缺 氧 实 验 （Hypoxia Experiment)

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1 缺 氧 实 验 （Hypoxia Experiment)
陆 源 浙江大学学院

2 一、中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响讨论
常压乏氧性缺氧实验的测定指标？ 如何保证小鼠处于常压环境？ 本实验采用哪种实验设计，目的是什么？ 需要控制两组实验动物体重、性别？为什么？ 本实验采用哪种统计方法？ 本实验有哪些非处理因素？ 耗氧量测定的原理？ 从实验设计角度看，放置钠石灰的作用？ 本实验方法可用于哪些研究？

3 二、缺氧动物模型的复制讨论 本实验复制血液性缺氧动物模型的方法？ 本实验采用哪种实验设计方法？ 本实验采用哪种统计描述、显著性检验方法？
动物乏氧性缺氧时的皮肤或粘膜的颜色？为什么？ 动物NaNO2 、CO中毒时的粘膜或皮肤的颜色？为什么？ NaNO2中毒的解救方法？机制？ CO中毒的解救方法？ 本实验方法的研究用途？

4 缺氧 指组织供氧不足或用氧障碍，从而引起其代谢、功能以致形态结构发生异常变化的病理过程。
缺氧 指组织供氧不足或用氧障碍，从而引起其代谢、功能以致形态结构发生异常变化的病理过程。 低张性缺氧（hypotonic hypoxia):动脉血氧分压降低引起的组织供应不足 血液性缺氧（hemic hypoxia):Hb的质或量改变,导致血氧容量降低或Hb结合的氧不易释出所引起的缺氧 循环性缺氧（circulatory hypoxia):组织血流量减少引起的组织供应不足 组织性缺氧（histogenous hypoxia):组织细胞利用氧障碍所至

5 小鼠性别判别 小鼠小鼠捉拿和常用给药方法 类 别 外生殖器与肛门之间 雄 性 距离长 ，有毛生长，无纵行沟 雌 性
类 别 外生殖器与肛门之间 雄 性 距离长 ，有毛生长，无纵行沟 雌 性 距离短，无毛生长，能见到一条纵行沟 小鼠小鼠捉拿和常用给药方法

6 一、中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响
The Effect of Central Nervous System Depression and Low Temperature on Hypoxia 目的 1.学习小鼠耗氧量的测定方法 2.观察中枢神经系统机能抑制和低温对缺氧的影响

7 1 材 料(materials) 1.1 动物 体重242g ICR小鼠(mouse)。
1.2 药品和试剂 氯丙嗪(chlorpromazine) 、钠石灰（ soda lime)。 为中枢多巴胺受体的阻断剂: 抗精神病、镇吐、能增强催眠、麻醉、镇静作用、阻断外周α-肾上腺素受体 降温作用 抑制体温调节中枢，使体温降低，体温可随外环境变化而变化 “人工冬眠”：用较大剂量时，置患者于冷环境中(如冰袋或用冰水浴)，可出现镇静、嗜睡、体温降低至正常以下(如34℃或更低)、基础代谢降低、器官功能活动减少、耗氧量减低而呈“人工冬眠”状态 CaO+NaOH+CO NaHCO3+CaCO3

8 1 材 料(materials) 1.1 动物 体重242g的雄性ICR小鼠(mouse)。
1.2 药品和试剂 钠石灰（soda Lime)、氯丙嗪(chlorpromazine) 、生理盐水。 1.3 装置 测耗氧装置（oxygen consumption gauge）

9 1 材 料(materials) 缺氧瓶 测量槽 1.1 动物 体重242g的雄性ICR小鼠(mouse)。
1.2 药品和试剂 钠石灰（soda Lime)、氯丙嗪(chlorpromazine) 、生理盐水。 1.3 装置 测耗氧装置（oxygen consumption gauge） 缺氧瓶 测量槽

10 1 材 料(materials) 起点 1.1 动物 体重242g的雄性ICR小鼠(mouse)。
1.2 药品和试剂 钠石灰（soda Lime)、氯丙嗪(chlorpromazine) 、生理盐水。 1.3 装置 测耗氧装置（oxygen consumption gauge） 起点

11 2 方法 2.1 常压乏氧性缺氧测定小鼠成活时间和耗氧量
2.1 常压乏氧性缺氧测定小鼠成活时间和耗氧量 2.2 分组 20只小鼠随机分为生理盐水组和氯丙嗪组，生理盐水组ip NS 0.1ml/10g，室温放置10~15min开始实验；氯丙嗪组ip 0.25％氯丙嗪 0.1ml/10g，冰浴10~15min，呼吸频率70~80次/min开始实验。 2.3 观察指标 2.3.1 耐缺氧时间 记录密闭测耗氧装置开始至小鼠死亡时间。 2.3.2 耗氧量 小鼠死亡时，测量槽中水的移动量，即为耗氧量。计算小鼠单位体重和时间的耗氧率。 2.5 统计处理 数据以x±s表示，统计学分析采用Student′s t- test方法。

12 3 结果（results) 4 讨论 (discussion) 5 参考文献(references)
3.1 小鼠耐缺氧时间 氯丙嗪组在125ml缺氧瓶中的成活时间x1±s(s)显著长于生理盐水组x2±s(s) （p<0.05)，见表1。 3.2 小鼠耗氧率 氯丙嗪组在125ml缺氧瓶中的耗氧率x1±s (ml/g/s)显著低于生理盐水组x2±s (ml/g/s) （p<0.05) 。 4 讨论 (discussion) 5 参考文献(references)

13 二、缺氧动物模型的复制 The Establishment of Animal Models of Hypoxia 目的
复制乏氧性、血液性缺氧动物模型及NaNO2中毒的解救方法。 观察不同类型缺氧在缺氧过程中黏膜和血液色泽的变化。

14 1 材 料(materials) 2 方法 (methods) CO 1.1 动物 体重242g的ICR小鼠(mouse)。
1.2 药品和试剂 钠石灰（soda lime) 亚硝酸钠（ sodium nitrite ) 、亚甲基蓝(美蓝）（methylene blue，MB）、 0.9％NaCl (physiological saline solution) 、 CO(carbon monoxide)。 2 方法 (methods) 2.1 将20只小鼠随机分为乏氧性缺氧组和一氧化碳组。乏氧性缺氧组小鼠放入含有5g钠石灰的500ml密闭瓶中，注入10ml 空气；一氧化碳组小鼠放入500ml密闭瓶，注入10ml CO气体。 CO

15 2 方法 (methods) 2.2 将20只小鼠随机分为亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组。亚硝酸纳组小鼠腹腔注射50g/L亚硝酸纳0.2ml后即刻腹腔注射生理盐水0.2ml ；亚硝酸纳治疗组小鼠腹腔注射50g/L亚硝酸纳0.2ml后即刻腹腔注射10g/L亚甲基蓝0.2ml 。

16 2 方法 (methods) 3 结果(results)
2.3 记录实验前和实验过程中小鼠行为（挣扎、痉挛）和耳、唇、尾的颜色。记录30min中小鼠死亡数和死亡小鼠肝脏颜色。 2.4 数据 小鼠死亡率用百分率表示，统计学分析采用Fisher确切概率法。 3 结果(results) 3.1 小鼠一氧化碳中毒的死亡率 一氧化碳组小鼠30min内的死亡率（p）显著高于乏氧性缺氧组的死亡率（p1）（p<0.05)。 3.2 小鼠亚硝酸盐中毒的死亡率 亚硝酸盐组小鼠30min内的死亡率（p）显著亚硝酸盐加美兰组的死亡率（p1）（p<0.05)。

17 3 结果(results) 表2 不同类型缺氧肝脏颜色比较 类 别 血液或肝脏的颜色 乏氧性缺氧 一氧化碳中毒 亚硝酸盐中毒
3.1 乏氧性缺氧死亡的小鼠血液呈暗红色，一氧化碳中毒死亡小鼠的血液呈…… 表2 不同类型缺氧肝脏颜色比较 类 别 血液或肝脏的颜色 乏氧性缺氧 一氧化碳中毒 亚硝酸盐中毒