实验一 动物细胞制片技术及减数分裂观察.

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1 实验一 动物细胞制片技术及减数分裂观察

2 一、实验目的 1.了解动物生殖细胞的形成过程，观察减数分裂过程中染色体的动态变化； 2.学习并掌握制片和染色技术。

3 减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂，仅在配子形成过程中发生。这一过程的特点：
二、实验原理 减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂，仅在配子形成过程中发生。这一过程的特点： 1.连续进行两次核分裂，而染色体只复制一次，结果形成四个核，每个核只含单倍体数的染色体，即染色体数减少一半，所以称为减数分裂； 2. 前期特别长，而且变化复杂，包括同源染色体的配对、交换与分离。 整个减数分裂过程可分为下列几个时期：

4 减数第一次分裂 前期Ι 细线期：第一次分裂开始，染色质浓缩为几条细而长的细线。每一条染色体已复制为二个单体，但在显微镜下仍看不出染色体的双重性。（减数I前期-----细线期）

5 偶线期：染色体形态与细线期没有多大差别，同源染色体开始配对(联会)，出现联会复合体。（减数Ι前期-----偶线期）
粗线期：同源染色体配对完毕，称双价体，每个双价体含有四个染色单体(四分体) 。染色体继续变短变粗。（减数Ι前期-----粗线期）

6 双线期：配对的同源染色体开始分开。由于非姊妹染色单体间发生过交换，因此有交叉现象。交叉数减少，交叉向染色体端部移动(交叉端化)，染色体螺旋化程度加深。（减数Ι前期----双线期）
浓缩期：又称终变期，仍为n个双价体，染色体变得更短粗。核仁核膜消失。（减数Ι前期-----浓缩期）

7 中期Ι ：各个双价体排列在赤道板上，纺锤体形成，两个同源染色体上的着丝粒逐渐远离。双价体开始分离。染色体仍为2n，每一染色体含有两个染色单体。（减数Ι-----中期）

8 末期Ι：染色体解旋，又呈丝状，核膜形成，胞质分裂，成为二个子细胞。（减数Ι-----末期）
间期：在减数第二次分裂开始以前，两个子细胞进入间期。但有的植物如延龄草和大多数动物不经过末期和间期，直接进入减数第二次分裂的晚前期。（间期）

9 减数第二次分裂 前期 Ⅱ ： 染色体缩短变粗，染色体开始清晰起来。每个染色体含有一个着丝粒和纵向排列的两条染色单体。（减数Ⅱ-----前期）
中期Ⅱ: 染色体排列在赤道面上，每个染色体有一个着丝粒，两条染色单体开始分离。此时细胞的染色体数为n，每条染色体有两条染色单体。（减数Ⅱ-----中期）

10 后期Ⅱ: 两条染色单体分离，移向两极，每极含n条染色体。（减数Ⅱ-----后期） 末期Ⅱ： 染色体逐渐解螺旋，变为细丝状，核膜重建，核仁重新形成。胞质分裂，各成为两个子细胞。（减数Ⅱ-----末期）图一 减数分裂模式图

11 减数分裂结果： 一个细胞经减数分裂形成四个子细胞，每个子细胞中有n个染色体。因为细胞分裂两次，染色体只复制一次。

12 三、实验材料 四、实验仪器和试剂 短角斑腿蝗(Catantops brachycerus)精巢 仪器：冰箱，显微镜
试剂： Carnoy固定液 ，1N HCL ，70%乙醇 ， 改良苯酚品红染液

13 五、实验步骤 1.采集蝗虫: 随蝗虫物种的不同，采集时间有变化。
采集方法可用手抓或用网捕捉。如短角斑腿蝗喜温暖，可在十月左右，在晴天阳光下的草地用扫网捕捉。 2.取材固定: 用镊子夹住雄虫尾部，向外拉。可见到一团黄色组织块，这就是蝗虫的精巢。剔除精巢上的其他组织，将其放到 Carnoy 固定液中固定1.5-2小时，再放入70%酒精溶液中。

14 3.剥曲精细管: 切取较粗端，约占全长的1/3-1/2(粗端远离输精管,细胞分裂旺盛，细端近输精管,多已经生成精子)，弃细端，蒸馏水冲洗，吸干水分。
4.1NHCL解离2-5分钟,蒸馏水多次冲洗(因为HCL影响染色)。 5.将材料放在载片上切成约1mm之几段,分置于不同载片，滴一滴改良苯酚品红，染15-20分钟。 6.压片：在材料上加盖玻片，吸去多余染液，上覆吸水纸，用拇指压盖玻片。 7.镜下观察。

15 六、实验结果 绘制观察到的减数分裂各时期，尤其是前期Ι各个时期染色体的变化图。

16 七 、实验分析与讨论 1.分析此次实验成败的原因。 2. 本次实验有哪些地方可以改进？

17 八、思考题 1.减数分裂的遗传学意义。 2.减数的机理是什么？ 3.交叉和交换的关系。

18 1.刘祖洞 ,江绍慧 ,1979年 ,《遗传学》,人民教育出版社 ,北京 2.遗传学实验 高等教育出版社
九、参考文献 1.刘祖洞 ,江绍慧 ,1979年 ,《遗传学》,人民教育出版社 ,北京 2.遗传学实验 高等教育出版社 3.遗传学实验方法和技术 高等教育出版社

19 减数Ι前期----细线期

20 减数Ι前期----偶线期

21 减数Ι前期----粗线期

22 减数Ι前期----双线期

23 减数Ι前期-----浓缩期

24 减数Ι-----中期

25 减数Ι-----后期

26 减数Ι-----末期

27 间期

28 减数Ⅱ-----前期

29 减数Ⅱ-----中期

30 减数Ⅱ-----后期

31 减数Ⅱ-----末期

32

33 减数Ι前期—细线期 偶线期

34 粗线期 双线期

35 浓缩期 中期 Ι

36 后期Ι 末期Ι

37 间期 减分Ⅱ(前期)

38 减分Ⅱ (后期 ) 减分Ⅱ (末期 )

39 蝗虫减数分裂