高危型HPV —临床应用、最新进展、相关检验

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1 高危型HPV —临床应用、最新进展、相关检验
安宏亮

2 目录 1. 简要概述 2. 临床应用 3. 最新进展 4. 相关检验

3 1. 简要概述 HPV: 人乳头瘤状病毒 human papillomavirus 乳多孔病毒科，多瘤病毒亚科 DNA病毒，8000个碱基对
嗜黏膜和皮肤上皮 E6 、E7 癌蛋白，P53 、Rb抑癌蛋白 生物分型：根据DNA的同源性分 130种 临床分型：致病性的不同 宫颈上皮内瘤样变 高危型 high risk, HR 低危型 low risk, LR 生殖道的尖锐湿疣

4 简要概述 分型 70 30 13 11 与人类致病相关 生殖道感染：低危+高危 最常见、研究最多的高危型 13+3
简要概述 分型 与人类致病相关 70 生殖道感染：低危+高危 30 最常见、研究最多的高危型 13+3 / 13 低危型 11 MM4.MM8.MM9 11

5 1. 简要概述 分型 HPV18 14% HPV16 50% 64% 77% Others HPV 23% HPV13 5%
1. 简要概述 分型 HPV18 14% HPV16 50% 64% % Others HPV 23% HPV13 5% HPV45 8%

6 1. 简要概述 致病性 HPV感染 生殖器- 粘膜型 CIN CA 疣状表皮发育不良型 疣 非生殖器- 粘膜型 喉 乳头瘤

7 HR-HPV的持续感染是宫颈癌的首要致病因素
乳腺癌 宫颈癌 2000年： 47.1万新发病例/全世界，13.15万新发病例/中国 HR-HPV的持续感染是宫颈癌的首要致病因素 “没有HR-HPV感染，就不会有宫颈癌” 通过筛查HR-HPV，筛查宫颈癌

8 2. 临床应用 宫颈癌与HPV HR HPV持续感染 遗传因素 宫颈癌 其他因素 免疫因素 环境因素 行为因素

9 2. 临床应用 宫颈癌的发病过程 93.1%（27/29） 78.7%（37/47） 53.7%（66/123） 什么是CIN？
2. 临床应用 宫颈癌的发病过程 10~15年 互相转化 自然清除—持续感染 HR HPV感染 宫颈癌 CIN-III CIN-II CIN-I 93.1%（27/29） 78.7%（37/47） 53.7%（66/123） 什么是CIN？ Cervical intraepithelial neoplasia 宫颈上皮内瘤样变 32.3%（223/693） 正常宫颈上皮细胞

10 制定”宫颈癌及癌前病变”的筛查、诊治方案
2. 临床应用 方案 制定”宫颈癌及癌前病变”的筛查、诊治方案 筛查宫颈癌前癌前病变CIN 指导CIN的处理原则： 首诊 Leep疗效的评估 预后、转归 指导未明确诊断意义的病理结果： 指导意义不明的基底细胞异常BAUS的处理 不典型鳞状上皮细胞增生ASCUS 不典型腺状上皮细胞增生AGUS 优生优育

11 3. 最新研究进展 HPV 疫苗的研制和应用 自然清除与持续感染 妊娠与HPV感染 男性HR-HPV感染

12 预防性疫苗 L1 L2蛋白 治疗性疫苗 E6 E7蛋白 3. 最新研究进展 HPV 疫苗 HPV病毒样颗粒 (VLP)
2006年 Merck公司 HPV16 /6 /11 /18四价疫苗和 GSK公司的 HPV16 /18二价疫苗 短暂及持续感染的疗效达到 93% 治疗性疫苗 E6 E7蛋白 基因重组疫苗

13 载体表达系统的研究 3. 最新研究进展 HPV 疫苗 选择适宜的载体表达系统： 理想的载体： 应用较多的是： 研制 HPV疫苗的重要环节；
影响表达水平及蛋白活性的关键步骤。 理想的载体： 应具有稳定的无毒表型,不与宿主染色体发生整合； 能有效表达具有免疫原性的外源基因序列； 接种后不会在宿主体内长期留存的特点； 应用较多的是： 酵母菌、昆虫细胞、哺乳动物细胞表达系统。

14 3. 最新研究进展 HPV 疫苗 亟待解决的问题 技术和价格： 80%的宫颈癌发生在发展中国家和较贫困地区； 全效：治疗和预防 高效、广谱：
每年全球大约有 47万例新发宫颈癌病例； 到目前为止尚无逆转已经发生的感染和已经存在的病灶得以消除的有效办法。 高效、广谱： 致病的 HPV种类很多，目前已分离出高危型 HPV三十多种； HPV的种属特异性，因此目前已有的无论是二价还是四价疫苗都不能抵挡所有型别的 HPV感染； 有研究表明 L2可以诱导交叉性中和抗体的产生。 合理评估其价值：从感染HR HPV到宫颈癌需要十余年

15 3. 最新研究进展 生物感染状态 如何判断“持续感染”与“一过性感染” HR-HPV的持续感染是宫颈癌发生的必要条件；
3. 最新研究进展 生物感染状态 如何判断“持续感染”与“一过性感染” HR-HPV的持续感染是宫颈癌发生的必要条件； 目前，HPV检测已被广泛应用于宫颈癌高危人群的筛查； 高HPV感染率，低持续感染率 2002年，山西襄垣县的调查研究：32~50岁妇女，HR-HPV感染率27．5； 全球范围内的一项统计：宫颈细胞学筛查正常，HPV感染率高达10．4％，但仅少数感染持续存在； 过度检测，过度干预？ 单次检测HPV阳性者发生宫颈癌的风险较小； 缺乏对HPV感染自然过程的完整认识，多数女性对HPV感染似乎过于焦虑，临床上也存在对HPV感染的过度干预； 增加了宫颈癌筛查的经济消耗， 正确区分，制定合理的应用方案和个体诊疗方案。

16 HR-HPV持续感染与自然清除的相关因素
3. 最新研究进展 生物感染状态 HR-HPV持续感染与自然清除的相关因素 亚型 kulmala的研究 高危与低危 16(18.1M). 31(16.2) (12.4) 基因变异与整合 16 病毒负荷量 多重感染 多重 > 单一 宿主因素 孕产史 经产 < 未产 妊娠期 年龄 负相关 免疫因素 行为因素 ，生活方式：吸烟、避孕工具、性行为等

17 3. 最新研究进展 妊娠与HPV 妊娠与HR-HPV感染 妊娠期HPV感染率明显高于非妊娠期，但妊娠期后的感染率无明显差别。
Lu等研究：妊娠期妇女感染高危型HPV最多，其次是高危低危病毒混合感染； 52型(31.2％)、16型(15.1％)、39型(11.8％)、53型(10.8％)、18型和58型(均为9.7％)； 多种类型的混合感染占到此次研究人群的43.0％； 国内的研究：妊娠期妇女以感染高危型HPV病毒居多，主要类型为HPVl6、18型； Nobbenhuis等研究：妊娠妇女早、中、晚及产后感染率分别为（50／44／45／31）%； 妊娠期HPV病毒含量高于非妊娠期，低于宫颈癌病例。

18 妊娠期（非典型）宫颈上皮内瘤样变的比率明显高于非妊娠期。 因素：
3. 最新研究进展 妊娠与HPV 妊娠期（非典型）宫颈上皮内瘤样变的比率明显高于非妊娠期。 因素： 妊娠期处于免疫“抑制状态” 妊娠激素的变化 E2 HPV感染对妊娠及胎儿、婴幼儿的影响 母婴垂直传播，血液经胎盘、羊水等感染胎儿； 新生儿肛门及生殖器部位的先天性尖锐湿疣； 婴儿期的喉乳头状瘤等。 妊娠期感染HPV的处理

19 3. 最新研究进展 男性与HPV HPV的主要传播方式： 直接接触 性播 男性感染／携带 寄居部位 如何取材 如何检测

20 4. HPV的相关检验 检验方法 核酸扩增：如PCR等 基因芯片 理论上先进，发展的方向 杂交法：多种，分型 部分分型 灵敏度高 基因分型
特异性有待验证 基因芯片 理论上先进，发展的方向 杂交法：多种，分型 部分分型 HC-II （Hybrid capture） 目前国内外应用最广的方法 特异性好：500个碱基对的RNA探针 应用广，结果可以比对 灵敏度低 pg / ml 不能分型

21 HC-II试验操作的注意事项 4. HPV的相关检验 HC-II 一般酶免试验的注意事项 特殊的方面：
注意颜色的变化 无色 蓝色 黄色 红色 绿色 棕褐色 孵育后，揭开膜要迅速，以防冷凝和污染； 冲洗不可过度——临界值结果增多 判断被污染的可能

22 HC-II试验不成功，但又不完全失败的处理
4. HPV的相关检验 HC-II HC-II试验不成功，但又不完全失败的处理 NCX3 <90 60~90 / PCX3 > ~ <PC/NC<15 CV 15% 25% QC 2~8 4 0.08 HC-II试验结果的解释 报告的是RLU/CO值，不是绝对定量g／mL 临界值0.8～ % 40% 结果的高低，不表示病情的轻重 筛查HR-HPV，是为了筛查高危人群，提示必须做进一步的检查（病理），后期要加强监控 结合临床，具体分析

23 Thank You !