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实验一 大黄中大黄素的提取、分离和鉴定 天然药物化学实验 中南民族大学药学院
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一、目的要求 1.掌握蒽醌苷元的提取方法——酸水解法。 2.掌握pH梯度萃取法的原理及操作技术。 3.学习硅胶柱色谱法。
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二、实验原理 主要蒽醌类成分: 大黄素 大黄酚 大黄素甲醚 大黄酸 芦荟大黄素
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pH pH梯度萃取法 大黄素 大黄酸 NaHCO3 Na2CO3 H+ 柱层析
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索氏提取器 从固体原料中萃取化合物 为什么原料药粉末必须用纸包裹?
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三、实验方法 ① 提取总蒽醌 20% H2SO4,100ml 二氯甲烷,100ml 大黄粉10g 冷却,纱布过滤 回流1h
注:滤渣用少量二氯甲烷冲洗 ①
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分液,再用100ml二氯甲烷萃取两次,合并二氯甲烷萃取液
水层 二氯甲烷层 萃取过程中注意放气操作 ②
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③ 浓缩二氯甲烷层至约100 ml 正常关闭 真空水泵工作正常,回收瓶稳固(夹住) 装上待蒸溶剂瓶 关闭真空阀 打开旋转开关 正常使用
注意:加热温度设为40℃ ③
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薄层检测 ? 展开剂:石油醚∶乙酸乙酯:7 ∶ 3(体积比) 注意:展开剂液面不能没过点样点 ④
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碱溶酸沉 盐酸,缓慢滴加,充分搅拌 监测pH值 30 ml ×2 NaHCO3水层 二氯甲烷层 抽滤 TLC ⑤
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碱溶酸沉 盐酸,缓慢滴加,充分搅拌 监测pH值 30 ml ×2 Na2CO3水层 二氯甲烷层 抽滤 滤纸,回流 ⑥
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Na2CO3水层滤纸(附有大黄素粗提物) 回流0.5h 蒸干 ⑦
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湿法装柱 ⑧ 脱脂棉 粗提物 用少量流动相将粗提物溶解,用滴管沿柱壁缓慢加入 硅胶:200300目,35 g 脱脂棉
流动相:石油醚∶乙酸乙酯:7 ∶ 3(体积比) ⑧
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TLC检测 上柱后 上柱前 标准品 大黄素
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抽滤 ☺ ☺ ☺ ☺ Na2CO3 提取大黄素 NaHCO3 提取大黄酸 ☺:TLC检测
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实验报告 1、简要说明实验原理 2、详细描述实验现象并对其进行分析 思考题: 为什么使用索氏提取器时原料药粉末必须用纸包裹?
根据标准品,试分析第一次回流提取物和柱层析薄层检测各点归属,说明原因。
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