Retrovirus.

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1 Retrovirus

2 RNA肿瘤病毒亚科 Retrovirus 含有逆转酶的RNA病毒 慢病毒亚科 泡沫病毒亚科

3 逆转录病毒科特点 球形，100-140nm，有包膜，包膜外有刺突
病毒核心为二条相同+ssRNA，由5‘端部分碱基互补成二倍体。9-10 KB。与内层衣壳构成电子致密的中央类核，呈圆形或圆柱形，即C型或D型病毒颗粒 基因组相似，含有序列和功能相似的gag、pol、env三个结构基因和多个调节基因 病毒体含逆转录酶，核酸内切酶和RNA酶H 病毒增殖: 在逆转录酶作用下先合成cDNA，整合到染色体形成前病毒（Provirus） 通过血液途径、性途径和垂直传播

4 人类免疫缺病毒 Human Immunodeficiency Virus, HIV

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6 发现历史 1981年6月美国CDC首次报道了5例（Los Angeles）不明原因卡氏肺孢虫肺炎病例，患者都是同性恋者，此前只知道这些疾病仅见于免疫缺陷或抑制病人，如器官移植、液血肿瘤等。这个报告立即得到全美许多医生的响应，他们在近两年来陆续也在许多年青患者中看到大量难以解释的疾病，如原虫CNS感染、淋巴腺病、恶性肿瘤（如卡波氏肉瘤），这些病例后被称为获得性免疫缺陷综合症（Aquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS） 1983年和1984年从AIDS患者分离到病毒，称为淋巴腺病相关病毒（Lymphadenopathy-associated virus，LAV）、人类嗜T淋巴细胞病毒III型（Human T-lymphotrophic virus type III，HTLV-III）和AIDS相关病毒（AIDS-related retrovirus，ARV）。后发现是同一种病毒，故于1986年正式称为人类免疫缺陷病毒（Human immunodeficiency virus, HIV）

7 分型（type） 在西非也分离到引起AIDS的另一株逆转录病毒，其核酸与前者有70%的同源性，于是将HIV分两型 HIV-1：流行于世界各地

8 Viral genome 9.2kb +ssRNA with three structual genes and six regulatory genes.

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10 基因组全长9.2KB 两端含长末端重复序列（LTR） 3个结构基因（env、pol、gag）
6个调节基因（tat、rev、nef、vif、vpr和vpu）

11 结构基因（Strucutre Genes）
Encoded Protein Function of Protein gag P24, p7 Nucleocapsid p17 Matrix pol Reverse transcriptase Transcribes RNA genome into DNA Protease Cleaves precusor polypeptides Integrase Integrates viral DNA into host cell DNA env gp120 Attachment to CD40 protein gp41 Fusion with host cell

12 调节基因（Regulatory Genes）
vif viral infectivity factor tat transactivating protein vpu viral protein U rev regulator of virion protein expression nef negative regulatory factor

13 Regulatory Genes Found in HIV That Are Required for Replication
Protein Protein Function tat Tat Activation of transcription of viral genes rev Rev Transport of late mRNA from nucleus to cytoplasm

14 Regulatory Genes Found in HIV That Are Not Required for Replication
Protein Function of Protein nef Nef Decreases CD4 proteins and class I MHC proteins on surface of infected cells Important for pathogenesis by SIV vif Vif Stabilizes newly synthesized viral DNA and transports core through cytoplasm vpr Vpr Transports viral core from cytoplasm into nucleus in nondividing cells vpu Vpu Enhances virion release from cell

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23 Replication

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26 HIV env genetic subtypes (1998)
Adapted from J. Mullins

27 人工培养 HIV感染的宿主范围狭窄，仅感染表面有CD4受体的细胞。实验室常用经PHA转化3天后的正常人T细胞培养分离病毒。感染病毒的细胞出现多核巨细胞CPE，出现环状排列多个核。感染细胞可查到病毒抗原，培养液中也可测出逆转录酶活性 动物模型是恒河猴和黑猩猩，但症状与人的AIDS不同

28 抵抗力与消毒 抵抗力不强 WHO的标准 100C 20min 高压蒸汽灭菌法 20min 在室温可持续7天
在体液56C30min可灭活。常用化学消毒剂如0.5%次氯酸钠、10%漂白粉、50%乙醇、35%异丙醇、0.3%H2O2、5%来苏尔10min可把病毒灭活 冻干血制品需68 C72h才能保证污染的病毒灭活 WHO的标准 100C 20min 高压蒸汽灭菌法 20min

29 传染源和传播途径 传染源 传播途径 血液传播 性传播 垂直传播 HIV感染者和AIDS患者 血液、精液、阴道分泌物、乳汁、唾液均可分离病毒
输血、血液制品、吸毒、器官移植等 全世界HIV感染者中22%是吸毒者 中国72.4%的AIDS患者是因吸毒染上HIV 性传播 垂直传播

30 临床表现 4个阶段，典型过程需要10年以上 原发感染 潜伏感染 有症状感染 典型AIDS

31 AIDS相关综合症期（AIDS-related complex, ARC）
原发感染 HIV进入机体后约需8-12周出现病毒血症，3-6周在许多感染者（50-70%）体内发展成急性单核细胞增多症样表现，其后大多数以前病毒形式整合于宿主细胞染色体中，进入长期、无症状的潜伏感 潜伏感染 长达6月-10年，不表现症状 AIDS相关综合症期（AIDS-related complex, ARC） 早期有发热、盗汗、全身倦怠、体重下降、皮疹及慢性腹泻症状，并有进行性淋巴结病

32 典型AIDS：出现中枢神经系统疾患，合并条件性细菌、真菌和寄生虫感染，并发肿瘤（Kaposi肉瘤）
原虫（Protozoal） 卡氏肺胞虫肺炎（pneumocystis carinii，now thought to be a fungi），toxoplasmosis, crytosporidosis 真菌（Fungal） 白假丝酵母菌病（candidiasis），新生隐球菌感染（crytococcosis）, histoplasmosis, coccidiodomycosis 细菌（Bacterial） 结核（Mycobacterium avium complex）, 非典型支原体感染（atypical mycobacterial disease）, 沙门菌败血症（salmonella septicaemia）, 多发性反复化脓性细胞感染（multiple or recurrent pyogenic bacterial infection） 病毒（Viral） CMV, HSV, VZV, JCV 死亡多发生在临床症状出现后两年内，5年内死亡率高达90%

33 Kaposi’s Sarcoma

34 With dissemination to extrapulmonary sites, Pneumocystis carinii tends to produce foci with prominent calcification, as seen in the kidney here grossly With giemsa stain at high magnification, the faint bluish dot-like intracystic bodies of Pneumocystis carinii in lung are seen in this cytologic preparation from a bronchoalveolar lavage Pneumocystis carinii

35 Candida Albicans Candida infections are common with AIDS, but most often appear as oral thrush, which is a nuisance but not life-threatening. Disseminated infections are uncommon, but here is a rare Candida pneumonia, which resembles a bacterial bronchopneumonia.

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41 Clincal Response Persistent No generalized infection lymphadeno- pathy
Exposue to HIV No infection Infection Acute disease Persistent generalized lymphadeno- pathy Asymptomic AIDS- related complex AIDS Neurological disease

42 致病机理 Cell tropism: CD4+ T cells, Macrophages 对CD4+细胞的破坏
病毒感染致免疫病理所引起的细胞损伤 导致免疫系统功能的改变 神经细胞的损害

43 HIV对CD4+细胞的破坏 病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒出芽释放，增加了细胞通透性 大量未整合的病毒cDNA，干扰细胞生物合成
感染T细胞表面的HIV gp120与非感染细胞表面的CD4分子结合，介导细胞融合而产生大量多核巨细胞，使T细胞减少

44 免疫病理 受染细胞膜的HIV包膜糖蛋白抗原可被特异CTL识别并因此破坏细胞
受染细胞膜的HIV包膜糖蛋白抗原与特异性抗体结合通过ADCC破坏细胞 HIV的gp120与T细胞膜上的MHC II类分子有一同源序列区，抗gp120抗体能与这类T细胞起交叉反应，即病毒诱导的自身免疫使T细胞造成免疫病理损害

45 免疫系统功能的改变 HIV感染后B细胞功能出现异常，表现为多克隆活化，出现高丙种球蛋白血症，循环血免疫复合物及自身抗体含量增高
某些单核细胞和巨噬细胞亚群表达CD4分子，HIV可与之结合而进入细胞，HIV在单核细胞中能存活，不引起CPE，因此单核细胞是HIV在体内的主要贮存库，同时削弱淋巴细胞和巨噬细胞的功能 降低受感染者体内的IL-2、-IFN 和其他细胞因子浓度

46 神经细胞的损害 约有40%-90%的AIDS患者有不同程度神经症状，如HIV脑病、脊髓病变、周围神经炎和痴呆
病毒通过受染的单核细胞进入CNS，单核细胞释放单核细胞因子，对神经元有毒性，同时使炎性细胞当浸润产成脑部组织损伤

47 病毒免疫逃逸的机理 CD4+ T细胞大量减少，使整个免疫系统失效
病毒基因整合位于染色体，细胞可以不表达或少表达病毒抗原，使宿主细胞长期呈“无抗原”状态 病毒包膜蛋白一些区段有高度变异性，致使不断出现新抗原而逃逸免疫系统的识别

48 微生物学诊断 检测抗体 检测RNA 筛选与验证 方法 PCR ELISA RIA IFA Western blot
HIV抗原与其他逆转录病毒（如HTLV）有交叉反 应，易造成假阳性结果。因此只用于初筛 阳性者必须经Western blot验证

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50 ELISA for HIV antibody Screening tests should be as sensitive as possible
Microplate ELISA for HIV antibody: coloured wells indicate reactivity

51 Western blot for HIV antibody Confirmatory tests should be as specific as possible
There are different criteria for the interpretation of HIV Western blot results e.g. CDC, WHO, American Red Cross. The most important antibodies are those against the envelope glycoproteins gp120, gp160, and gp41 p24 antibody is usually present but may be absent in the later stages of HIV infection

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54 快速诊断: ORA HIV 从手指上采两滴血，检查血液中是否存在HIV抗体，只需20分钟就能得到检测结果
费用只需10至15美元 美国食品和药品管理局（FDA）已经在2002年11月批准在美国广泛采用

55 预防 建立HIV感染和AIDS的监测网络，控制疾病的流行蔓延 进行广泛宣传教育，取缔娼妓，换抵制吸毒
检测高危人群包括供血员、同性恋、吸毒者、血友病患者、国外旅行者和外国使馆工作人员 禁止血液制品（如凝血因子VIII）进口 加强国境检疫、留检等 疫苗正在研制中，目前仍然存在巨大困难

56 治疗：鸡尾酒疗法（HAART） 联合交替使用2种HIV逆转酶抑制剂和一种蛋白抑制剂（Saquinavir、Ritonavir）可有效将血液中HIV含量降到最低，极大延长感染者寿命 无法清除整合的病毒，不能彻底清除病毒 药物有副作用 在中国年均费用8万 RMB Highly Active Anti-Retroviral Therapy HAART: Two nucleoside analog RT inhibitors and 1 protease inhibitor Now also: Two nucleoside analog RT inhibitors and 1 non nucleoside

57 HAART治疗指征（2000） 1. HIV1 Viral load > 10-30000/ml
2. CD4 value < 250 cells/ml. 3. Full Blown AIDS ….

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59 耐药性：面临新的挑战

60 我国疫情

61 2003年国家统计数据 截止2002年底，全国累计报告艾滋病病毒感染者40560例，较2001年底累计增长32.0%。增长幅度较往年略有下降（2001年底比2000年底上升36.5%）。其中艾滋病病例2 639例, 较2001年底上升65.6%，死亡1 047例 艾滋病传播以经血途径为主，主要是吸毒，占 63.7%（25828例）；经性途径占8.1 %（3292 例）；经采血（浆）途径占9.3 %（ 3776例） 根据专家估计，截止到2002年底，我国艾滋病病毒感染者已达100余万    

62 2002年我国艾滋病疫情 2002年我国艾滋病疫情仍呈上升态势 全国报告感染者9824例
比2001年上升了19.5 %，但是上升的幅度有所下降（2001年比2000年上升了58%） 病人1045例，比2001年增加46.4% 死亡363例

63 HIV在中国传播的特点 感染者以20—39岁为主 主要分布在农村 男女比例为 5.2 : 1
最主要传播途径是静脉注射毒品（63.7%），其次是性传播（8.1%），血浆9.3%。 但是，性传播是深圳检出感染者的主要传播方式（云南、贵州、新疆等地，艾滋病毒70%是由静脉注射为传播途径 ） 中国的重灾区：云南、广西、新疆

64 宋鹏飞，男，18岁，是目前中国惟一个公开自己姓名的艾滋病毒携带者。1998年2月，宋鹏飞在家不小心被剪刀刺伤腿部。在当地医院，医生以贫血为由给宋鹏飞输血。其间，因手术失败，宋鹏飞先后被输血1350CC，随后转到北京304医院，在入院常规检查中，被证实感染了艾滋病毒。治疗期间，因媒体披露，宋鹏飞被迫公开了自己的姓名，一度成为中国的名人，曾作为艾滋病毒携带者的代表参加了在马来西亚和南非举行的“世界艾滋病会议”。两年来，他坚持使用“鸡尾酒疗法”，以抑制病毒的扩散，每年的医疗费达15万元。因当地村民拒绝他回乡，一家三口在北京暂住在一处破旧的危楼里。目前，全家已完全失去经济来源，急需社会救援 中国惟一公开姓名的艾滋少年

65 法规 《中国预防与控制艾滋病中长期规划（1998-2010年）》 《中国遏制与防治艾滋病行动计划（2001-2005年）》
相关法规：《传染病防治法》、《母婴保护法》、《婚前保健工作规范》、《全国艾滋病工作检测规范》

66 措施 建立艾滋病综合防治示范区 加强艾滋病紧急医疗救治 广泛开展艾滋病宣传教育 加强艾滋病干预工作 加强疾病预防控制机构建设，提高防治能力
我国已在22个行政区对11种高危人群建立了6000个干预点 加强疾病预防控制机构建设，提高防治能力 组织开展联合督导 积极开展国际合作，为我国艾滋病防治工作争取资金和技术支持

67 针对中国疫情的预防措施 正确使用避孕工具 拒绝毒品 避免不必要的输血和注射

68 世界艾滋病日：1998年12月1日 2004:“关注妇女，抗击艾滋”。 2003年“Live and let live”“相互关爱,共享生命”。 2002年 Live, Let Live 生存和让他们生存（相互关爱，共亨生命） 2001年主题：预防艾滋病，你我同参与 2000年 预防艾滋病，男士责无旁贷（中国） 1999 Listen ,Learn, Live! 关注青少年、预防艾滋病--倾听、学习、尊重 1998 Force for Change:World AIDS Campaign with Young People 青少年--迎战艾滋病的生力军 1997 Children Living in a World with AIDS 生活在有艾滋病世界中的儿童

69 1988 Join the Worldwide Effort 全球共讨,征服有期
1989 Our Lives ,Our World --Let‘s Take Care of Each Other 我们的生活,我们的世界--让我们相互关照 1990 Women and AIDS 妇女和艾滋病 1991 Sharing the Challenge 共同迎接艾滋病的挑战 1992 A Community Commitment 预防艾滋病,全社会的责任 1993 Time to Act 时不我待,行动起来 1994 AIDS and the Family 艾滋病和家庭 1995 Shared Rights,Shared Responsibilities 共享权益,共担责任 1996 One World,One Hope 同一世界,同一希望

70 人类嗜T细胞病毒（HTLV）Human T-Cell Lymphotropic Virus

71 概况 1978年从T细胞白血病患者的淋巴结和外周血淋巴细胞中，观察到一种有中央位类核的C型病毒颗粒，命名为人类嗜T细胞病毒（Human T-cell lymphotropic virus, HTLV）或人类T细胞白血病病毒（Human T-cell leukemia virus, HTLV） 后从一例毛细胞白血病患者的外周血中分离出另一种嗜T细胞病毒，将之称为HTLV II型，而将前者称为HTLV I 型。二者的基因组有50%同源性

72 生物学性状 球形，100nm，典型逆转录病毒结构。有包膜，包膜上有gp120蛋白，衣壳是由p24和p18构成。两端有LRT，基因结构与HIV相似

73 致病性 传播途径：血液途径（输血、注射、器官移植、血液制品）、性行为、垂直传播
I 型和 II 型都引起成人T细胞白血病，多发于40岁上上的成人。T细胞大量增殖、转化、癌变，淋巴结肿大，肝脾肿大，并发高钙血症、皮肤红斑、皮疹等，预后不良

74 发病机理 不象鸡肉瘤病毒等急性RNA肿瘤病毒那样激活癌基，病毒整合染色体也不激活癌基因，可能的机理是染上病毒的细胞大量分泌IL-2，过量的IL-2使得CD4+细胞大量增殖

75 微生物诊断 病毒分离与鉴定 抗体检测(HTLV 1 specific antibody)
采集外周血分离淋巴细胞，经PHA刺激，加入IL-2培养3—6周，电镜观察有无C型病毒颗粒 抗体检测(HTLV 1 specific antibody) ELISA 间接免疫荧光