六、注意事项 家兔耳缘静脉注射麻醉时，穿刺手法要正确；推注药物时注意检查深浅反射。 气管插管、动静脉插管结扎固定时注意二次固定。
小鼠灌胃进针时注意不要太用力。 小鼠腹腔注射时注意不要太用力。 小白鼠操作时应注意安全。

36 珍惜每一天， 从现在开始！ 再见