动物源性细菌 病原生物学教研室.

Presentation on theme: "动物源性细菌 病原生物学教研室."— Presentation transcript:

1 动物源性细菌 病原生物学教研室

2 布鲁斯菌属(Brucella) 简称布氏菌属，是一类G-短小杆菌。 本菌属有4个生物种、13个血清型，对人致病的有牛布鲁斯菌、羊布鲁斯菌、猪布鲁斯菌和犬布鲁斯菌，在我国流行占绝对优势的是羊布鲁斯菌病，其次为牛布鲁斯菌。

3 生物学性状 形态与染色 抗醇染色性对布鲁斯菌有特殊鉴别意义： 布鲁斯菌呈兰色，背景及非抗醇菌呈红色。

4 生物学性状 培养特性 需氧菌，牛布鲁斯菌在初次分离时需5%～10%CO2。
双相肝浸液培养基----37℃，48h可长出微小、透明、无色的光滑菌落。

5 生物学性状 生化反应 主要布鲁斯菌的特性与鉴别 菌种 CO2 需要 脲酶试验 H2S 产生 含染料培养基中生长 凝集试验
含染料培养基中生长 凝集试验 复红（1：50000） 硫堇（1：20000） 抗A 因子 抗M 牛布鲁斯菌 ＋ － 羊布鲁斯菌 不定 猪布鲁斯菌 ＋/－

6 生物学性状 抵抗力 本菌抵抗力较强。在土壤、皮毛、肉和乳制品及水中可生存数周至数月。
但在湿热60℃10min死亡；直射日光下10～20min死亡；3％来苏儿中数分钟死亡。 对常用的抗生素也较敏感。

7 生物学性状 含有二种抗原物质： M(melitensis)抗原（羊布鲁斯菌菌体抗原）； A(abortus)抗原（牛布鲁斯菌菌体抗原）。
  抗原构造与分型 含有二种抗原物质： M(melitensis)抗原（羊布鲁斯菌菌体抗原）； A(abortus)抗原（牛布鲁斯菌菌体抗原）。 羊布鲁斯菌 M：A是20：1； 牛布鲁斯菌 M：A是1：20； 猪布鲁斯菌 M：A是1：2。 本菌还含有L表面抗原，与沙门菌Vi抗原相似。

8 致病性与免疫性 致病物质 内毒素是主要致病物质。 透明质酸酶、荚膜等也具有较强的侵袭力。 布鲁斯菌引起的迟发型超敏反应与致病性有关。

9 致病性与免疫性 所致疾病 牛、羊、猪是本菌的主要自然宿主，感染后可引起母畜流产。
人类对布鲁斯菌易感，细菌可通过消化道和呼吸道粘膜、皮肤及眼结膜等途径传染于人，引起布鲁斯菌病。反复呈波浪式热型，故临床上称为波浪热。

10 致病性与免疫性 免疫性 病后产生的抗体主要是IgG和IgM，有调理作用。
一般认为布鲁斯菌感染后形成的免疫是有菌免疫。最终变为无菌免疫。 病后产生的抗体主要是IgG和IgM，有调理作用。 布鲁斯菌以细胞免疫为主。感染后可引起Ⅲ、IV型超敏反应。病程中免疫保护和病理损害往往交织存在。

11 微生物学检查法 病原菌分离 血清学诊断 皮肤试验
即布鲁菌素皮肤超敏反应试验（brucellin skin test）。 皮试阳性可诊断慢性或曾患过布鲁菌病。

12 微生物学检查法 血清学诊断 凝集反应 抗人球蛋白试验（即Coomb’s test） CF：
定量凝集反应：一般血清效价1：160～1：320为阳性诊断 标准。 抗人球蛋白试验（即Coomb’s test） 一般用于血清凝集试验阴性、却有明显布鲁菌病症状的病 例。比凝集反应更灵敏，阳性出现早，消失晚。 CF： CF主要是测定IgG型抗体，出现较晚，一般以1：10为阳性。

13 防治原则 预防措施主要是控制和消灭牲畜布鲁菌病，切断传播途径和对疫区人畜接种减毒活菌苗，有效期约一年。
急性病人用抗生素治疗，慢性患者可用特异性菌苗脱敏治疗。

14 芽胞杆菌属（Bacillus） 芽胞杆菌属是一大群具有芽胞的革兰阳性杆菌，其共同特点是绝大多数菌种在有氧条件下形成不大于菌体横径的芽胞，多有周鞭毛，对营养要求不高，菌体呈长链状排列，菌落为粗糙型。 本菌属包括： 炭疽芽胞杆菌（B.anthracis）： 类炭疽芽胞杆菌（B.anthracoid）：是实验室常见的污染菌，包括 蜡样芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、多粘芽胞杆菌、嗜热脂肪芽胞 杆菌等。

15 生物学性状 第一节 炭疽芽胞杆菌 形态与染色 串珠反应 炭疽芽孢杆菌×1000（荚膜 炭疽杆菌芽孢（复红、美蓝染色 ×400）

16 生物学性状 培养特性 需氧菌。 普通琼脂平板：形成大而扁平、灰白色的粗糙型菌落，低倍镜 下可见卷发状边缘。
碳酸氢钠琼脂平板：有毒株在5%CO2环境中孵育48h，由于产生 荚膜而形成粘液型菌落，用接种环挑取时 可见拉丝状。

17 生物学性状 抵抗力 芽胞对外界因素的抵抗力强：
在室温干燥环境中能存活20余年，在皮革中能生存数年。牧场一旦被污染，传染性可维持20～30年。煮沸10min，干热140℃ 3 h才能破坏芽胞。芽胞对化学消毒剂的抵抗力也很强； 对碘较敏感，1：2500碘液经10 min即可破坏芽胞。 本菌对青霉素、红霉素、氯霉素均敏感。

18 生物学性状 抗原结构 1．荚膜抗原 具有抗吞噬作用，与毒力有关。无种属特异性。
1．荚膜抗原 具有抗吞噬作用，与毒力有关。无种属特异性。 2．菌体抗原 为多糖抗原，由于耐热，此抗原在病畜皮毛或腐败脏器中虽经长时煮沸仍可与相应抗体发生沉淀反应，称为Ascoli热沉淀反应。 与其他芽胞杆菌、14型肺炎球菌多糖抗原、人类A血型物质有共同成分，能发生交叉反应。 3．芽胞抗原 由芽胞的外膜、皮质等组成的芽胞特异性抗原，具有免疫原性和血清学诊断价值。 4．炭疽毒素 由保护性抗原（PA）、致死因子（LF）和水肿因子（EF）三种蛋白质组成的复合物。炭疽毒素具有抗吞噬作用和免疫原性。其相应抗体对宿主有一定的保护作用。

19 致病性与免疫性 致病物质 荚膜 具有抗吞噬作用，有利于细菌在机体组织内繁殖与扩散。 炭疽毒素 保护性抗原（PA） 致死因子（LF）
水肿因子（EF） 毒性作用主要是直接损伤微血管的内皮细胞，使血管通透性增加，有效循环血量不足，微循环灌注量明显减少，血液呈高凝状态，易形成感染性休克和弥散性血管内凝血（DIC）

20 致病性与免疫性 所致疾病 主要通过接触病畜及其皮毛等： 皮肤炭疽：细菌由手、颈、颜面部小伤口侵入，最多见。
经12～36h局部出现水泡、脓疱，最后坏死溃疡，形成特有的 黑色焦痂，故名炭疽，轻者2～3周治愈，重者死于败血症； 肠炭疽：食入未煮熟的病畜肉类、病畜奶或污染食物引起。 出现连续性呕吐、肠麻痹及血便，以全身中毒为主，2～3d死 于毒血症； 肺炭疽：吸入含有大量病菌芽胞的尘埃可发生，又称羊毛工人病。 表现呼吸道症状，很快出现全身中毒症状。

21

22 致病性与免疫性 免疫性 免疫作用主要与抗毒素及吞噬细胞的吞噬作用增强有关。
感染炭疽（包括隐性感染和显性感染）或接种疫苗后，均可获得持久的免疫力。 免疫作用主要与抗毒素及吞噬细胞的吞噬作用增强有关。

23 微生物学检查法 直接涂片镜检：见到有荚膜的典型竹节状G+大杆菌， 结合临床症状可作出初步诊断。 分离培养 血琼脂平板和碳酸氢钠琼脂平板
分离培养 血琼脂平板和碳酸氢钠琼脂平板 标本 观察菌落特征，并做青霉素串珠试验、动物试验、 噬菌体裂解试验等鉴定。 Ascoli试验 免疫荧光法检查病人的荚膜抗体，用ELISA检查保护性抗体。

24 炭疽芽胞杆菌与其他需氧芽胞杆菌的鉴别 性状 炭疽芽胞杆菌 其他需氧芽胞杆菌 荚膜 + - 动力 溶血 不溶血或微溶血 多为迅速而明显溶血
肉汤生长 絮状沉淀，上层清晰 沉淀，均匀浑浊，有菌膜 青霉素串珠试验 噬菌体裂解试验 NaHCO2琼脂平板 粘液型菌落 粗糙型菌落 动物致病力试验

25 防治原则 预防人类炭疽病的关键是加强家畜的管理及其炭疽病的防治，对易感家畜进行预防接种。病畜应严格隔离或处死深埋。死畜严禁剥皮或煮食，必须焚毁或深埋于2m以下并加大量石灰。对可疑污染的动物皮毛、用具等必须彻底消毒处理。 对易感者，主要是牧民、屠宰牲畜人员、兽医、制革工人等应进行特异性预防，用炭疽减毒活疫苗或炭疽纯化菌苗，皮上划痕、皮下注射或气溶胶吸入接种，一般接种后半月产生免疫力，可维持1年。 治疗炭疽病以青霉素为首选，四环素、氯霉素、强力霉素、磺胺药物等也有效。也可采用抗生素、磺胺药物及抗炭疽血清的综合疗法。

26 第二节 蜡样芽胞杆菌 本菌对红霉素、氯霉素和庆大霉素敏感，对青霉素、磺胺类耐药。
第二节 蜡样芽胞杆菌 蜡样芽胞杆菌广泛分布于土壤、污水、尘埃中，对人类是条件致病菌，常因污染水、淀粉制品、奶制品等食物而引起食物中毒。只有食物中含菌量达到106/g时才能致病。致病物质主要是肠毒素 。 本菌对红霉素、氯霉素和庆大霉素敏感，对青霉素、磺胺类耐药。

27 耶尔森菌属（Yersinia） 鼠疫耶氏菌---- 鼠疫 小肠结肠炎耶氏菌----人类严重小肠结肠炎。
属于肠杆菌科，有11个菌种，该属细菌通常引起啮齿动物、家畜和鸟类等动物感染，人类通过接触动物、被节肢动物叮咬或食入被污染食物等途径感染。 鼠疫耶氏菌---- 鼠疫 小肠结肠炎耶氏菌----人类严重小肠结肠炎。 假结核耶氏菌----食用患病动物污染的食物而感染,多为 胃肠炎、肠系膜淋巴结肉芽肿、回肠末端炎等。

28 鼠疫耶尔森菌（Y. pestis） 俗称鼠疫杆菌，是鼠疫的病原菌。
鼠疫是在野生啮齿类动物间传播的一种烈性传染病，历史上曾发生过三次世界性大流行。通过鼠蚤叮咬而传染人，引起严重疾病，死亡率极高。

29 生物学性状 形态与染色

30 生物学性状 培养特性 营养要求不高： 固体培养基：形成无色透明、中央厚而致密、周 围菲薄而不整齐边缘的细小菌落。
肉汤培养基：“钟乳石”状发育，此特征具有鉴别 意义。

31 生物学性状 抗原构造 1．F1抗原 荚膜抗原，具有抗吞噬作用； 刺激机体产生抗体（保护性抗体） 2．V和W抗原 同一质粒编码。
与毒力有关，能抑制吞噬细胞的吞噬作用。 3．外膜蛋白 与V-W基因在同一质粒上； 这些蛋白能使细菌突破机体的防御机制。 4. 鼠毒素 是一种外毒素，为蛋白质，具有抗原性。 1µg即可使鼠致死，可引起局部坏死和毒血症。 但对人的损伤作用不清楚。

32

33 抵抗力 对理化因素抵抗力较弱。湿热70～80℃10 min或100℃1 min可杀死该菌。在干燥痰中可存活3～7d，在蚤粪和土壤中能存活半年至1年以上。5%来苏、0.1%0.2%升汞在20 min内可将痰液中病菌杀死。

34 致病性与免疫性 致病物质 毒力强，几个细菌即可使人致病，其致病作用与F1抗原、V抗原的抗吞噬作用以及鼠毒素和内毒素的毒性作用有关。

35 致病性与免疫性 所致疾病 鼠疫是自然疫源性传染病。 传播方式：鼠 鼠蚤 鼠。 临床类型： 腺鼠疫：剧烈的出血坏死性淋巴结炎，多在腹股沟。
传播方式：鼠 鼠蚤 鼠。 临床类型： 腺鼠疫：剧烈的出血坏死性淋巴结炎，多在腹股沟。 肺鼠疫：吸入染菌尘埃，易暴发流行，死亡率高。 败血症型鼠疫：（原发性/继发性）最严重，死亡率可高达100%。 死者皮肤常呈黑紫色，故有“黑死病”之称。 呼吸道/人蚤 人 人

36

37 致病性与免疫性 鼠疫病后能获得持久免疫力，很少再感染。 体液免疫：针对F1 抗原、V-W抗原的抗体，具有调 理吞噬、凝集细菌和杀菌作用；
细胞免疫：由于鼠疫耶尔森菌主要在吞噬细胞内繁 殖，因此抗感染能力依赖于细胞免疫和 吞噬细胞对病菌的消灭。

38 微生物学检查法 鼠疫是烈性传染病，传染性极强，因此须在指定的具有严密防护措施的实验室并严格按照操作规程进行。
直接涂片镜检：革兰染色、美蓝染色，观察形态和染色 特性。 分离培养 血琼脂平板 可疑菌落 标本 作涂片染色、噬菌体裂解试验、血清凝集试验等进 一步鉴定。 免疫荧光试验用于快速诊断。

39 防治原则 鼠疫菌苗有活菌苗、死菌苗和化学菌苗三类。接种途径有皮下、皮内、皮上和气雾等，一般在接种后10～15 d产生免疫力，维持约1年。
灭鼠灭蚤是切断鼠疫传播环节、消灭鼠疫的根本措施。 鼠疫菌苗有活菌苗、死菌苗和化学菌苗三类。接种途径有皮下、皮内、皮上和气雾等，一般在接种后10～15 d产生免疫力，维持约1年。 此外，应加强国境、海关检疫。 　治疗目前采用磺胺、氯霉素、氨基糖苷类抗生素单独或联合应用，疗效均佳。抗鼠疫血清也有一定疗效。